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嗜熱聚乙烯醇降解菌的分離及其降解性能研究

發(fā)布時間:2023-08-15 19:17
  聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA),具有較好的粘附性,耐磨性,化學性質(zhì)穩(wěn)定,被廣泛應用于紡織、印染、化纖等行業(yè)。然而,大量PVA的使用和排放也給水體和土壤生態(tài)系統(tǒng)造成嚴重的污染。盡管PVA可生物降解,但大多數(shù)微生物對PVA降解率低,周期長。嗜熱微生物具有熱穩(wěn)定性好、催化反應速率高的嗜熱酶,可以促進有機物的生物降解,提高降解率。因此,發(fā)掘可高效降解PVA的嗜熱菌株,并研究其降解特性和機理,對于構建高效的PVA污染修復技術,有效控制PVA污染及其對生態(tài)環(huán)境的危害具有重要的實踐意義。本研究從高溫堆肥中分離篩選獲得高效的嗜熱PVA降解菌,并研究其對PVA的降解性能和機制。論文主要結論如下:1、從堆肥樣品中分離、篩選出兩株具有降解PVA的嗜熱菌FAFU 038和FAFU 039。革蘭氏染色和顯微鏡觀察表明,兩株菌同為革蘭氏陽性桿狀菌。16S r RNA基因分析表明,FAFU 038菌株屬于Brevibacillus aydinogluensis,而FAFU 039菌株屬于Brevibacillus thermoruber。兩株菌都具有較好的PVA降解能力,其中FAFU 038...

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 聚乙烯醇
        1.1.1 聚乙烯醇及應用
        1.1.2 聚乙烯醇的危害
    1.2 PVA污染現(xiàn)狀
    1.3 PVA降解研究現(xiàn)狀
        1.3.1 PVA物理化學處置法
        1.3.2 PVA生物降解
        1.3.3 PVA降解酶的研究
    1.4 嗜熱菌及其在環(huán)境污染修復中的應用
    1.5 本課題研究目的意義和主要研究內(nèi)容
        1.5.1 研究目的和研究意義
        1.5.2 研究內(nèi)容與技術路線
2 PVA嗜熱降解菌的分離篩選
    2.1 前言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 樣品的采集
        2.2.2 培養(yǎng)基
        2.2.3 實驗藥品與引物
        2.2.4 實驗儀器與數(shù)據(jù)庫
    2.3 實驗方法
        2.3.1 聚乙烯醇嗜熱降解菌的分離和篩選
        2.3.2 革蘭氏染色
        2.3.3 菌落形態(tài)觀察
        2.3.4 電鏡觀察
        2.3.5 DNA提取
        2.3.6 PCR擴增
        2.3.7 菌株分子生物學鑒定
        2.3.8 聚乙烯醇嗜熱降解菌的培養(yǎng)
        2.3.9 聚乙烯醇定量分析及降解實驗
    2.4 結果與分析
        2.4.1 菌株形態(tài)特征觀察
        2.4.2 菌株分子生物學鑒定
        2.4.3 聚乙烯醇降解菌降解性能初探
    2.5 本章小結
3 嗜熱菌FAFU038對PVA降解性能研究及條件優(yōu)化
    3.1 前言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 供試菌株
        3.2.2 培養(yǎng)基
        3.2.3 實驗藥品
        3.2.4 實驗儀器
    3.3 實驗方法
    3.4 結果與分析
        3.4.1 不同濃度PVA的降解率
        3.4.2 不同溫度對PVA降解能力的影響
        3.4.3 不同pH值對PVA降解能力的影響
        3.4.4 不同滲透壓對PVA降解能力的影響
        3.4.5 不同N源培養(yǎng)基對PVA降解能力的影響
        3.4.6 不同聚合度PVA對降解的影響
        3.4.7 不同醇解度PVA對降解的影響
    3.5 本章小結
4 嗜熱微生物介導PVA降解機制的初探
    4.1 前言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 供試菌株
        4.2.2 培養(yǎng)基
        4.2.3 實驗試劑
        4.2.4 實驗儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 UV光譜分析
        4.3.2 FTIR光譜分析
        4.3.3 高效凝膠色譜分析
        4.3.4 三維熒光光譜分析
        4.3.5 聚乙烯醇降解酶定性分析
        4.3.6 酶活的測定
        4.3.7 酶分布情況的測定
        4.3.8 酶反應動力學研究
    4.4 結果與分析
        4.4.1 PVA的降解過程及其產(chǎn)物
            4.4.1.1 PVA分子量的變化
            4.4.1.2 PVA降解過程官能團的變化及其產(chǎn)物
        4.4.2 PVA降解酶的分析
            4.4.2.1 聚乙烯醇降解酶定性分析
            4.4.2.2 聚乙烯醇降解酶酶活分布
            4.4.2.3 PVA降解酶與底物的關系
            4.4.2.4 酶反應動力學方程的建立
            4.4.2.5 酶反應動力學方程分析
    4.5 本章小結
5 主要結論、創(chuàng)新及展望
    5.1 主要結論
    5.2 創(chuàng)新
    5.3 展望
參考文獻
附錄
攻讀碩士期間的研究成果
致謝



本文編號:3842114

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