溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）是一種全球性分布的條件致病細菌,能致使魚、蝦、貝等各種海洋生物出現(xiàn)不同程度的發(fā)病,尤其近年來養(yǎng)殖水質(zhì)環(huán)境頻繁出現(xiàn)污染、水體富營養(yǎng)化的現(xiàn)象,由溶藻弧菌引起的弧菌病呈現(xiàn)流行范圍廣,暴發(fā)頻繁的趨勢,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的損失并影響其健康發(fā)展。在宿主腸道上成功定植并進行繁殖是弧菌感染宿主和引起疾病的關(guān)鍵第一步。其中附屬定植因子Acf A是弧菌重要毒力蛋白之一,Acf A可以使致病菌有效地與宿主黏膜粘附,而關(guān)于溶藻弧菌Acf A相關(guān)功能的研究較少。本研究以溶藻弧菌HY9901為野生株,利用同源重組技術(shù)構(gòu)建溶藻弧菌acf A基因缺失株?acf A。利用16S r DNA高通量測序技術(shù)研究溶藻弧菌野生株WT和缺失株?acf A在石斑魚腸道的定植情況。通過轉(zhuǎn)錄組測序研究Acf A對鞭毛組裝、能量代謝等相關(guān)基因的調(diào)控。根據(jù)轉(zhuǎn)錄組測序和熒光定量PCR分析,敲除溶藻弧菌sod B基因,研究sod B基因的缺失是否影響溶藻弧菌的生物學特征和毒力。并利用β-半乳糖苷酶報告基因和細菌單雜交實驗驗證溶藻弧菌Acf A對SOD、Flg和Dct基因的調(diào)控作用。主要結(jié)果... 

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

霍亂弧菌腸道定植動力學模型（引自Almagro-Moreno等[54]

本文技術(shù)路線

acfA基因的克隆Fig.2-1CloningbyPCRofacfAgene


本文編號：3681727