本文關鍵詞：地西泮及其代謝物在家兔體內的動態(tài)分布和死后彌散研究

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【摘要】：目的： 1.建立生物檢材中地西泮及其代謝物的固相萃取方法和HPLC檢測方法； 2.建立地西泮的動態(tài)分布動物模型和死后彌散動物模型； 3.研究地西泮及其代謝物在家兔體內的分布特點,死后彌散特點和規(guī)律,為地西泮中毒和死亡案件中的法醫(yī)學鑒定提供實驗資料和依據(jù)。 方法： 1.生物檢材的提取檢測方法：在生物檢材中添加內標舒樂安定、地西泮、去甲地西泮、去甲羥基地西泮、去甲羥基地西泮葡萄糖醛酸苷和羥基地西泮葡萄糖醛酸苷,采用固相萃取法提取,比較篩選三種固相萃取小柱提取效果,保留時間定性,HPLC內標法和工作曲線法定量。 2.動態(tài)分布：家兔9只,經(jīng)口灌胃地西泮染毒,染毒劑量為100倍最大治療量58.3mg/kg,給藥后8、12、24h后處死,立即取心、肝、脾、肺、腎、腦、左下肌、尿、心血、外周血(下腔靜脈血)、膽汁、玻璃體液,固相萃取,HPLC檢測。 3.死后彌散： 死后彌散組：夾閉氣管處死家兔,于死后1小時,100倍最大治療量58.3mg/kg地西泮灌胃染毒,置于常溫下,分別于2h、6h、12h、24h、48h、96h各解剖3只家兔,取心、肝、脾、肺、腎、腦、左下肢肌、心血、外周血、尿、膽汁、玻璃體液,固相萃取,HPLC檢測。 溫度影響組：夾閉氣管處死家兔,于死后1小時,100倍最大治療量58.3mg/kg地西泮灌胃染毒,分別置于-20℃、4℃和常溫環(huán)境下,各3只,48h解剖動物,取以上生物檢材,固相萃取,HPLC檢測。 劑量影響組：夾閉氣管處死家兔,置于常溫環(huán)境下,于死后1小時,分別用25倍最大治療量14.6mg/kg、50倍最大治療量29.2mg/kg和100倍最大治療量58.3mg/kg地西泮灌胃染毒,各劑量3只兔,于48h解剖家兔,取以上生物檢材,固相萃取,HPLC檢測。 4.統(tǒng)計學方法：SPSS13.0統(tǒng)計軟件,采用t檢驗和方差分析。 結果： 1.提取檢測：比較三種固相柱效果,選擇C18柱作為固相萃取用柱。HPLC可同時定量測定地西泮、去甲地西泮、去甲羥基地西泮、去甲羥基地西泮葡萄糖醛酸苷和羥基地西泮葡萄糖醛酸苷。地西泮、去甲地西泮、去甲羥基地西泮的線性范圍為30-2500ng/mL,最低檢出濃度為30ng/mL,最低檢出限為lng(S/N=3);去甲羥基地西泮葡萄糖醛酸苷和羥基地西泮葡萄糖醛酸苷的線性范圍為60～2500ng/mL,最低檢出濃度為60ng/mL,最低檢出限為2ng(S/N=3)。 2.動態(tài)分布：染毒后8、12、24h,家兔體液和組織中均可檢出地西泮、去甲地西泮、去甲羥基地西泮；除玻璃體液、腦、肌肉外,其他組織和體液均可檢出去甲羥基地西泮葡萄糖醛酸苷和羥基地西泮葡萄糖醛酸苷。染毒后8-24h內,家兔體內地西泮濃度呈先升高(12h),后下降(24h)；其代謝物濃度呈持續(xù)上升變化。血、肝、脾、肺、腦、腎中地西泮及其代謝物濃度較高,尿中其代謝物含量較高。染毒后8、12、24h,外周血中地西泮和去甲地西泮濃度比(C地西泮/C去甲)分別為1.37、0.53、0.13；尿中去甲羥基地西泮和去甲羥基地西泮葡萄糖醛酸苷濃度比(C去甲羥/C去甲葡)分別為0.5、0.7、0.74。 3.死后彌散：死后灌胃染毒后2h,家兔脾中即可檢出地西泮；死后灌胃染毒后48h,體內所有檢材中均可檢出地西泮；死后彌散的程度與保存時間、保存溫度和藥物劑量有關。所有檢材中均未檢出地西泮的代謝物。 結論： 1.本實驗建立了同時提取和檢測生物檢材中地西泮及其代謝物的固相萃取HPLC檢測方法,可用于對地西泮及其代謝物的法醫(yī)毒物動力學研究和安定中毒案件的法醫(yī)學鑒定。 2.本實驗建立地西泮的動態(tài)分布研究動物模型和死后彌散研究動物模型,可應用于地西泮的法醫(yī)毒物動力學研究。 3.地西泮及其代謝物在家兔體內分布不均,血、肝、脾、肺、腦、腎中含量較高,在尿中代謝物含量較高。為地西泮中毒(死)案件法醫(yī)鑒定中檢材提取、給藥途徑判斷及死亡時間推測提供實驗依據(jù)。 4.地西泮在家兔體內可發(fā)生死后彌散,死后彌散與保存時間、保存溫度和藥物劑量相關。死后96h內家兔體內未檢出地西泮代謝物。 5.對比地西泮及其代謝物的動態(tài)分布和死后彌散,提示地西泮代謝物可以作為生前服毒的標識物,為地西泮中毒(死)案件法醫(yī)學鑒定中生前服毒和死后染毒鑒別提供了實驗依據(jù)。
【關鍵詞】：地西泮 代謝物 動態(tài)分布 死后彌散 固相萃取 高效液相色譜法
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：D919.4
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-15
• 第一部分 生物樣品中地西泮及其代謝物提取檢測方法15-24
• 1. 材料和方法15-17
• 2. 結果17-24
• 第二部分 地西泮及其代謝物在家兔體內動態(tài)分布研究24-41
• 1. 材料和方法24-25
• 2. 結果25-41
• 第三部分 地西泮及其代謝物在家兔體內的死后彌散研究41-52
• 1. 材料和方法41-42
• 2. 結果42-52
• 討論52-59
• 1. 方法52-53
• 2. 動物模型53
• 3. 動態(tài)分布53-55
• 4. 死后彌散55-58
• 5. 動態(tài)分布與死后彌散的比較58-59
• 結論59-60
• 參考文獻60-70
• 綜述70-87
• 參考文獻83-87
• 致謝87-88
• 攻讀學位期間發(fā)表論文情況88-89
• 個人簡歷89

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 齊臘梅;;高效液相色譜法測定血清中地西泮的濃度[J];安徽醫(yī)藥;2008年04期

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本文編號：1070021