隨著反向遺傳學(xué)的發(fā)展,許多研究發(fā)現(xiàn),一些基因在敲低時(shí)有明顯表型,但在基因敲除突變體中卻沒有表型,起初都認(rèn)為此種現(xiàn)象是由于敲低時(shí)脫靶效應(yīng)所致。2015年,Stainier實(shí)驗(yàn)室在斑馬魚中發(fā)現(xiàn)這種現(xiàn)象并不是由于脫靶效應(yīng)造成的,而是由于相關(guān)基因僅在敲除突變體中上調(diào)所致,他們把此種現(xiàn)象稱為遺傳補(bǔ)償效應(yīng)。2019年,我們實(shí)驗(yàn)室利用斑馬魚進(jìn)一步揭示了遺傳補(bǔ)償效應(yīng)的分子機(jī)制,證明只有無義突變才能激活遺傳補(bǔ)償效應(yīng),無義mRNA與Upf3a一起通過提高同源基因的表達(dá)來進(jìn)行補(bǔ)償效應(yīng)。此外,抑癌因子p53在DNA損傷反應(yīng)中扮演著中心角色,50%的人類癌細(xì)胞中都發(fā)生了p53變異,而這些癌細(xì)胞,由于p53突變喪失誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的功能,對(duì)放化療極不敏感。我們推測(cè)經(jīng)過放化療后而存活的p53突變癌細(xì)胞中可能會(huì)累積許多無義突變,這時(shí)遺傳補(bǔ)償效應(yīng)在這些細(xì)胞的存活中起到重要作用。本項(xiàng)研究將探討人類細(xì)胞中是否也存在遺傳補(bǔ)償效應(yīng),如果存在,其分子機(jī)制與斑馬魚又是否類似;在DNA損傷脅迫下,遺傳補(bǔ)償效應(yīng)是否會(huì)促進(jìn)p53缺失癌細(xì)胞的存活;同時(shí),我們實(shí)驗(yàn)室還發(fā)現(xiàn)p53缺失細(xì)胞對(duì)于40℃亞高溫處理更加敏感,本項(xiàng)研究將探尋其背后的分子機(jī)制... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 前言
    1.1 無義RNA介導(dǎo)的降解途徑(NMD)
        1.1.1 NMD降解機(jī)制
        1.1.2 UPF3 蛋白
        1.1.3 NMD的生理功能
        1.1.4 NMD與應(yīng)激反應(yīng)
    1.2 遺傳補(bǔ)償效應(yīng)
        1.2.1 遺傳補(bǔ)償效應(yīng)的分子機(jī)制
    1.3 抑癌基因p53
        1.3.1 p53 的功能
        1.3.2 p53 與癌癥治療
    1.4 熱休克反應(yīng)(HSR)
        1.4.1 熱休克因子
        1.4.2 熱休克蛋白
        1.4.3 熱激同源蛋白70(HSC70)與蛋白質(zhì)選擇性降解
    1.5 本課題研究的背景、內(nèi)容和目的
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 斑馬魚相關(guān)實(shí)驗(yàn)
    2.2人類細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)
    2.3 RNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)
    2.4 蛋白質(zhì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)
    2.5 DNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)
    2.6 本文中所用化學(xué)試劑及相關(guān)溶液配方
第三章 人類細(xì)胞系中遺傳補(bǔ)償效應(yīng)的研究
    3.1 FBXO7和COL6A2 基因敲除細(xì)胞系的構(gòu)建
    3.2 FBXO7和COL6A2 基因敲除細(xì)胞系中的遺傳補(bǔ)償效應(yīng)
    3.3 COL6A2~(-/-)細(xì)胞系中遺傳補(bǔ)償效應(yīng)依賴于UPF3A而不依賴于UPF1
    3.4 小結(jié)和討論
第四章 遺傳補(bǔ)償效應(yīng)與p53突變體在癌癥治療中的研究
    4.1 UPF3A敲除細(xì)胞系的獲得
    4.2 敲除UPF3A增加p53-/-應(yīng)對(duì)DNA損傷壓力的敏感性
    4.3 40 ℃條件下p53 保護(hù)細(xì)胞存活
    4.4 p53在40℃抑制過度的熱休克反應(yīng)
    4.5 小結(jié)和討論
第五章 總結(jié)與討論
    5.1 總結(jié)
    5.2 討論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3636502