發(fā)布時(shí)間：2021-04-30 22:16

　　厭氧生物降解過(guò)程是一個(gè)極其復(fù)雜的過(guò)程,各種微生物活動(dòng)相互作用、相互依賴、又互為制約,是一個(gè)復(fù)雜而又有序的復(fù)合體系。充分認(rèn)識(shí)各種微生物在沼氣發(fā)酵中的作用和影響,構(gòu)建穩(wěn)定﹑高效產(chǎn)甲烷復(fù)合菌系,對(duì)于提高沼氣產(chǎn)氣率,縮短發(fā)酵啟動(dòng)時(shí)間具有重要意義。也為沼氣發(fā)酵菌劑的研制以及實(shí)現(xiàn)沼氣發(fā)酵從自然發(fā)酵到可控性發(fā)酵提供支持。獲得成果:（1）運(yùn)用亨蓋特厭氧技術(shù)從云南哀牢山﹑昆明大觀河﹑厭氧消化器等生境中分離出6株產(chǎn)甲烷古菌。其中8-1屬于產(chǎn)甲烷桿菌屬,系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析顯示其與Methanobacterium subterraneurn相似性最高,為99%。但其形態(tài)和某些生理生化特征和模式菌株有所差別,所以對(duì)其進(jìn)行了形態(tài)特性和生理生化特征的進(jìn)一步研究,發(fā)表論文一篇。另外5株屬于甲酸甲烷桿菌屬M(fèi).formicicum。（2）對(duì)采自不同生境樣品的富集,馴化,得到了一系列產(chǎn)甲烷復(fù)合菌系,以不同方式的組配,以及刺激因子的添加,最終得到7個(gè)產(chǎn)氣量高,pH變化穩(wěn)定的高效復(fù)合菌系,并利用DGGE和熒光定量PCR技術(shù)對(duì)復(fù)合菌系進(jìn)行了分析研究。復(fù)合系C1﹑C2﹑C3﹑C4﹑C5在35℃培養(yǎng)下19天,甲烷含量即可達(dá)到50%以上,... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 研究背景
    1.2 研究的目的和意義
    1.3 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
    1.4 研究?jī)?nèi)容與主要技術(shù)路線
        1.4.1 研究?jī)?nèi)容
        1.4.2 主要研究方法
        1.4.3 主要技術(shù)路線
第二章 產(chǎn)甲烷古菌的分離、鑒定及生物學(xué)特性研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)裝置
        2.2.2 富集培養(yǎng)
        2.2.3 分離純化
        2.2.4 產(chǎn)甲烷菌形態(tài)特征及生理生化特性鑒定
        2.2.5 16S rDNA 序列擴(kuò)增﹑測(cè)序及系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 分離的菌株
        2.3.2 菌株8-1 的生物學(xué)特性研究及其系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析
        2.3.3 菌株TC 的部分生物學(xué)特性研究及其系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析
第三章 產(chǎn)甲烷菌復(fù)合菌系的構(gòu)建與DGGE 分析研究
    3.1 樣品準(zhǔn)備
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 產(chǎn)甲烷菌復(fù)合菌系的構(gòu)建
        3.2.2 應(yīng)用DGGE 技術(shù)對(duì)復(fù)合菌系的分析研究
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 構(gòu)建的菌系
        3.3.2 DGGE 圖譜分析
第四章 熒光定量PCR 技術(shù)對(duì)產(chǎn)甲烷菌復(fù)合菌系的研究
    4.1 樣品準(zhǔn)備
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 mcrA 基因片段擴(kuò)增
        4.2.2 TA 克隆與重組質(zhì)粒提取
        4.2.3 熒光定量
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與熒光定量結(jié)果
第五章 全文結(jié)論與展望
    5.1 全文總結(jié)
        5.1.1 產(chǎn)甲烷菌的分離
        5.1.2 產(chǎn)甲烷菌復(fù)合菌系的構(gòu)建與研究
    5.2 不足與展望
        5.2.1 存在的不足
        5.2.2 工作展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一株生長(zhǎng)pH較寬的產(chǎn)甲烷菌分離與系統(tǒng)發(fā)育分析[J]. 胡亞?wèn)|,袁月祥,閆志英,廖銀章,劉曉風(fēng),賀蓉娜,張洪森,官家發(fā).  應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2009(04)
[2]FISH技術(shù)及其在環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用[J]. 李冰冰,肖波,李蓓.  生物技術(shù). 2007(05)
[3]嗜冷產(chǎn)甲烷菌及其在廢水厭氧處理中的應(yīng)用[J]. 左劍惡,邢薇.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào). 2007(09)
[4]PCR-DGGE技術(shù)在農(nóng)村戶用沼氣發(fā)酵微生物研究中的初步應(yīng)用[J]. 師曉爽,劉德立,郎志宏,黃大昉,陸偉,李敏.  山東師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2007(02)
[5]DNA提取方法對(duì)活性污泥微生物多樣性PCR-DGGE檢測(cè)的影響[J]. 李鵬,畢學(xué)軍,汝少國(guó).  安全與環(huán)境學(xué)報(bào). 2007(02)
[6]T-RFLP技術(shù)分析油藏微生物多樣性[J]. 袁三青,薛燕芬,高鵬,汪衛(wèi)東,馬延和,李希明,許國(guó)旺.  微生物學(xué)報(bào). 2007(02)
[7]利用FISH和DGGE對(duì)產(chǎn)甲烷顆粒污泥中微生物種群的研究[J]. 邢薇,左劍惡,孫寓姣,李建平.  環(huán)境科學(xué). 2006(11)
[8]瘤胃微生物總DNA提取方法的比較[J]. 李旦,楊舒黎,羅淑萍,王加啟.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2006(09)
[9]硫酸鹽還原菌的分離與生態(tài)特點(diǎn)研究[J]. 楊建設(shè),黃玉堂,吳楚施,蔡曉宜.  水土保持研究. 2006(04)
[10]應(yīng)用DGGE研究微生物群落時(shí)的常見問(wèn)題分析[J]. 邢德峰,任南琪.  微生物學(xué)報(bào). 2006(02)



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