星形膠質(zhì)細胞在哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)膠質(zhì)細胞中約占90%。它們是大腦和脊髓的組成部分。在正常生理情況下,星形膠質(zhì)細胞在神經(jīng)發(fā)育、腦血流量調(diào)節(jié),離子平衡,突觸形成與功能,突觸修剪,能量代謝中發(fā)揮重要作用。病理狀態(tài)下,星形膠質(zhì)細胞活化,在許多疾病和幾乎所有形式的神經(jīng)性疾病中發(fā)揮重要作用,包括重型腦損傷如中風和創(chuàng)傷性腦損傷(TBI),神經(jīng)退行性疾病如阿爾茨海默氏病(AD)、帕金森氏病(PD)、肌萎縮側(cè)索硬化癥(ALS)等。然而,在應對免疫攻擊、慢性神經(jīng)退行性疾病或急性損傷時,星形膠質(zhì)的功能將如何改變,我們?nèi)灾跎佟?012年Zamanian等人發(fā)現(xiàn)皮下注射LPS誘導神經(jīng)炎癥與腦缺血誘發(fā)大腦中動脈閉塞這兩種不同形式的腦損傷產(chǎn)生了至少兩種類型的“活化型”星形膠質(zhì)細胞,并提供新的標志以劃定不同狀態(tài)的活化型星形膠質(zhì)細胞。2017年Liddelow等人將這兩種不同類型的活化型星形膠質(zhì)細胞分別命名為"A1"和"A2"。這個術(shù)語與巨噬細胞和小膠質(zhì)細胞被命名"M1"和"M2"相似。巨噬細胞和小膠質(zhì)表現(xiàn)出不只兩個極化狀態(tài),同樣,活化型星形膠質(zhì)細胞也很可能有兩個以上的極化狀態(tài),這將是未來研究的重要領(lǐng)域...

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
Abstract
1.前言
2.材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑及配制
        2.1.3 儀器設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 星形膠質(zhì)細胞的分離純化和鑒定
        2.2.2 RNA的提取及實時定量PCR(q RT-PCR)
        2.2.3 蛋白免疫印跡實驗(Western Blot)
        2.2.4 Griess法檢測NO含量
        2.2.5 熒光標記的 Aβ₄₂內(nèi)吞實驗
        2.2.6 星形膠質(zhì)細胞條件培養(yǎng)基(ACM)與神經(jīng)元共培養(yǎng)實驗
        2.2.7 細胞慢病毒感染
        2.2.8 統(tǒng)計分析
3.結(jié)果
    3.1 不同因子對星形膠質(zhì)細胞活化的影響
        3.1.1 星形膠質(zhì)細胞純度鑒定
        3.1.2 不同因子刺激后星形膠質(zhì)細胞A1/A2 特異性轉(zhuǎn)錄因子的表達
        3.1.3 LPS促進星形膠質(zhì)細胞分泌促炎細胞因子
        3.1.4 LPS刺激后星形膠質(zhì)細胞對神經(jīng)元的細胞毒性
        3.1.5 LPS刺激星形膠質(zhì)細胞吞噬功能減弱
        3.1.6 IL-10 低表達(IL-10^tm1/tm1)星形膠質(zhì)細胞A1/A2 特異性轉(zhuǎn)錄因子的表達
        3.1.7 IL-10^tm1/tm1星形膠質(zhì)細胞分泌更多的炎性因子
        3.1.8 IL-10^tm1/tm1星形膠質(zhì)細胞對神經(jīng)元的細胞毒性
        3.1.9 IL-10^tm1/tm1星形膠質(zhì)細胞吞噬功能降低
    3.2 MYSM1 對星形膠質(zhì)細胞活化的影響
        3.2.1 LPS刺激后星形膠質(zhì)細胞MYSM1 低表達
        3.2.2 MYSM1 基因敲除小鼠敲除效率檢測
        3.2.3 MYSM1^-/-星形膠質(zhì)細胞A1/A2 特異性轉(zhuǎn)錄因子的表達
        3.2.4 MYSM1^-/-星形膠質(zhì)細胞分泌更多的促炎因子
        3.2.5 MYSM1^-/-星形膠質(zhì)細胞對神經(jīng)元的細胞毒性
        3.2.6 MYSM1^-/-星形膠質(zhì)細胞吞噬功能降低
    3.3 MYSM1 對星形膠質(zhì)細胞活化的機制研究
        3.3.1 LPS刺激星形膠質(zhì)細胞后miR129 低表達
        3.3.2 MYSM1^-/-星形膠質(zhì)細胞miR129 低表達
        3.3.3 miR129 沉默(shmiR129)的星形膠質(zhì)細胞A1/A2 特異性轉(zhuǎn)錄因子的表達
        3.3.4 shmiR129 星形膠質(zhì)細胞分泌的免疫相關(guān)因子
        3.3.5 shmiR129 星形膠質(zhì)細胞對神經(jīng)元的細胞毒性
4.討論
5.結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
綜述
    參考文獻



本文編號：3789722