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香樟1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶基因的克隆與表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2022-01-20 06:43
  本研究通過克隆香樟植物的1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)基因,進(jìn)行生物信息學(xué)分析,為香樟DXS基因的功能及其表達(dá)調(diào)控提供基礎(chǔ)。根據(jù)香樟轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中注釋為DXS的核苷酸拼接序列,設(shè)計(jì)特異性引物,進(jìn)行香樟DXS基因的克隆,應(yīng)用熒光定量PCR方法分析DXS基因在香樟根、莖和葉中的表達(dá)量。克隆獲得香樟DXS基因,其c DNA序列長度為2 333 bp,開放讀碼閱讀框(ORF)為2 187 bp,編碼728個(gè)氨基酸,含有轉(zhuǎn)酮醇酶等3個(gè)保守結(jié)構(gòu)域。香樟DXS蛋白定位于葉綠體,是一個(gè)不含信號(hào)肽、無跨膜結(jié)構(gòu)域的親水性穩(wěn)定蛋白,且蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)主要為α-螺旋和無規(guī)則卷曲。通過氨基酸序列同源性分析發(fā)現(xiàn),香樟DXS氨基酸序列與黃蘭和魚腥草的DXS氨基酸序列相似性較高,均為85%。分子進(jìn)化樹結(jié)果表明,香樟DXS蛋白與黃蘭DXS蛋白親緣關(guān)系較近。組織特異性表達(dá)分析結(jié)果顯示,DXS在香樟葉與莖中的表達(dá)量高于根。成功克隆獲得香樟DXS基因,研究結(jié)果為進(jìn)一步探討香樟DXS基因在萜類物質(zhì)生物合成途徑中的作用提供理論依據(jù)。 

【文章來源】:基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

香樟1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶基因的克隆與表達(dá)分析


PCR擴(kuò)增香樟DXS基因

氨基酸序列,香樟,氨基酸序列,蛋白質(zhì)


CcDXS的ORF序列及其編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列

香樟,三級(jí)結(jié)構(gòu),建模,進(jìn)化樹


香樟DXS三級(jí)結(jié)構(gòu)建模

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]香樟GGPPS基因的克隆及生物信息學(xué)分析[J]. 曹先爽,王進(jìn),張瑤瑤,王煜煒,馬曉江,宋麗,湯鋒,岳永德.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(08)
[2]香樟FPPS基因的克隆及生物信息學(xué)分析[J]. 張瑤瑤,宋麗,劉偉,曹先爽,王煜煒,王進(jìn).  分子植物育種. 2018(19)
[3]香樟MK基因的克隆與生物信息學(xué)分析[J]. 曹先爽,王進(jìn),張瑤瑤,王煜煒,馬曉江,宋麗,湯鋒,岳永德.  熱帶作物學(xué)報(bào). 2017(12)
[4]樟樹植物資源分布及化學(xué)成分研究進(jìn)展[J]. 張峰,畢良武,趙振東.  天然產(chǎn)物研究與開發(fā). 2017(03)
[5]滇牡丹1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)基因的克隆及功能分析[J]. 趙能,原曉龍,陳中華,楊宇明,王娟,王毅.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2017(07)
[6]冬凌草1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶基因克隆與表達(dá)分析[J]. 朱畇昊,蘇秀紅,董誠明,陳隨清,邵遠(yuǎn)洋,張風(fēng)波.  廣西植物. 2016(12)
[7]思茅松1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)基因的克隆及功能分析[J]. 王毅,周旭,畢瑋,楊宇明,李江,王娟.  林業(yè)科學(xué)研究. 2015(06)
[8]合成生物學(xué)在中藥資源可持續(xù)利用研究中的應(yīng)用[J]. 黃璐琦,高偉,周雍進(jìn).  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2014(01)
[9]次生維管系統(tǒng)發(fā)育的分子基礎(chǔ)研究[J]. 盧孟柱.  中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2003(02)

博士論文
[1]大豆萜類非甲羥戊酸代謝途徑關(guān)鍵酶基因的克隆及功能鑒定[D]. 張曼.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào):3598357

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