離子液體是一類(lèi)廣泛用于生產(chǎn)、研究的有機(jī)溶劑,這也使得其生態(tài)安全性及對(duì)生物體的毒理效應(yīng)逐漸成為研究熱點(diǎn)。本文以人體肝癌細(xì)胞（HepG2）和斑馬魚(yú)（Danio rerio）作為受試對(duì)象,系統(tǒng)的研究了離子液體1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽（[Bmim]Cl）對(duì)能量代謝的影響,實(shí)驗(yàn)及主要的結(jié)論如下:1、為了驗(yàn)證[Bmim]Cl對(duì)HepG2細(xì)胞糖代謝的影響,將HepG2細(xì)胞分別暴露于[Bmim]Cl濃度為1、2、4、8 mmol·L^-1（mM）的培養(yǎng)基中24 h。結(jié)果顯示,[Bmim]Cl暴露后培養(yǎng)基內(nèi)葡萄糖的消耗量以及HepG2細(xì)胞胞內(nèi)糖原的含量均顯著降低,其中2 mM處理組培養(yǎng)基中葡萄糖的消耗量?jī)H為對(duì)照組的19%。通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR（RT-qPCR）進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn):與對(duì)照組相比,各處理組中糖原磷酸化酶（pygl）和丙酮酸激酶M（pkm）的表達(dá)上升,糖異生的關(guān)鍵基因葡萄糖6磷酸酶（g6pc）在2、4、8 mM三個(gè)處理組中表達(dá)出現(xiàn)顯著下調(diào)。檸檬酸循環(huán)（TCA循環(huán)）限速基因的表達(dá)同樣受到了影響,異檸檬酸脫氫酶（idh2）在8mM的處理組中表達(dá)出現(xiàn)了極顯著的上調(diào),其表達(dá)倍數(shù)是對(duì)照組... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

能量代謝途徑Fig1.1Diagramofenergymetabolicpathway

離子液體[Bmim]Cl對(duì)人體肝癌細(xì)胞HepG2和斑馬魚(yú)能量代謝的影響及其機(jī)制研究10實(shí)驗(yàn)測(cè)定代謝相關(guān)基因的表達(dá)變化。通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)從分子、生理、細(xì)胞、組織、個(gè)體水平上系統(tǒng)、深入的探索離子液體對(duì)HepG2細(xì)胞和斑馬魚(yú)能量代謝的毒性作用及機(jī)制。明確離子液體對(duì)斑馬魚(yú)和HepG2細(xì)胞能量代謝的毒性作用；闡明離子液體對(duì)斑馬魚(yú)能量代謝的毒性作用機(jī)制；為建立保護(hù)生態(tài)健康安全的離子液體的排放標(biāo)準(zhǔn)提供數(shù)據(jù)支持。1.4.3研究技術(shù)路線(xiàn)本文以HepG2細(xì)胞和模式生物斑馬魚(yú)為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停瑥捏w內(nèi)和體外兩個(gè)部分系統(tǒng)的研究咪唑類(lèi)離子液體[Bmim]Cl對(duì)其糖脂代謝的影響。研究技術(shù)路線(xiàn)如下圖1.2所示。圖1.2研究技術(shù)路線(xiàn)圖Fig1.2Technicalroutesoftheresearchwork

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文19柱狀圖均用作圖軟件Origin8完成。2.3結(jié)果2.3.1[Bmim]Cl對(duì)細(xì)胞存活率及葡萄糖消耗的影響如圖2.1所示，不同濃度的[Bmim]Cl作用24h后，隨著[Bmim]Cl濃度的升高，其細(xì)胞存活率呈一個(gè)下降的趨勢(shì)。根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，[Bmim]Cl濃度為16mM和32mM的處理組與空白對(duì)照組之間的細(xì)胞存活率存在一個(gè)極顯著的差異，兩個(gè)處理組的存活率均不到60%。實(shí)驗(yàn)以暴露后細(xì)胞消耗培養(yǎng)基中的葡萄糖作為指標(biāo)，分析HepG2細(xì)胞糖代謝的變化。結(jié)果如圖2.2所示，與空白組相比較，[Bmim]Cl暴露過(guò)后處理組消耗葡萄糖的量發(fā)生了不同程度的變化，在暴露濃度為2mM的情況下培養(yǎng)基中的葡萄糖消耗最少不足1.5mM，由此可知該組細(xì)胞的糖代謝可能受到了較為嚴(yán)重的影響，而之后更高濃度暴露的處理組其糖原含量均有所回升但仍與空白組存在顯著性差異。結(jié)合圖2.1分析，在[Bmim]Cl暴露濃度為1、2、4、8mM時(shí)，細(xì)胞活性并未受到特別明顯的抑制，但是其消耗葡萄糖的含量卻發(fā)生了顯著改變。本實(shí)驗(yàn)旨在探究非致死濃度下低劑量的[Bmim]Cl對(duì)細(xì)胞糖代謝的影響，故選取1、2、4、8mM作為正式實(shí)驗(yàn)處理組的濃度。圖2.1離子液體[Bmim]Cl暴露后HepG2細(xì)胞的存活率Figure2.1SurvivalrateofHepG2cellsafterexposuretoionicliquid[Bmim]Cl注：所有數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）值（n=3或6）表示。星號(hào)是指顯著差異（*P<0.05，**P<0.01）。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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