本文關鍵詞：硅藻檢驗滴片計數(shù)方法的建立及應用的相關研究

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【摘要】：目的溺死(death by drowning或drowning)是機械性窒息死亡的一種,溺死的法醫(yī)學鑒定一直都是科研、檢案的重點、難點問題。當前,在法醫(yī)實踐中,硅藻檢驗仍然是溺死診斷的”金標準(golden standard)"。近年來,對溺死的相關報道大多為不同水域(魚塘、池塘、庫、河流、泳池水等)溺死案件的鑒定或回顧性研究,且只著重于尸體臟器硅藻的檢出,而忽略溺液硅藻濃度對檢測結果的影響,不同地域溺死案件臟器硅藻檢驗的定性、定量亦無統(tǒng)一的診斷參考標準,而2008年中華人民共和國公安部發(fā)布的行業(yè)標準《人體組織器官中硅藻硝酸破機法檢驗》(GA/T8132008)中對此也未“明確”表述,特別是硅藻計數(shù)方法尤其存在不嚴謹、缺乏科學性的“問題”。因此,本課題的研究重點是通過實驗探索建立一種簡單、快速、科學、嚴謹?shù)墓柙宓纹嫈?shù)方法,進一步完善硅藻檢驗鑒定溺死的量化標準,為法醫(yī)學溺死案件硅藻檢驗的定性、定量檢測提供技術支持。此外,由于各水域環(huán)境復雜迥異,而硅藻種類繁多、形態(tài)迥異,不同水源的硅藻種屬構成亦不相同。因此,本實驗通過對滇池水域水樣的檢測應證本技術方法的可靠性和真實性,為滇池水域溺死案件死亡原因診斷提供幫助。 方法通過實驗建立“三區(qū)四象二野”硅藻滴片計數(shù)方法：吸取20微升不同硅藻濃度溺液滴于載玻片上,自然陰干后形成直徑約7毫米的圓斑,以圓斑圓心為中點,將圓斑等分為3個同心圓區(qū),即中心區(qū)、中間區(qū)、邊緣區(qū)。計數(shù)時將圓斑以“十”字劃分成四個象限,分別于各區(qū)、各象限按中心區(qū)、中間區(qū)、邊緣區(qū)等距離點各取2個高倍視野計數(shù),共得24個高倍視野硅藻計數(shù)值(同時,取12個視野、48個視野計數(shù)對比),相加后取平均值即得該溺液的高倍視野(×40)硅藻濃度數(shù),數(shù)值精確到小數(shù)點后兩位。 同時,采用公安部《人體組織器官中硅藻硝酸破機法檢驗》所提供的方法計數(shù)硅藻,結果作為對照。 結果1.12個視野、24個視野及48個視野進行兩兩比較：12個視野與24個視野比較p0.05,差異有統(tǒng)計學意義；12個視野與48個視野比較p0.05,差異有統(tǒng)計學意義；24個視野與48個視野比較p0.05,差異無統(tǒng)計學意義。 2.將溺液直接制成滴片與將溺液先濃縮再還原后制成的滴片(經(jīng)過一次離心)進行比較,一次離心會造成硅藻損失,損失量為10%左右。 3.使用“三區(qū)四象二野法”計數(shù)硅藻,當溺液硅藻濃度低于2548個/每毫升或濃度高于36162個/每毫升時,實際測得數(shù)值與理論數(shù)值之間存在明顯偏差。 4.對6組未知水樣分別按倍比法稀釋和濃縮,并使用“三區(qū)四象二野法”法計數(shù)硅藻,如果實際測得數(shù)值與理論數(shù)值之間不存在偏差,則認為測定結果真實可信。那么,6組水樣中,2倍濃度結果可信出現(xiàn)的次數(shù)最多,出現(xiàn)5次；4倍濃度、8倍濃度次之,均出現(xiàn)4次。 5.對云南省非溺死人體尸體肺中硅藻含量用“三區(qū)四象二野法”進行檢測,肺消化液涂片中未檢出硅藻。 6.“三區(qū)四象二野法”硅藻計數(shù)方法與公安部《人體組織器官中硅藻硝酸破機法檢驗》(GA/T813—-2008)法計數(shù)方法比較,計數(shù)更簡便、可行、便于操作、計數(shù)方法容易掌握等優(yōu)點,更能體現(xiàn)科學性和嚴謹性。 結論1.使用光學顯微鏡高倍視野(×40)觀察計數(shù)硅藻,采用的“三區(qū)四象二野法”能較好地檢測硅藻數(shù)量和濃度,較之公安部《人體組織器官中硅藻硝酸破機法檢驗》(GA/T813—-2008)法計數(shù)硅藻更具相對的科學性和有可信性。其方法具有簡便、可行、便于操作、容易掌握等優(yōu)點。 2.“三區(qū)四象二野法”計數(shù)硅藻的可信區(qū)間為2548-36162(個/每毫升)之間。 3.用“三區(qū)四象二野法”對未知水樣的檢測,一般將之濃縮后再檢測較易檢出硅藻,其最佳濃縮范圍在2-8倍之間。 4.非溺死人體肺臟中未檢測出硅藻,通過空氣、食物及水等途徑進入人體的硅藻未對本次實驗結果產(chǎn)生影響。 5.水樣每進行一次離心,都會造成硅藻損失,損失量為10%左右,實際操作中要盡量減少離心次數(shù)。 6.昆明市自來水中未檢測出硅藻。
【關鍵詞】：硅藻檢驗 計數(shù)方法 溺死 溺液 法醫(yī)學
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：D919.1
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 引言10-14
• 材料與方法14-21
• 結果與分析21-34
• 討論34-39
• 結論39-40
• 參考文獻40-43
• 附錄43-49
• 綜述49-59
• 參考文獻55-59
• 發(fā)表文章情況59-60
• 致謝60

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳東才;魏禎祥;宋繩緒;林錟;陳福林;陳若壁;曹水金;劉塘錢;劉奇馨;林金樹;;硅藻在活體臟器內(nèi)能否長期存積的實驗研究[J];中國法醫(yī)學雜志;1986年02期

2 屈劍平;王恩壽;;鑒定溺死的實驗研究——熒光分光光度計檢測肺組織浮游生物葉綠素(a)[J];中國法醫(yī)學雜志;1990年01期

3 王磊;王恩壽;黃映康;;硅藻定量檢驗和種屬鑒定的實驗研究[J];中國法醫(yī)學雜志;1992年04期

4 魏禎祥;實質(zhì)臟器檢驗硅藻最佳取材部位的實驗研究[J];中國法醫(yī)學雜志;1994年01期

5 王杰,王恩壽,王磊,黃映康;檢測肺鍶含量鑒定溺死的進一步研究[J];中國法醫(yī)學雜志;1997年03期

6 萬立華,代國新,張忠,雷顯謀,易e，

本文編號：1085403