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植物乳桿菌代謝低聚果糖的局部轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-11-27 00:45
  在植物乳桿菌中,低聚果糖(FOS)的代謝受全局調(diào)控和局部調(diào)控的雙重作用。盡管分解代謝控制蛋白A (CcpA)已被確定為植物乳桿菌參與FOS代謝的全局調(diào)控因子,但是關(guān)于局部調(diào)控的作用仍不清晰。為了探究植物乳桿菌代謝FOS局部轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制,本文以SacR1和SacR2蛋白為研究對(duì)象,通過(guò)體內(nèi)外試驗(yàn)驗(yàn)證了這兩個(gè)蛋白在植物乳桿菌利用FOS過(guò)程中的作用。研究表明,sacR1和sacR2的敲除顯著影響菌株在FOS或葡萄糖上的生長(zhǎng)以及代謝物的產(chǎn)生。對(duì)植物乳桿菌的一種野生型和兩種突變菌株(ΔsacR1和ΔsacR2)進(jìn)行熒光定量PCR分析,表明了SacR1和SacR2可能作為阻遏蛋白參與到FOS代謝過(guò)程中,FOS可以起到誘導(dǎo)或去阻遏作用。通過(guò)預(yù)測(cè),在2個(gè)與FOS代謝相關(guān)的基因簇中共找到了4個(gè)潛在的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)(TFBS),并通過(guò)體內(nèi)外試驗(yàn)-電泳遷移率變動(dòng)分析法和染色質(zhì)免疫沉淀法驗(yàn)證了這2個(gè)蛋白與TFBS的特異性結(jié)合。根據(jù)簡(jiǎn)并原則SacR1和SacR2蛋白結(jié)合的共同序列可以簡(jiǎn)并為WNNNNNAACGNNTTNNNNNW。綜上,我們的研究結(jié)果表明SacR1和SacR2作為局部阻遏物參與到植物乳桿菌代謝... 

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