【摘要】：目的:研究家蠅對(duì)農(nóng)業(yè)秸稈的消化利用及體內(nèi)相關(guān)糖苷水解酶基因的誘導(dǎo)表達(dá),篩選體內(nèi)降解纖維素、木質(zhì)素、半纖維素的共生菌,為今后家蠅作為資源化昆蟲對(duì)秸稈等生物質(zhì)能的合理利用和開發(fā)奠定科學(xué)基礎(chǔ)。方法:1.使用含30%麥麩的高粱秸稈粉、30%麥麩的麥秸稈粉和純麥麩分別飼養(yǎng)家蠅幼蟲,檢測(cè)處理前后及無幼蟲培養(yǎng)對(duì)照組飼料中粗蛋白、粗脂肪、總糖、纖維素、木質(zhì)素、半纖維素含量變化;同時(shí)觀察三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的幼蟲期、3日齡幼蟲體重、蛹期、羽化率、成蟲存活期及雌雄比。2.家蠅內(nèi)參基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)在不同飼料飼養(yǎng)、不同發(fā)育期及不同組織的穩(wěn)定性研究;將2.5g的純木質(zhì)素、纖維素、木聚糖(半纖維素)溶于20ml滅菌水,均勻混于濕度適宜的麥麩(50g干重)中飼養(yǎng)家蠅幼蟲,觀察BG、BGL、LAC、MAN基因的表達(dá)差異;使用純高粱秸稈、麥秸稈代替麥麩飼養(yǎng)家蠅,依次傳代,觀察家蠅上述基因在家蠅傳代過程中的表達(dá)差異。3.用純麥麩、高粱秸桿、麥秸稈喂養(yǎng)家蠅幼蟲后,分別用纖維素-剛果紅培養(yǎng)基、木質(zhì)素培養(yǎng)基、木聚糖培養(yǎng)基在需氧和厭氧條件下篩選纖維素降解真菌、木質(zhì)素降解真菌和細(xì)菌、半纖維素降解細(xì)菌和真菌,觀察不同飼養(yǎng)組的菌落形態(tài)、數(shù)量。結(jié)果:1.不同組飼養(yǎng)后及對(duì)照組的總糖、纖維素、木質(zhì)素、半纖維素含量較飼養(yǎng)前都有一定程度的降低(P0.05),且家蠅幼蟲處理后比對(duì)照組降低的百分點(diǎn)更多(P0.05);麥麩組、高粱秸稈組處理后及對(duì)照組相比處理前脂肪含量增加(P0.05);高粱秸稈組和麥秸稈組的家蠅處理后飼料及對(duì)照組與處理前相比,粗蛋白含量都升高(P0.05)。2.家蠅GAPDH基因在不同飼料飼養(yǎng)、不同發(fā)育期及不同組織的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),表達(dá)較穩(wěn)定。3.使用高粱秸稈粉,麥秸稈粉和麥麩分別飼養(yǎng)家蠅,我們發(fā)現(xiàn)幼蟲期、蛹期、羽化率、成蟲存活期及3日齡幼蟲體重均表現(xiàn)差異性(P0.05),成蟲雌雄比例無差異。4.使用木質(zhì)素、纖維素、半纖維素喂養(yǎng)刺激家蠅后,家蠅BG、BGL、LAC、MAN基因均呈現(xiàn)上調(diào)(P0.05),但上調(diào)幅度各有不同。5.以麥麩為對(duì)照組,上述基因在高粱秸桿組和麥秸稈組傳代中均呈現(xiàn)上調(diào)(P0.05),趨勢(shì)不同。6.篩選的能降解纖維素、半纖維素、木質(zhì)素的需氧真菌數(shù)量均大于厭氧真菌,細(xì)菌數(shù)量大于真菌數(shù)量(P0.05)。纖維素降解真菌數(shù)量呈現(xiàn)高粱秸稈組麥麩組麥秸稈;木質(zhì)素降解細(xì)菌、真菌數(shù)量均表現(xiàn)為高粱桿組麥秸稈組麥麩組;半纖維素降解細(xì)菌、真菌數(shù)量均表現(xiàn)為麥秸稈組高粱秸稈組麥麩組。結(jié)論:1.家蠅可以消化利用木質(zhì)纖維;家蠅體內(nèi)木質(zhì)纖維降解酶基因可以傳代并能應(yīng)激性表達(dá);2.家蠅幼蟲消化道存在降解木質(zhì)纖維素的微生物,通過不同秸稈飼養(yǎng)家蠅幼蟲,消化系統(tǒng)中不同種類的細(xì)菌、真菌群落有顯著的空間分布異質(zhì)現(xiàn)象,這些木質(zhì)纖維素降解微生物能與家蠅幼蟲對(duì)攝入的木質(zhì)纖維素協(xié)同消化。
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S216.2
【圖文】：

圖 1-1 不同處理?xiàng)l件各組飼料粗蛋白含量比較Fig.1-1 Comparison of crude protein content in different treatment conditions 不同處理?xiàng)l件下各組飼料粗脂肪的含量變化高粱秸稈、麥秸稈、麥麩處理前出脂肪含量較低，分別為 1.75%、1.742%，各組脂肪含量相當(dāng)；麥秸稈組在家蠅處理后飼料中粗脂肪含量與處比無統(tǒng)計(jì)學(xué)（P>0.05），麥麩組、高粱秸稈組處理后及對(duì)照組相比處理前計(jì)學(xué)差異（P<0.05）但處理后與對(duì)照組無差異，結(jié)果如表 1-2，圖 1-2。表 1-2 不同處理?xiàng)l件各組飼料粗脂肪含量比較（Mean±SD）ab. 1-2 Comparison of crude fat content in different treatment conditions（Mean±SD家蠅幼蟲處理前 家蠅幼蟲處理后 對(duì)照組高粱桿 1.7491±0.0006 1.8210±0.0019a1.8016±0.0015b麥秸稈 1.7423±0.0019 1.7548±0.0040 1.7677±0.0043麥麩組 1.7181±0.0016 1.7931±0.0015a1.7968±0.0012b

圖 1-2 不同處理?xiàng)l件各組飼料粗脂肪含量比較Fig.1-2 Comparison of crude fat content in different treatment conditions.3 不同處理?xiàng)l件下各組飼料中總糖含量變化高粱秸稈、麥秸稈、麥麩處理前總糖含量分別為 15.5%、12.8%、15.67%照組各組總糖分別降低了 29.8%、5%、7.6%；家蠅處理高粱秸稈、麥秸稈麩處理后與處理前相比總糖損失率分別為 61.55%、55.04%、48.77%；家蠅粱秸稈、麥秸稈、麥麩飼料中總糖吸收利用的凈值分別為 31.75%、50.04%1.17%。家蠅對(duì)糖分的吸收相比于蛋白、脂肪來說較為理想。結(jié)果如表 1-3，-3。表 1-3 不同處理?xiàng)l件各組飼料總糖含量比較（Mean±SD）Tab. 1-3 Comparison of total sugar content in different treatment conditions（Mean±SD家蠅幼蟲處理前 家蠅幼蟲處理后 對(duì)照組高粱桿 15.5200±0.4531 5.9667±0.2732ac10.8900±0.2946b

表 1-3 不同處理?xiàng)l件各組飼料總糖含量比較（Mean±SD）Tab. 1-3 Comparison of total sugar content in different treatment conditions（Mean±SD）家蠅幼蟲處理前 家蠅幼蟲處理后 對(duì)照組高粱桿 15.5200±0.4531 5.9667±0.2732ac10.8900±0.2946b麥秸稈 12.8267±0.2369 5.7667±0.2761ac12.1800±0.1473b麥麩組 15.6633±0.5501 8.0233±0.2916ac14.4667±0.3430b注：a 各組家蠅幼蟲處理后于處理前相比，P<0.05。Note：Compared with pretreatment P<0.05b 各組對(duì)照組于處理前相比，P<0.05。Note：Compared with pretreatment P<0.05c 各組家蠅幼蟲處理后于對(duì)照組相比，P<0.05。Note：Compared with control group P<0.05

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本文編號(hào)：2803119