本實驗選用多種不同的培養(yǎng)基,經(jīng)過廣泛的初篩、復(fù)篩,得到了14株產(chǎn)菊粉酶的微生物菌種,其中酶活力最高的菌株為B02,其I(內(nèi)切酶)、S(外切酶)值分別為:4.34U·mL^-1,5.97U·mL^-1。經(jīng)過對其平板菌落形態(tài)的觀察以及顯微觀察等將B02初步鑒定為青霉屬菌株。 為了獲得一株能夠直接利用菊芋來進行酒精發(fā)酵的融合菌株,選擇適宜的原生質(zhì)體制備與融合條件,將自行篩選所得的一株高產(chǎn)菊粉酶的青霉菌B02與釀酒酵母進行原生質(zhì)體融合,將菊粉酶基因引入釀酒酵母,使雜交后代具有直接利用菊粉制造酒精的能力,經(jīng)選擇性檢出融合子,對其產(chǎn)酶能力、產(chǎn)酒精能力進行測定,進而對其遺傳穩(wěn)定性進行研究,最終篩選出一株各項性能較優(yōu)的融合菌株R8。酒精發(fā)酵試驗結(jié)果顯示,其產(chǎn)菊粉酶能力為:I:8.79,S:25.09,發(fā)酵菊粉的酒精得率為41.16%,原料糖分利用率為75.52%,酒精含量為31.6g·L^-1。 將試驗篩選出的融合菌株R8進行酒精發(fā)酵條件優(yōu)化,經(jīng)過6個單因素試驗和正交試驗,得到的優(yōu)化條件為:160g·L^-1JAE(菊芋提...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 菊粉
        1.1.1 菊粉的生理功能
        1.1.2 菊粉的煉制
        1.1.3 菊粉的生物轉(zhuǎn)化
    1.2 菊粉酶
        1.2.1 菊粉酶分類
        1.2.2 菊粉酶來源
        1.2.3 影響微生物合成菊粉酶的因素
        1.2.4 菊粉酶的應(yīng)用
        1.2.5 菊粉酶的研究
    1.3 原生質(zhì)體融合技術(shù)
        1.3.1 原生質(zhì)體融合技術(shù)的原理
        1.3.2 原生質(zhì)體融合技術(shù)的研究進展
        1.3.3 原生質(zhì)體融合技術(shù)在釀酒酵母育種上的應(yīng)用
        1.3.4 原生質(zhì)體融合技術(shù)的應(yīng)用前景及存在問題
    1.4 以菊芋為原料的酒精發(fā)酵研究現(xiàn)狀
        1.4.1 先糖化后發(fā)酵技術(shù)與同步糖化發(fā)酵技術(shù)
        1.4.2 固定化細胞連續(xù)發(fā)酵技術(shù)
    1.5 響應(yīng)面優(yōu)化法
    1.6 本課題立題意義和研究的主要內(nèi)容
第2章 產(chǎn)菊粉酶菌株的篩選
    2.1 試驗材料
        2.1.1 樣品來源
        2.1.2 篩選培養(yǎng)基
        2.1.3 試劑
        2.1.4 儀器
    2.2 試驗方法
        2.2.1 篩選實驗
        2.2.2 粗酶液的制備
        2.2.3 酶活的測定
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 篩選結(jié)果
        2.3.2 果糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        2.3.3 酶活測定結(jié)果
        2.3.4 菌種鑒定
    2.4 結(jié)論
第3章 原生質(zhì)體融合
    3.1 試驗材料
        3.1.1 菌種
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 試劑
        3.1.4 儀器
    3.2 試驗方法
        3.2.1 菌種活化與擴大培養(yǎng)
        3.2.2 離心洗滌、收集細胞
        3.2.3 原生質(zhì)體制備
        3.2.4 原生質(zhì)體再生
        3.2.5 酵母菌原生質(zhì)體形成率和再生率的測定
        3.2.6 原生質(zhì)體融合
        3.2.7 融合子的鑒定
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 原生質(zhì)體制備條件的選擇
        3.3.2 酵母菌原生質(zhì)體形成率和再生率的測定
        3.3.3 原生質(zhì)體的融合及融合子的檢出
        3.3.4 融合子性能測定及篩選
    3.4 結(jié)論
第4章 酒精發(fā)酵研究
    4.1 試驗材料
        4.1.1 菌種
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 試劑
        4.1.4 儀器
    4.2 試驗方法
        4.2.1 培養(yǎng)條件
        4.2.2 單因素試驗
        4.2.3 正交試驗設(shè)計
        4.2.4 響應(yīng)面分析試驗設(shè)計
        4.2.5 分析方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 JAE 總糖測定
        4.3.2 單因子實驗結(jié)果
        4.3.3 正交試驗結(jié)果
        4.3.4 R8 發(fā)酵條件優(yōu)化驗證試驗
        4.3.5 響應(yīng)面分析
    4.4 結(jié)論
結(jié)論
參考文獻
致謝
附錄 攻讀學(xué)位期間所發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄



本文編號：3797925