激光顯微捕獲技術(shù)用于尿液脫落細胞DNA檢測
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【摘要】:目的采用激光顯微捕獲技術(shù)(LCM)捕獲尿液脫落細胞,并進行STR分型。方法收集10份健康成人尿液樣本,根據(jù)儲存時間分組,其中新鮮尿液組(≤24h)分別采用Chelex-100及LCM聯(lián)合DNA IQTM提取法提取DNA,儲存尿液組(24h)再分為4℃組和室溫組,分別在4~30d內(nèi)不同時間點采用LCM聯(lián)合DNA IQTM提取法提取DNA;各組提取的模板DNA進行擴增及SRT分型檢驗。結(jié)果新鮮尿液組采用LCM聯(lián)合DNA IQTM提取法提取DNA,所有樣本均可檢出全部基因座(16個),采用Chelex-100法則在部分基因座上出現(xiàn)等位基因丟失、非特異性擴增、峰值低等現(xiàn)象;4℃儲存10d和室溫儲存4d以內(nèi)的尿液經(jīng)檢驗可明確判讀12個以上基因座,4℃20~30d及室溫7d,可檢出7個以上基因座。結(jié)論 LCM技術(shù)可用于尿液檢材的DNA分型檢驗,且檢材應盡可能4℃保存并盡快檢驗。
【作者單位】: 山西醫(yī)科大學;北京市公安局法醫(yī)檢驗鑒定中心;
【關(guān)鍵詞】: 法醫(yī)物證學 激光顯微捕獲切割技術(shù) 尿液脫落細胞 尿沉渣DNA
【基金】:公安部應用創(chuàng)新課題項目(2006YYCXBJSJ120)
【分類號】:D919
【正文快照】: 激光顯微捕獲切割技術(shù)(laser capturemicrodissection,LCM)是90年代發(fā)展起來的在顯微鏡下分離、純化單一類型細胞群或單個細胞的新技術(shù)[1-2]。目前已在多領(lǐng)域廣泛應用[3-4],國內(nèi)外也有學者進行了法庭科學領(lǐng)域的應用性研究,并探索用于法醫(yī)DNA檢測[5-7]。微量生物檢材的DNA分析
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