隨著全球氣候變暖,干旱等自然災(zāi)害的發(fā)生頻率也呈現(xiàn)增加的趨勢(shì),干旱不僅影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育而且會(huì)造成作物的嚴(yán)重減產(chǎn)。為保障我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展,在如何應(yīng)對(duì)干旱、提高農(nóng)作物水分利用效率上應(yīng)該加大研究投入,利用現(xiàn)代生物技術(shù)手段深入研究植物響應(yīng)干旱脅迫的分子機(jī)理具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,lncRNA)在植物應(yīng)對(duì)生物脅迫和非生物脅迫的過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,但目前關(guān)于lncRNA在植物干旱應(yīng)答中的具體功能與調(diào)控機(jī)制尚不明確。本課題組前期以擬南芥T-DNA插入突變體為材料進(jìn)行脫落酸(ABA)等相關(guān)表型篩選時(shí),鑒定到一個(gè)長(zhǎng)鏈非編碼RNAlincRNA13853,該lincRNA突變體不僅對(duì)ABA的敏感性減弱,而且抗旱性也降低。本研究分析了長(zhǎng)鏈非編碼RNA13853在擬南芥干旱脅迫應(yīng)答中的功能和調(diào)控機(jī)制,具體研究結(jié)果如下:1.LincRNA13853正調(diào)節(jié)擬南芥干旱脅迫耐受性LincRNA13853位于擬南芥第4號(hào)染色體,長(zhǎng)度為786bp。與野生型擬南芥相比,lincRNA13853功能缺失突變體對(duì)外源ABA的敏感性減弱、耐旱性降低且失水速率...

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
    1.1 長(zhǎng)鏈非編碼RNA
        1.1.1 長(zhǎng)鏈非編碼RNA的起源
        1.1.2 長(zhǎng)鏈非編碼RNA的分類
        1.1.3 長(zhǎng)鏈非編碼RNA的功能
        1.1.4 植物中長(zhǎng)鏈非編碼RNA的研究進(jìn)展
    1.2 植物應(yīng)對(duì)干旱脅迫逆境的研究
    1.3 本研究的內(nèi)容、目的和意義
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)用的載體
        2.1.3 菌株
        2.1.4 常用的生物學(xué)試劑及儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 植物基因組DNA的提取
        2.2.2 植物總RNA的提取
        2.2.3 核質(zhì)分離
        2.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.2.5 ABA處理的平板統(tǒng)計(jì)
        2.2.6 PEG模擬干旱脅迫處理的平板統(tǒng)計(jì)
        2.2.7 ABA或PEG脅迫處理
        2.2.8 土壤干旱脅迫
        2.2.9 植物失水速率的檢測(cè)
        2.2.10 植物葉片氣孔觀察與統(tǒng)計(jì)
        2.2.11 載體的構(gòu)建
        2.2.12 凍融法轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        2.2.13 菌落PCR
        2.2.14 酵母三雜交
        2.2.15 RNApull-down
        2.2.16 原核表達(dá)
        2.2.17 亞細(xì)胞定位
        2.2.18 TriFC
第3章 結(jié)果與分析
    3.1 LincRNA13853正調(diào)節(jié)擬南芥干旱脅迫耐受性
        3.1.1 lincRNA13853突變體鑒定
        3.1.2 lincRNA13853突變體對(duì)ABA不敏感
        3.1.3 lincRNA13853突變體對(duì)干旱敏感
        3.1.4 lincRNA13853突變體氣孔孔徑比增大
        3.1.5 LincRNA13853超表達(dá)株系氣孔孔徑比減小
    3.2 LincRNA13853的表達(dá)模式
        3.2.1 LincRNA13853為單向轉(zhuǎn)錄
        3.2.2 LincRNA13853主要富集在細(xì)胞核
        3.2.3 LincRNA13853的表達(dá)受ABA和PEG抑制
    3.3 LincRNA13853與RBP7相互作用
        3.3.1 LincRNA13853與RBP7在體外相互作用
        3.3.2 RBP7的亞細(xì)胞定位
        3.3.3 LincRNA13853與RBP7在體內(nèi)相互作用
    3.4 LincRNA13853正調(diào)控ABA2
        3.4.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序篩選lincRNA13853的候選靶基因
        3.4.2 aba2-1突變體失水速率加快且氣孔孔徑比增大
第4章 討論與展望
    4.1 LncRNA在培育耐旱性作物的應(yīng)用中有重要作用
    4.2 LncRNA以多元化的方式調(diào)控基因的表達(dá)
    4.3 研究展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間的研究成果



本文編號(hào)：3803500