本文關(guān)鍵詞：一重和三重腦震蕩鼠BB、BW和FS行為學(xué)變化及腦組織GFAP和MBP變化研究　出處：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：第一部分三重腦震蕩大鼠BB、BW和FS行為學(xué)變化研究 [目的]：建立三重腦震蕩(multiple cerebral concussion,MCC)大鼠模型,觀察腦震蕩后平衡木實驗(beam balance test,BB)、橫桿跑動實驗(beam walking test,BW)及強迫游泳實驗(forced swimming test,FS)行為學(xué)變化,評估大鼠傷后靜態(tài)和動態(tài)平衡運動、學(xué)習(xí)、記憶功能的恢復(fù)情況及精神活動的抑郁樣狀況。[方法]：(1)動物分組：成年健康SD大鼠20只,雌雄各半,體重260±20g,隨機分為MCC72h橫桿跑動組和MCC72h強迫游泳組,每組各10只,雌雄各半。(2)應(yīng)用金屬單擺打擊裝置,每隔72h打擊一次PCC,共打擊3次以復(fù)制MCC72h模型。(3)應(yīng)用BB和BW實驗評價MCC72h大鼠傷后16天內(nèi),靜態(tài)和動態(tài)平衡功能、運動協(xié)調(diào)功能和運動學(xué)習(xí)記憶功能的變化并與本課題組先前PCC組和MCC24h組結(jié)果進行比較;應(yīng)用FS實驗評價MCC72h大鼠傷后第3、7、15、30天精神抑郁樣狀況,并與本課題組先前PCC組和MCC24h組結(jié)果進行比較。[結(jié)果]：(1)BB評分結(jié)果：PCC組和MCC72h組大鼠傷后在整個實驗期間均能保持相對靜態(tài)平衡,結(jié)果均為(60.00±0.00s); MCC24h大鼠傷后9天內(nèi)出現(xiàn)不同程度的靜態(tài)平衡功能的損害。(2)BW評分結(jié)果：PCC組與MCC72h組大鼠傷后第一天即恢復(fù)至正常值,即整個實驗期間分值均為5分,所有受試大鼠在噪音的刺激下都能順利通過跑桿上所有障礙并進入暗盒內(nèi)；MCC24h大鼠傷后第1-2天BW評分降低,與PCC組和MCC72h組均有統(tǒng)計學(xué)差異,P0.05,之后恢復(fù)至5分。(3)BW步入潛伏期結(jié)果：MCC72h組與正常組相比,傷后第1-3天均有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；PCC組與MCC72h組傷后大鼠STL在整個觀測時間點STL差異均無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；MCC24h組與MCC72h組在傷后第3-6天,STL差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。(4)BW失足頻次結(jié)果：MCC72h大鼠傷后失足頻次增加,第3天達到高峰,之后逐步減少,第8天又出現(xiàn)一個小高峰。(5)FS中抑郁樣行為頻次：MCC72h傷后第3、15、30天與正常組、PCC組和MCC24h組相比,C行為頻次最多。[結(jié)論]：(1)PCC、MCC24h與MCC72h大鼠傷后靜態(tài)平衡能力未見損傷改變。(2) PCC、MCC72h大鼠的動態(tài)運動平衡、運動協(xié)調(diào)功能、學(xué)習(xí)和記憶功能在末次打擊后4天內(nèi)出現(xiàn)短時異常改變,而MCC24h大鼠的相應(yīng)功能則在傷后第8天均表現(xiàn)出明顯損傷。(3) PCC、MCC24h和MCC72h三種不同損傷類型傷后平衡運動功能損傷的嚴重程度為：MCC24hMCC72hPCC正常對照組；抑郁樣行為頻次：MCC72hMCC24hPCC正常對照組。 第二部分一重和三重腦震蕩大鼠腦組織GFAP和MBP動態(tài)變化研究 [目的]：建立一次性腦震蕩(pure cerebral concussion,PCC)和三重腦震蕩(multiple cerebral concussion, MCC)大鼠模型,其中三重腦震蕩的打擊間隔時間分別為24h和72h,觀察并分別比較上述不同損傷組之間膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)和髓鞘堿性蛋白(nyelin basic protein, MBP)的變化以及PCC和MCC傷后各天數(shù)組內(nèi)GFAP與MBP的變化,以進一步了解大鼠不同腦震蕩后神經(jīng)組織學(xué)產(chǎn)生的變化。 [方法]：(1)動物分組：成年健康SD大鼠96只,雌雄各半,體重260±20g,隨機分為正常組、PCC模型組、MCC24h模型組、MCC72h模型組,各模型組再隨機分為Id、4d、8d、16d和24d5個觀測點。(2)應(yīng)用金屬單擺打擊裝置復(fù)制PCC大鼠模型30只、MCC24h模型30只、MCC72h模型30只。(3)用抗GFAP和抗MBP抗體進行免疫組化S-P法染色,檢測大鼠中隔冠狀斷面、海馬區(qū)冠狀斷面和腦干失狀斷面的不同腦區(qū)的GFAP和MBP表達,采用圖像分析系統(tǒng)對上述腦區(qū)的GFAP和MBP陽性反應(yīng)物分別進行細胞計數(shù)和光密度值測定分析。 [結(jié)果]：(1)GFAP陽性細胞數(shù)傷后變化結(jié)果①GFAP在PCC、MCC24h、MCC72h中隔冠狀斷面、海馬區(qū)冠狀斷面和腦干失狀斷面的各腦區(qū)陽性細胞數(shù)于傷后第1天就逐漸增多,于傷后第8天達到高峰,與正常對照組相比,陽性細胞數(shù)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)；②MCC72h傷后第1天GFAP陽性細胞計數(shù)即進入高表達量,多于MCC24h、PCC和止常對照組；③MCC24h傷后第8天GFAP計數(shù)表達最多,高于其他各組,且持續(xù)高表達時間最長；④PCC傷后第1天GFAP表達即增加,與正常對照組比較差異具有統(tǒng)計意義(p0.05),增加和減少的幅度均最小。(2)MBP陽性表達物光密度值結(jié)果①MBP在PCC、MCC24h、MCC72h中隔冠狀斷面、海馬區(qū)冠狀斷面和腦干失狀斷面的各腦區(qū)陽性反應(yīng)物光密度值于傷后第1天就逐漸降低,于傷后第4天達到最低谷,與對照組相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)；②MCC72h傷后第1天即進入低表達,與PCC陽性反應(yīng)物光密度值相近,但第4天進入低谷表達時低于PCC組,兩組差異比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)；③MCC24h傷后陽性反應(yīng)物光密度值在早期即發(fā)生低表達,至第4天達到最低谷,與其他各組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,且低表達持續(xù)時間長；④PCC傷后第1天陽性反應(yīng)物光密度值即進入低表達狀態(tài),至第4天達到最低谷,之后陽性反應(yīng)物光密度值迅速上升接近正常水平。 [結(jié)論]：(1)采用金屬單擺式機械打擊裝置能夠成功建立MCC72h大鼠模型。(2) PCC、MCC24h和MCC72h末次打擊傷后,GFAP陽性細胞計數(shù)表達出現(xiàn)不同程度的增加,均以傷后8d天表達最多,提示星形膠質(zhì)細胞的損傷嚴重程度：MCC24hMCC72hPCC正常組。(3)PCC、MCC24h和MCC72h傷后,MBP陽性反應(yīng)物光密度值表達出現(xiàn)不同程度的下降,均以傷后4天表達最低,提示少突膠質(zhì)細胞MBP損傷嚴重程度：MCC24hMCC72hPCC正常組。(4)在PCC、MCC24h和MCC72h三種損傷類型中MCC24h損傷程度最重,持續(xù)時間最長,損傷累積效應(yīng)最明顯。(5)各損傷類型組大鼠傷后,各斷面不同腦區(qū)傷后GFAP陽性細胞和MBP陽性反應(yīng)物表達空間分布特征具有彌漫性和沖擊與對沖加重的特點。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：D919.1

【參考文獻】

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1 劉和錄;韓杰輝;竇宇紅;許瑞娜;宋同均;;腦外傷患者髓鞘堿性蛋白和腦源性神經(jīng)生長因子檢測的價值[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2011年13期

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本文編號：1320128