纖維素生物質(zhì)是地球上最豐富的可再生資源,其資源化或能源化利用是目前國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。蔗渣作為一種大宗糖業(yè)固體廢棄物,其開發(fā)利用正受到越來越多的關(guān)注。 Penicillium sp.T24-2是一株降解蔗渣能力較強(qiáng)的絲狀真菌,其固態(tài)發(fā)酵所產(chǎn)粗酶液,經(jīng)陰離子交換柱DEAE-Sepharose Fast Flow層析后,分離出兩種β-葡萄糖苷酶。通過SDS-PAGE凝膠電泳分析,確定其分子質(zhì)量約分別為20 kDa、35 kDa。已純化的兩種β-葡萄糖苷酶均為單亞基蛋白,其酶促最適反應(yīng)溫度分別為60℃、45℃;最適酶促反應(yīng)pH值分別為pH4.5、pH5.0。 對3,5-二硝基水楊酸(DNS)試劑測定還原糖方法的研究表明:酸、銨鹽、鎂鹽等均對DNS法測定還原糖有嚴(yán)重的干擾作用,酸與OH~-結(jié)合生成水,銨鹽易形成揮發(fā)性氣體(如氨氣等),鎂鹽可形成不溶性物質(zhì)。對纖維素酶CMC酶活力測定方法進(jìn)行研究,結(jié)果表明,酶稀釋度、酶促反應(yīng)溫度、pH、反應(yīng)時間、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)濃度等對CMC酶活力測定有重要影響。 對堿處理蔗渣成分的研究表明,堿處理主要除去了蔗渣中的大部分中性洗滌劑溶出物以及一部分的半纖維素和木質(zhì)素。采用稀堿對蔗渣進(jìn)行預(yù)處理,研究發(fā)現(xiàn):處理溫度與時間,堿液的種類、濃度與添加量、以及某些鹽類(如亞硫酸鈉等)對處理后蔗渣的酶解效果有明顯影響。選用強(qiáng)堿,在較高的處理溫度、較長的處理時間、較高的濃度下,或在堿液中添加適當(dāng)濃度的亞硫酸鈉,可以大大提高處理后蔗渣的酶解效果。然而,堿處理蔗渣不適合Penicillium sp.T24-2固態(tài)發(fā)酵制備纖維素酶。
【學(xué)位單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：S216.2
【部分圖文】：

20406080100RelativeE陀扒1祀Dilution(ti眼)圖2一10相對稀釋度對CMC酶活測定的影響 F19.2一 10EffectoftheRelativeEmzymedilutiononCMCaseaetivitydetermination將原酶液稀釋不同倍數(shù)，得到不同濃度的稀釋酶液，測定各稀釋酶液的CMC酶活力值，并根據(jù)相應(yīng)的稀釋度，計算原酶液的表觀CMC酶活力，其計算公式如下:原酶液CMC酶活=稀釋酶液CMC酶活x稀釋倍數(shù)。

馨馨鬢瓢 瓢 撇撇撇蒸蒸矍矍瓢瓢暴 暴 暴翌溺忿定資燕澎澎纂纂纂纂纂 纂 纂 纂纂纂翼 翼黝黝黝薰薰 薰 薰 薰 薰 薰纂纂黝 黝黝黝{蘸黝鬃鬢 鬢 圖2一 16p一葡萄糖普酶 1505一PAGE電泳圖譜 F19.2一 16SDS一 pAGEanalysisofp一glueosidasel (A:ProteinmarkB:p一 glucosidase1fromtube7lC:eellobiohydrolaseandp一 9lucosidasel)由圖2一16可見，取第71號管樣品進(jìn)行505一聚丙烯酞胺凝膠電泳，對比 Profeinmaker，分離純化所得p一葡萄糖營酶蛋白分子質(zhì)量約為 20koa。由表2--4結(jié)果可見，分離純化所得p一葡萄糖營酶相對于粗酶液純化了2.76倍，酶的比活力由粗酶液的0.68!U/mg提高到 1.88!U/mg。另外，對第三個峰尾段分離液進(jìn)行505一隊GE電泳，發(fā)現(xiàn)除 20koa的p-葡萄糖昔酶外

2.76 3.24由圖2一18結(jié)果可見，取第33管的樣品進(jìn)行505一聚丙烯酞胺凝膠電泳，對比 proteinmaker，分離純化所得p一葡萄糖昔酶蛋白分子質(zhì)量約為 35koa。由表2一結(jié)果可見，分離純化所得p一葡萄糖營酶相對于粗酶液純化了3.24倍，酶的比活力由粗酶液的 0.68IU/mg提高到 2.3IU/mg。2.2.4卜葡萄糖昔酶理化性質(zhì)研究 (1)pH對p一葡萄糖昔酶酶活力及穩(wěn)定性的影響如圖2一19，pH對p一葡萄糖昔酶的酶活和穩(wěn)定性的影響較大。p一葡萄糖昔酶I、11的最適酶促反應(yīng)p日值分別為p日4.5、p日5.0;在p日5.0

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 楊娟;生物質(zhì)資源制備高品質(zhì)活性炭的研究[D];中南大學(xué);2011年

2 馬建盧;降解木糖渣真菌的篩選及其發(fā)酵條件和酶學(xué)性質(zhì)的研究[D];鄭州大學(xué);2012年

本文編號：2811539