CRISPR/Cas9系統(tǒng)靶向敲除多溴蛋白1基因?qū)Ω伟┘毎δ艿挠绊?/H1>

發(fā)布時間：2023-02-10 20:44

　　目的探討應用規(guī)律成簇的間隔短回文重復(CRISPR)/CRISPR相關(guān)蛋白9(Cas9系統(tǒng)靶向敲除多溴蛋白1(PBRM1)基因?qū)Ω伟┘毎δ艿挠绊憽７椒☉肅RISPR/Cas9系統(tǒng)靶向敲除Huh7細胞的PBRM1基因。采用Sanger測序和蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測基因敲除情況�；谵D(zhuǎn)錄本測序(RNA-seq)結(jié)果,對Huh7敲除(KO)細胞株與Huh7野生(WT)細胞系差異表達基因進行功能富集。采用流式細胞術(shù)分析細胞周期的改變。通過CCK-8法和克隆形成實驗研究細胞增殖情況。采用不同濃度的γ-干擾素(IFN-γ)處理Huh7-KO細胞株和Huh7-WT細胞系,驗證GO富集中IFN-γ應答通路的改變。結(jié)果成功構(gòu)建PBRM1基因敲除的Huh7細胞株。Huh7-KO細胞株的生長曲線和克隆形成率均顯著慢于Huh7-WT細胞系(P <0.000 1)。Huh7-KO細胞株中下調(diào)基因主要與細胞周期相關(guān),上調(diào)基因主要與免疫應答相關(guān)。Huh7-KO細胞株處于G1期的細胞比例明顯高于Huh7-WT細胞系(P=0.016 6),而處于S期的細胞比例明顯低于Huh7-WT細胞系(...

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料與方法
結(jié)果
討論



本文編號：3739881

qikan

資料下載

論文發(fā)表

• 
  支付寶下載
  
  Download by Alipay
• 
  微信下載
  
  Download by Wechat
• 
  會員下載
  
  Download by Member

• 
  中文核心
  
  Chinese Core Journals
• 
  英文核心
  
  EI|SCI|SSCI
• 
  普通期刊
  
  General Journals

本文鏈接：http://sikaile.net/projectlw/swxlw/3739881.html

上一篇：細菌-噬菌體對抗性共進化研究進展  
下一篇：華東地區(qū)5地山頂“生境島”中三脈紫菀的分類學研究