沙狐（Vulpes corsac）,又名東沙狐,在維持食物鏈的穩(wěn)定等生態(tài)學(xué)方面有重要作用。目前沙狐種群數(shù)量在自然界中大幅縮減,為了保護(hù)和發(fā)展這一物種資源以及維護(hù)生態(tài)平衡我們開展了本次實(shí)驗(yàn)。有關(guān)沙狐的細(xì)胞培養(yǎng)建系及其生物學(xué)特性分析的研究尚未報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)利用組織塊貼壁法對(duì)沙狐部分組織進(jìn)行原代建系并成功建立沙狐氣管成纖維細(xì)胞系和軟骨成纖維細(xì)胞系,兩種細(xì)胞系均符合成纖維細(xì)胞的基本特征,主要表現(xiàn)為細(xì)胞貼壁生長且呈典型的梭形和多邊形。對(duì)以上兩種組織來源的成纖維細(xì)胞進(jìn)行了相關(guān)生物學(xué)特性研究。測定了兩種組織細(xì)胞的貼壁率,凍存前后存活率,繪制了生長曲線且生長曲線為S型。脂質(zhì)體(Lipofectamine^TM2000)轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白質(zhì)粒（PEGFP-C1）的轉(zhuǎn)染效率大于20%,采用常規(guī)技術(shù)低滲滴片法制備染色體標(biāo)本,并對(duì)沙狐染色體進(jìn)行了核型及其G帶分析,結(jié)果顯示中期染色體二倍體（2n=36）約占細(xì)胞總數(shù)的84%,其中17對(duì)為常染色體其形態(tài)類型為1st+10m+6sm,另1對(duì)為性染色體X其形態(tài)類型為m。本研究成功建立了沙狐兩種成纖維細(xì)胞系及其相應(yīng)的培養(yǎng)體系。通過檢測確定所建立細(xì)胞系的染... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

沙狐原代成纖維細(xì)胞A圖為氣管成纖維細(xì)胞B圖為軟骨成纖維細(xì)胞標(biāo)尺=200μmFig2.1PrimarycultureofcorsacfoxcellsAistrachealfibroblastsandBiscartilage200μm200μm

2.4.2 沙狐組織成纖維細(xì)胞傳代培養(yǎng)結(jié)果（1）沙狐氣管成纖維細(xì)胞P3、P5、P7培養(yǎng)4 ~ 5天形態(tài)圖圖2.2 沙狐氣管成纖維細(xì)胞 P3、P5、P7 標(biāo)尺=200 μmFig2.2 Tracheal fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm（2）沙狐軟骨成纖維細(xì)胞P3、P5、P7培養(yǎng)4 ~ 5天形態(tài)圖圖2.3 沙狐軟骨成纖維細(xì)胞 P3、P5、P7 標(biāo)尺=200 μmFig2.3 Cartilage fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm圖2.2至圖2.3分別為沙狐氣管成纖維細(xì)胞和軟骨成纖維細(xì)胞在P3、P5、P7培養(yǎng)2 ~ 3天時(shí)的形態(tài)圖。從原代細(xì)胞建系到傳代培養(yǎng)的過程中，發(fā)現(xiàn)有未貼壁的懸浮細(xì)胞，后經(jīng)過幾次換液操作純化后，得到單一的細(xì)胞種類，此時(shí)表明細(xì)胞系已經(jīng)純化。兩種成纖維細(xì)胞在較低代次時(shí)細(xì)胞形狀立體感較強(qiáng)，隨后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)時(shí)間越長代次越高，細(xì)胞形態(tài)則趨于扁平狀。P3P5 P7200μm200μm200μm200μm200μm200μmP3 P5 P7

Fig2.2 Tracheal fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm（2）沙狐軟骨成纖維細(xì)胞P3、P5、P7培養(yǎng)4 ~ 5天形態(tài)圖圖2.3 沙狐軟骨成纖維細(xì)胞 P3、P5、P7 標(biāo)尺=200 μmFig2.3 Cartilage fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm圖2.2至圖2.3分別為沙狐氣管成纖維細(xì)胞和軟骨成纖維細(xì)胞在P3、P5、P7培養(yǎng)2 ~ 3天時(shí)的形態(tài)圖。從原代細(xì)胞建系到傳代培養(yǎng)的過程中，發(fā)現(xiàn)有未貼壁的懸浮細(xì)胞，后經(jīng)過幾次換液操作純化后，得到單一的細(xì)胞種類，此時(shí)表明細(xì)胞系已經(jīng)純化。兩種成纖維細(xì)胞在較低代次時(shí)細(xì)胞形狀立體感較強(qiáng)，隨后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)時(shí)間越長代次越高，細(xì)胞形態(tài)則趨于扁平狀。P3P5 P7200μm200μm200μm200μm200μm200μmP3 P5 P7

【參考文獻(xiàn)】：
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