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細胞外通量分析技術(shù)在紅細胞能量代謝研究中的應(yīng)用

發(fā)布時間:2022-02-19 08:10
  目的:探索Seahorse XFe細胞能量代謝檢測儀檢測紅細胞能量代謝的實驗條件及方法,對傳統(tǒng)紅細胞能量代謝檢測方法進行補充。方法:向Seahorse細胞培養(yǎng)板添加不同數(shù)量的紅細胞,并根據(jù)倒置顯微鏡下紅細胞分布狀態(tài)確定最優(yōu)細胞檢測密度;利用Seahorse XFe24細胞能量代謝檢測儀,在37℃條件下,向活體紅細胞依次添加不同濃度的葡萄糖(Glucose)以及2-脫氧-D-葡萄糖(2-Deoxy-D-Glucose,2-DG)并連續(xù)監(jiān)測其胞外酸化率(Extracellular acidification rate,ECAR)的變化,計算其基礎(chǔ)糖酵解(Baseline glycolysis)、葡萄糖反應(yīng)性(Glucose response)以及糖酵解能力(Glycolytic capacity)3個指標。結(jié)果:通過鏡下觀察紅細胞分布狀態(tài)得到最佳的紅細胞檢測密度為(5~6)×108/well,通過對基礎(chǔ)糖酵解、葡萄糖反應(yīng)性以及糖酵解能力3個指標的分析得到最佳葡萄糖和2-DG作用終濃度分別為10 mM和100 mM。結(jié)論:應(yīng)用Seahorse XFe細胞能量代謝檢測儀能... 

【文章來源】:包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2020,36(05)

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 對象與方法
    1.1 試劑與耗材
    1.2 實驗方法
        1.2.1 實驗用品預(yù)處理
        1.2.2 紅細胞懸液制備
        1.2.3 XFe24細胞培養(yǎng)板接種紅細胞
        1.2.4 加藥
    1.3 上機檢測
    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 最優(yōu)紅細胞檢測密度
    2.2 最佳藥物作用濃度
3 討論



本文編號:3632532

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