轉(zhuǎn)化酶抑制子(InvInh)是轉(zhuǎn)化酶翻譯后水平的一個重要調(diào)控因子,通過與轉(zhuǎn)化酶結(jié)合成復(fù)合物來抑制轉(zhuǎn)化酶酶活性。為了探究甘蔗SoInvInh2基因的功能特性,本研究以甘蔗品種GT28葉片總RNA為模板,采用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增甘蔗SoInvInh2基因的編碼區(qū)序列,以中間載體pMD18-T和表達(dá)載體pRI101-AN為基礎(chǔ),采用酶切和連接的方法,構(gòu)建植物正義表達(dá)載體。通過花序軸浸染法轉(zhuǎn)化擬南芥,獲得轉(zhuǎn)SoInvInh2基因擬南芥株系。經(jīng)kan抗性篩選和PCR擴(kuò)增檢測,共獲得12株陽性植株,轉(zhuǎn)化效率為9.7%。半定量RT-PCR分析結(jié)果表明SoInvInh2基因在轉(zhuǎn)基因擬南芥葉中相對表達(dá)量最高,根中次之,葉柄中最低。這將為后續(xù)解析甘蔗SoInvInh2基因的功能提供理論參考。

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【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 克隆獲得甘蔗SoInvInh2基因且已構(gòu)建表達(dá)載體
    1.2 獲得轉(zhuǎn)SoInvInh2基因擬南芥
    1.3 轉(zhuǎn)SoInvInh2基因擬南芥半定量PCR擴(kuò)增的退火溫度為60.1℃
    1.4 轉(zhuǎn)SoInvInh2基因擬南芥半定量PCR擴(kuò)增的循環(huán)數(shù)為30次
    1.5 轉(zhuǎn)SoInvInh2擬南芥基因表達(dá)分析
2 討論
3 材料與方法
    3.1 試驗材料
    3.2 甘蔗轉(zhuǎn)化酶抑制子SoInvInh2基因的克隆
    3.3 SoInvInh2植物表達(dá)載體的構(gòu)建
    3.4 采用花序軸浸染法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化
    3.5 轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的篩選和鑒定
    3.6 轉(zhuǎn)基因擬南芥半定量PCR擴(kuò)增體系的優(yōu)化
    3.7 轉(zhuǎn)SoInvInh2擬南苗期SoInvInh2基因的表達(dá)特性分析
作者貢獻(xiàn)



本文編號：3809905