熒光蛋白現(xiàn)在已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域,并且為精度較高的亞細(xì)胞級(jí)別成像技術(shù)提供了便利,而650 nm⁷00 nm范圍的熒光探針在生物體內(nèi)的組織內(nèi),具有透射率更高,成像時(shí)間更長(zhǎng),自發(fā)熒光背景弱,光散射率低等優(yōu)勢(shì)。而具有大斯托克位移的遠(yuǎn)紅熒光蛋白也成為了熒光蛋白領(lǐng)域內(nèi)的研究熱點(diǎn)。藻膽蛋白作為藻膽體的重要組成部分,可以捕獲橙光、紅光和遠(yuǎn)紅光來(lái)用于藍(lán)藻和紅藻的光合作用,而藻膽體核心的藻膽蛋白如別藻藍(lán)蛋白則可以吸收遠(yuǎn)紅光,從而將能量傳遞到反應(yīng)中心。因此別藻藍(lán)蛋白的亞基可以被設(shè)計(jì)成一些遠(yuǎn)紅熒光蛋白,例如嗜熱藻Chroococcidiopsis thermalis PCC7203的中藻膽體核亞基ApcF2優(yōu)化發(fā)展而來(lái)的可以結(jié)合BV色素的遠(yuǎn)紅熒光蛋白BDFP1.2/1.6等系列。但是目前的熒光蛋白的斯托克位移都比較小,這極大地限制了在細(xì)胞內(nèi)多色成像的應(yīng)用。mCherry是一個(gè)被廣泛應(yīng)用的優(yōu)良的紅色熒光蛋白,因?yàn)槠溆兄^高的熒光量子產(chǎn)率而可以作為FRET中的能量供體,從而將能量有效地傳遞給能量受體例如BDFP1.6等遠(yuǎn)紅熒光蛋白。我們將mCherry與BDFP1.6熒光蛋白通過(guò)不... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

藻膽體與其關(guān)聯(lián)的光合系統(tǒng)PSI結(jié)構(gòu)示意圖

圖 1.3 依賴(lài)鐵氧蛋白還原酶的藻膽色素的生物合成[8]。Figure 1.3 Bilin biosynthesis by ferredoxin-dependent bilin reductases[8].脫輔基蛋白通過(guò)基因轉(zhuǎn)錄和翻譯合成以后，膽色素與脫輔基蛋白的保酸形成硫醚鍵，形成藻膽蛋白，從而使得藻膽體參與到捕獲光能的過(guò)細(xì)菌的光合作用順利完成。熒光蛋白的研究進(jìn)展光蛋白作為現(xiàn)代生物學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的一種分子標(biāo)記物，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到內(nèi)，成為了科學(xué)家開(kāi)展科研活動(dòng)必不可缺的工具。同時(shí)也吸引得越來(lái)們對(duì)熒光蛋白產(chǎn)生興趣。 GFP 綠色熒光蛋白家族色熒光蛋白 GFP（Green Fluorescent Protein）是一類(lèi)應(yīng)用廣泛的熒光蛋

6圖 1.4 利用 GFP 的衍生物進(jìn)行來(lái) Ca2+濃度檢測(cè)[42]。gure 1.4 Scheme showing how FRET between GFPs can measure Ca2+02 年，Takeharu Nagai 等人在 EYFP 的基礎(chǔ)上進(jìn)行隨機(jī)突變，4L的突變體命名為Venus，極大的提升了在37 ℃條件下蛋白成4L/M153T/V163A/S175G 的突變體 Y-Venus，則有著較高的耐


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