鞘氨醇類代謝產(chǎn)物,在調(diào)節(jié)細胞活動中發(fā)揮重要作用,維持鞘脂代謝的平衡,對細胞的生長和發(fā)育具有至關(guān)重要的作用。鞘氨醇激酶（Sphingosine kinase;SK）是保持鞘脂平衡的重要調(diào)節(jié)因子,在細胞的增殖、遷移、侵襲以及血管生成中起著重要作用。SK1具有促進細胞生存和增殖的功能。胚胎著床過程中主要涉及細胞增殖、遷移和血管生成,因此SK1可能參與胚胎著床過程。本研究通過建立小鼠早期正常妊娠模型、假孕模型、人工蛻膜化模型、延遲著床和激活著床模型,采用免疫熒光的方法檢測SK1在小鼠各模型子宮組織中的定位表達情況,應(yīng)用Western blot的方法檢測小鼠正常妊娠模型中SK1的表達量。在體外誘導(dǎo)小鼠子宮基質(zhì)細胞發(fā)生蛻膜化,通過實時定量PCR的方法,檢測SK1 mRNA在體外蛻膜化細胞中的表達量,進一步確定SK1的表達與蛻膜化的相關(guān)性。免疫熒光結(jié)果顯示,在小鼠早期妊娠模型中,妊娠1～4天時SK1主要在基質(zhì)區(qū)域表達,而子宮腔上皮和腺上皮無表達,妊娠5～8天時SK1主要表達在次級蛻膜區(qū)域。亞細胞定位顯示SK1在蛻膜細胞的細胞質(zhì)中表達。在小鼠假孕妊娠模型中,SK1主要表達在基質(zhì)區(qū)域,假孕第5天的表達低... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學黑龍江省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１正常妊娠模型制?

２．３．２小鼠假孕模型的建立??獲得結(jié)扎公鼠后，與發(fā)情期雌鼠合籠，觀察到陰道栓后第３天，取出子宮組織，以??生理鹽水沖洗輸卵管，無桑葚胚，而是獲得成熟卵母細胞（圖２－３，?Ａ），表明公鼠結(jié)扎??成功，同時成功制取假孕第３天模型。假孕模型第１天與正常妊娠第１天一致，均以見??到陰道栓為妊娠成功標志。假孕第５天，子宮組織無藍色著床位點（圖２－３，?Ｂ）。假孕??第１、３天子宮組織在形態(tài)學上與正常妊娠子宮組織無差別。??Ａ?—?Ｂ?—??圖中Ａ為假孕小鼠輸卵管中檢測到的成熟卵母細胞；Ｂ為假孕第５天的子宮組織，無藍色著床??位點，標尺為１?ｃｍ??圖２－３假孕妊娠模型制備結(jié)果??２．３．３小鼠人工蛻膜化模型的建立??將發(fā)情期小鼠與結(jié)扎公鼠合籠，以見到陰道栓為妊娠第１天。待妊娠第４天，對妊??娠小鼠單側(cè)子宮角注射芝麻油，飼養(yǎng)至妊娠第８天，取出子宮組織，在注射過芝麻油的??一側(cè)子宮有明顯突起（圖２－４），表明人工蛻膜化模型誘導(dǎo)成功，未注射芝麻油一側(cè)子宮??角為對照組。此模型重復(fù)３組。??＇＇丨

圖３－５定性表達共定位表達數(shù)據(jù)分析??３．３．１．２小鼠假孕模型中ＳＫ１的表達??ＳＫ１在小鼠假孕妊娠子宮組織中的檢測結(jié)果如圖３－６所示，統(tǒng)計結(jié)果見表３－７，與??正常妊娠第１、３、５天表達量的熒光分析見圖３－８。與正常妊娠模型不同，假孕妊娠小??鼠無胚胎，且妊娠第５天無著床現(xiàn)象。由圖３－６可知，在假孕妊娠模型中，ＳＫ１主要在??基質(zhì)區(qū)域表達。ＳＫ１的表達量在假孕妊娠第５天明顯低于正常妊娠第５天，結(jié)果具有統(tǒng)??計學意義（＊Ｐ＜ａ〇５）（圖３－８），結(jié)果顯示ＳＫ１的表達與活化胚胎可能相關(guān)。??－２４－??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3623259