目的:通過(guò)DOE（Design of Experiment,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)）的實(shí)驗(yàn)方法考察親和層析工藝的參數(shù)范圍。方法:使用經(jīng)澄清處理的細(xì)胞上清液為上樣樣品,選取洗脫p H、載量和柱高3個(gè)因子為輸入變量,以SEC-HPLC單體純度、回收率為輸出響應(yīng)值,使用全析因DOE模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果:在實(shí)驗(yàn)參數(shù)范圍內(nèi),SEC-HPLC單體純度沒(méi)有明顯的變化。洗脫p H條件則顯著影響層析收率;洗脫p H、載量和柱高這3個(gè)因子沒(méi)有明顯的交互影響。結(jié)論:DOE的實(shí)驗(yàn)方法適用于親和層析的工藝開發(fā),能通過(guò)一組實(shí)驗(yàn)同時(shí)考察多個(gè)參數(shù)對(duì)單抗親和層析工藝結(jié)果的影響,能較快速和全面地確認(rèn)親和層析工藝參數(shù)范圍。 

【文章來(lái)源】：生物化工. 2020,6(05)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

輸入因子與輸出變量箱線圖

從圖3的SEC-HPLC的響應(yīng)曲面圖來(lái)看，洗脫p H為X軸，也與多條純度等高線相交，也同樣驗(yàn)證了箱線圖的結(jié)論。對(duì)于SEC純度，p H越高，載量越高，純度也越高。綜合考慮，3.2～3.6的洗脫p H范圍既能滿足收率>90%，也能滿足SEC單體純度>95%的要求，在不超載的情況下盡量使用高載量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，層析結(jié)果較好。3 結(jié)論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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