本文關(guān)鍵詞：6種苯二氮卓類藥物的聯(lián)合分析及氯硝西泮在急性中毒大鼠體內(nèi)的分布研究

  更多相關(guān)文章： 法醫(yī)毒物分析 氣相色譜法 苯二氮卓類 氯硝西泮 體內(nèi)分布

【摘要】：【目的】1．建立生物檢材中6種常用苯二氮卓藥物的聯(lián)合分析方法。2．建立氯硝西泮在大鼠體內(nèi)急性中毒模型；研究氯硝西泮在大鼠體內(nèi)的含量分布情況，獲得其在急性中毒情況下體內(nèi)分布規(guī)律和重要毒理學(xué)數(shù)據(jù)。3．研究氯硝西泮在大鼠模型各臟器和部分體液中的分布規(guī)律及特點(diǎn)，為相關(guān)案件檢材的采集、保存、處理、檢測(cè)、死因判定等法醫(yī)學(xué)鑒定提供了相關(guān)的科學(xué)依據(jù)；同時(shí)也為安神類中成藥品中是否違法添加氯硝西泮提供簡(jiǎn)便、可靠的分析方法。 【方法】1．分析方法的建立：待測(cè)生物樣品堿化后，以乙酸乙酯為萃取溶劑進(jìn)行液-液萃取，氣相色譜法（GC）進(jìn)行檢測(cè)。色譜條件：HP-5彈性石英毛細(xì)管柱；氮磷檢測(cè)器（NPD）；柱溫：程序升溫，初始溫度200℃，保持1min，以20℃/min的升溫速率升至270℃，再以5℃/min速率升至280℃，保持4min；進(jìn)樣口、檢測(cè)器溫度均為280℃；分流進(jìn)樣，分流比為5:1；載氣：高純氮?dú)猓偭髁浚?7mL/min，柱流量：4.2mL/min；空氣流量：60mL/min；氫氣流量：2.2mL/min；尾吹氣流量：30mL/min。進(jìn)樣量1μL。2．定性、定量分析：利用氣相色譜法進(jìn)行聯(lián)合分析,通過標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間（tR值）定性。配制地西泮、硝西泮、氯硝西泮、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，確定各目標(biāo)分析物的tR值及出峰順序。配制氯硝西泮的標(biāo)準(zhǔn)工作系列溶液，以氯硝西泮的濃度為橫坐標(biāo)(X)，出峰時(shí)峰面積為縱坐標(biāo)（Y）進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程Y=aX+b，用于生物檢材中氯硝西泮濃度的定量分析。3．分布研究：12只雄性SD大鼠，隨機(jī)分成兩組：實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組各6只。實(shí)驗(yàn)組大鼠以LD50（大鼠LD50為2000mg/Kg）灌胃氯硝西泮溶液；對(duì)照組大鼠灌胃等量生理鹽水，觀察各組大鼠行為表現(xiàn)，30min后大鼠均給予頸椎脫臼處死，室溫條件下立即解剖采集心血、尿液、心、肺、肝、脾、腎、后肢肌肉、腦，分別檢測(cè)其中氯硝西泮的含量。對(duì)照組大鼠作為相應(yīng)的空白對(duì)照。各毒理學(xué)數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理后得出氯硝西泮在大鼠體內(nèi)的分布規(guī)律。 【結(jié)果】1．檢測(cè)結(jié)果：在所建立的氣相色譜分析方法中，得到6種苯二氮卓類藥物的出峰順序依次為：地西泮、硝西泮、氯硝西泮、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖，內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)檢測(cè)無干擾。血、尿、肝中氯硝西泮的定量分析的線性范圍分別為1.0-80.0μg/mL、1.0-80.0μg/mL、1.0-80.0μg/g(S/N≥3)，線性關(guān)系良好。最低檢出限為血液0.2μg/mL、尿液1.0μg/mL、肝臟1.0μg/g。加樣平均回收率數(shù)據(jù)均在97.5%-103.2%之間，日內(nèi)、日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%。2．中毒癥狀：實(shí)驗(yàn)組大鼠灌胃給藥后10min開始出現(xiàn)精神躁動(dòng)、抽搐、肌肉震顫等癥狀，10min后逐漸表現(xiàn)安靜，無方向感，步態(tài)不穩(wěn)，后肢肌張力增強(qiáng)，共濟(jì)失調(diào)，無疼痛反應(yīng)，30min后未死亡。對(duì)照組未見明顯異常。3．體內(nèi)含量分布情況：實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，氯硝西泮廣泛存在于急性中毒大鼠體內(nèi)，，在各臟器和體液中的分布特點(diǎn)為：肺㧐肝㧐心㧐腎㧐脾㧐腦㧐肌肉㧐心血㧐尿液。 【結(jié)論】1．本實(shí)驗(yàn)建立的氣相色譜分析方法可以同時(shí)測(cè)定多種常見苯二氮卓藥物。該方法樣品前處理過程簡(jiǎn)便，檢測(cè)快速、準(zhǔn)確、可靠，實(shí)用性強(qiáng)，適用于法醫(yī)毒物分析及臨床急救事件。2．經(jīng)口灌胃急性染毒大鼠體內(nèi)氯硝西泮含量的分布以含血量豐富和脂肪含量高的臟器如肺、肝、心等組織為主，尿液中含量最低。3．本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：對(duì)于疑似氯硝西泮濫用致死的案件，法醫(yī)可以選取肝臟、肺臟、腎臟等藥物含量較高的臟器以及選取血液作為定性、定量鑒定的檢材，選取尿液作檢材時(shí)檢測(cè)目標(biāo)分析物應(yīng)以氯硝西泮代謝物為主。本實(shí)驗(yàn)建立的分析方法及分布研究對(duì)今后的法醫(yī)鑒定工作提供了有效的實(shí)踐依據(jù)。同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)也為相關(guān)苯二氮卓類藥物進(jìn)一步分析檢測(cè)提供了一定的參考依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：D919

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊琳,趙媚,肖琳,黃紹平;大鼠血清及腦組織中氯硝西泮藥物濃度的變化[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年03期

2 井連平,洪燕敏,董偉林,張繼森;三種安定類藥物在中毒家兔體內(nèi)的分布研究[J];中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志;1998年03期

3 喬靜;劉憲平;辛國(guó)斌;;固相萃取HPLC/MS法測(cè)定血中氯硝安定[J];中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志;2007年03期

4 黃克建;李宏森;朱定姬;林翠梧;劉曉鋒;李璐;羅正堅(jiān);陳而廉;;氯硝安定在生物體內(nèi)的代謝[J];中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志;2009年05期

5 陳猛,袁東星,許鵬翔,昌敦虎;固相微萃取研究進(jìn)展[J];分析科學(xué)學(xué)報(bào);2002年05期

6 邢麗梅,譚家鎰,李發(fā)美,姚麗娟,姜兆林,陳玉芬,劉俊;血、尿中氯硝西泮及其代謝物7-氨基氯硝西泮的GC-ECD法檢測(cè)[J];分析試驗(yàn)室;2003年01期

7 蔡明招;金永春;吳惠勤;黃曉蘭;朱志鑫;;GC/MS同時(shí)檢測(cè)人體液中8種酰胺結(jié)構(gòu)的精神類藥物[J];分析試驗(yàn)室;2007年09期

8 李談;周娜;梁玲琳;周海梅;齊孝蕊;;分散液液微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜分析尿樣中的氯氮卓[J];福建分析測(cè)試;2012年05期

9 王繼芬;劉洋;張桂霞;;麻醉?yè)尳侔讣俺Ｓ寐樽硭幬锏臋z驗(yàn)[J];廣東公安科技;2008年01期

10 張華年,劉智勝,王芳琳;高效液相色譜法檢測(cè)癲vN患兒血清中氯硝西泮[J];中國(guó)臨床藥學(xué)雜志;2000年02期

本文編號(hào)：1190688