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人工抗氧化肽的設(shè)計(jì)、表達(dá)純化及功能表征

發(fā)布時間:2023-01-12 18:46
  為獲得具有抗氧化功能的寡肽,人工設(shè)計(jì)了3條由不同寡肽串聯(lián)組成的含胰蛋白酶切割位點(diǎn)的多肽序列,分別命名為ATO、ATW和WIT,并在E. coli BL21(DE3)宿主中實(shí)現(xiàn)可溶性表達(dá)。純化的多肽經(jīng)過胰蛋白酶處理得到3種多肽水解物,體外抗氧化性功能評價(jià)實(shí)驗(yàn)表明,3種多肽水解物均對不同自由基具有清除作用,其中ATW多肽水解物抗氧化性最強(qiáng),對DPPH自由基、超氧陰離子自由基和羥基自由基的IC50值分別為0.53、0.45、0.34 mg/mL。本研究為制備抗氧化肽提供一種新思路。 

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 菌株和質(zhì)粒
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 培養(yǎng)基
    1.2 菌株構(gòu)建
    1.3 重組大腸桿菌的發(fā)酵
    1.4 多肽的純化
    1.5 寡肽的水解制備
    1.6 抗氧化性測定
        1.6.1 對DPPH自由基的清除能力測定
        1.6.2 對超氧陰離子自由基的清除能力測定
        1.6.3 對羥基自由基的清除能力測定
        1.6.4 半抑制濃度IC50的測定
2 結(jié)果與分析
    2.1 重組抗氧化肽的構(gòu)建
    2.2 重組肽的表達(dá)分析
    2.3 重組肽的純化與酶解
    2.4 多肽水解物的抗氧化性評價(jià)
        2.4.1 對DPPH自由基的清除能力
        2.4.2 對超氧陰離子自由基的清除能力
        2.4.3 對羥基自由基的清除能力
        2.4.4 多肽水解前后抗氧化活性比較
3 結(jié)語


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]酶解制備羊胎盤抗氧化肽工藝條件的優(yōu)化[J]. 姜惠敏,李明,曹光群,楊成.  食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2017(01)
[2]新疆阿魏菇抗氧化肽分離純化及抗氧化性質(zhì)[J]. 鄭曉吉,許程劍,牛博楠,陳帥,王雪銘,朱麗莉.  食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]螺旋藻抗氧化肽的制備及其體外活性研究[J]. 歐贇,喬燕燕,王維有,候凡,王宇,任迪峰,魯軍.  食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2014(01)
[4]抗氧化肽的構(gòu)效關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 張暉,唐文婷,王立,錢海峰,齊希光.  食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2013(07)
[5]氧化應(yīng)激狀態(tài)的評價(jià)[J]. 王秋林,王浩毅,王樹人.  中國病理生理雜志. 2005(10)



本文編號:3730295

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