小分子熱休克蛋白（sHSPs）是一種普遍存在的熱休克蛋白。它能夠保護(hù)有機(jī)體在受到各種環(huán)境脅迫如溫度、環(huán)境污染、資源危機(jī)、生物氧化性、病原體等的損害。本研究采用的兩種小分子熱休克蛋白分別是AgsA（來(lái)自鼠傷寒沙門(mén)氏菌）和CeHSP17（來(lái)自秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)）。通過(guò)小分子熱休克蛋白AgsA和CeHSP17在大腸桿菌中的外源表達(dá),研究大腸桿菌BL21（DE3）+AgsA和BL21（DE3）+CeHSP17和BL21（DE3）在溫度和重金屬?gòu)?fù)合脅迫下的劑量與效應(yīng)關(guān)系和細(xì)胞蓄積效應(yīng),探討小分子熱休克蛋白AgsA和CeHSP17在重金屬和溫度的復(fù)合脅迫下對(duì)大腸桿菌的保護(hù)作用,以及小分子熱休克蛋白AgsA在重金屬細(xì)胞蓄積和受損細(xì)胞的恢復(fù)中的作用。1.大腸桿菌在溫度和重金屬?gòu)?fù)合脅迫效應(yīng)研究:研究結(jié)果表明對(duì)于重金屬Zn和Cd脅迫,小分子熱休克蛋白AgsA有較明顯的的應(yīng)激反應(yīng),保護(hù)了大腸桿菌細(xì)胞,在各個(gè)溫度下小分子熱休克蛋白AgsA都提高了大腸桿菌對(duì)重金屬Zn和Cd的耐受性,特別是42℃和50℃。而重金屬Zn和Cd脅迫下,CeHSP17的應(yīng)激反應(yīng)不顯著,僅50℃顯著作用保護(hù)了大腸桿菌細(xì)胞,顯著提高了大腸桿菌對(duì)... 

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小分子熱休克蛋白在應(yīng)激反應(yīng)中的作用

小時(shí)誘導(dǎo)蛋白質(zhì)在細(xì)菌內(nèi)的表達(dá)，得到實(shí)驗(yàn)菌種 BL21（DE3）+AgsA 和 BL21（DE3）+ CeHSP17用于實(shí)驗(yàn)。 1.3.3.2 大腸桿菌毒性研究方法 大腸桿菌對(duì)重金屬的急性毒性研究，主要是通過(guò)討論重金屬的劑量與大腸桿菌的毒性效應(yīng)（EC50）關(guān)系來(lái)實(shí)現(xiàn)的[179,188,189]。這一劑量-效應(yīng)關(guān)系的實(shí)現(xiàn)首先要了解大腸桿菌的種群生長(zhǎng)模型，即方法建立是基于種群增長(zhǎng)模型—邏輯斯蒂曲線(xiàn)理論基礎(chǔ)。 生態(tài)學(xué)理論認(rèn)為，種群的生長(zhǎng)與種群的生活的環(huán)境空間、食物等資源及種群密度有關(guān)。并將種群的生長(zhǎng)分為 5 個(gè)時(shí)期，開(kāi)始期，種群個(gè)體數(shù)很少，種群密度增最快。加速期，隨著個(gè)體數(shù)增加，密度增加逐步加快。減速期，當(dāng)個(gè)體數(shù)達(dá)到 K/2 時(shí)，密度增長(zhǎng)。穩(wěn)定期，個(gè)體數(shù)超過(guò) K/2 時(shí)，密度增長(zhǎng)逐步減慢。飽和期，種群個(gè)體數(shù)達(dá)到飽和 K 值長(zhǎng)緩慢[190]。

23根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，我們將劑量和效應(yīng)關(guān)系圖分別擬合，繪制圖2-4.Figure2-4DoseresponsecurveofZincatdifferenttemperaturesinBL21(DE3)E.coliandBL21(DE3)+CeHSP17E.colicells(A)37(B)42(C)50℃℃℃.AlldataarerepresentedasmeanvaluesanderrorbarsreflectSD.**denotesP<0.01ascomparedtoBL21(DE3)+CeHSP17andBL21(DE3)atsametemperture.圖2-4不同溫度下BL21(DE3)E.coli和BL21(DE3)+CeHSP17E.coli對(duì)Zn的劑量與效應(yīng)關(guān)系曲線(xiàn)(A)37(B)42(C)50℃℃℃。**P<0.01，表示同溫度BL21(DE3)+CeHSP17和BL21(DE3)比較的結(jié)果。將對(duì)照組大腸桿菌（BL21（DE3））與測(cè)試組大腸桿菌（BL21（DE3）+CeHSP17）進(jìn)行比較，不難看出各個(gè)溫度下，測(cè)試組大腸桿菌耐受性強(qiáng)于對(duì)照組大腸桿菌。50℃時(shí)測(cè)試組和對(duì)照組對(duì)Zn毒性的耐受性差異最大。圖2-4（A）顯示，37℃溫度下，測(cè)試組對(duì)Zn的耐受性大于對(duì)照組的耐受性，EC50的結(jié)果顯示兩者相差6倍。T-test結(jié)果顯示兩者不存在顯著性差異（p>0.05）。圖2-4（B）顯示，42℃溫度下，測(cè)試組對(duì)Zn的耐受性略高于對(duì)照組的耐受性，EC50

【參考文獻(xiàn)】：
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