發(fā)布時(shí)間：2022-02-19 08:10

　　目的:探索Seahorse XFe細(xì)胞能量代謝檢測(cè)儀檢測(cè)紅細(xì)胞能量代謝的實(shí)驗(yàn)條件及方法,對(duì)傳統(tǒng)紅細(xì)胞能量代謝檢測(cè)方法進(jìn)行補(bǔ)充。方法:向Seahorse細(xì)胞培養(yǎng)板添加不同數(shù)量的紅細(xì)胞,并根據(jù)倒置顯微鏡下紅細(xì)胞分布狀態(tài)確定最優(yōu)細(xì)胞檢測(cè)密度;利用Seahorse XFe24細(xì)胞能量代謝檢測(cè)儀,在37℃條件下,向活體紅細(xì)胞依次添加不同濃度的葡萄糖（Glucose）以及2-脫氧-D-葡萄糖（2-Deoxy-D-Glucose,2-DG）并連續(xù)監(jiān)測(cè)其胞外酸化率（Extracellular acidification rate,ECAR）的變化,計(jì)算其基礎(chǔ)糖酵解（Baseline glycolysis）、葡萄糖反應(yīng)性（Glucose response）以及糖酵解能力（Glycolytic capacity）3個(gè)指標(biāo)。結(jié)果:通過(guò)鏡下觀察紅細(xì)胞分布狀態(tài)得到最佳的紅細(xì)胞檢測(cè)密度為（5～6）×10⁸/well,通過(guò)對(duì)基礎(chǔ)糖酵解、葡萄糖反應(yīng)性以及糖酵解能力3個(gè)指標(biāo)的分析得到最佳葡萄糖和2-DG作用終濃度分別為10 mM和100 mM。結(jié)論:應(yīng)用Seahorse XFe細(xì)胞能量代謝檢測(cè)儀能... 

【文章來(lái)源】：包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2020,36(05)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 對(duì)象與方法
    1.1 試劑與耗材
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 實(shí)驗(yàn)用品預(yù)處理
        1.2.2 紅細(xì)胞懸液制備
        1.2.3 XFe24細(xì)胞培養(yǎng)板接種紅細(xì)胞
        1.2.4 加藥
    1.3 上機(jī)檢測(cè)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 最優(yōu)紅細(xì)胞檢測(cè)密度
    2.2 最佳藥物作用濃度
3 討論



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