沙狐（Vulpes corsac）,又名東沙狐,在維持食物鏈的穩(wěn)定等生態(tài)學(xué)方面有重要作用。目前沙狐種群數(shù)量在自然界中大幅縮減,為了保護和發(fā)展這一物種資源以及維護生態(tài)平衡我們開展了本次實驗。有關(guān)沙狐的細胞培養(yǎng)建系及其生物學(xué)特性分析的研究尚未報道。本實驗利用組織塊貼壁法對沙狐部分組織進行原代建系并成功建立沙狐氣管成纖維細胞系和軟骨成纖維細胞系,兩種細胞系均符合成纖維細胞的基本特征,主要表現(xiàn)為細胞貼壁生長且呈典型的梭形和多邊形。對以上兩種組織來源的成纖維細胞進行了相關(guān)生物學(xué)特性研究。測定了兩種組織細胞的貼壁率,凍存前后存活率,繪制了生長曲線且生長曲線為S型。脂質(zhì)體(Lipofectamine^TM2000)轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白質(zhì)粒（PEGFP-C1）的轉(zhuǎn)染效率大于20%,采用常規(guī)技術(shù)低滲滴片法制備染色體標本,并對沙狐染色體進行了核型及其G帶分析,結(jié)果顯示中期染色體二倍體（2n=36）約占細胞總數(shù)的84%,其中17對為常染色體其形態(tài)類型為1st+10m+6sm,另1對為性染色體X其形態(tài)類型為m。本研究成功建立了沙狐兩種成纖維細胞系及其相應(yīng)的培養(yǎng)體系。通過檢測確定所建立細胞系的染... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

沙狐原代成纖維細胞A圖為氣管成纖維細胞B圖為軟骨成纖維細胞標尺=200μmFig2.1PrimarycultureofcorsacfoxcellsAistrachealfibroblastsandBiscartilage200μm200μm

2.4.2 沙狐組織成纖維細胞傳代培養(yǎng)結(jié)果（1）沙狐氣管成纖維細胞P3、P5、P7培養(yǎng)4 ~ 5天形態(tài)圖圖2.2 沙狐氣管成纖維細胞 P3、P5、P7 標尺=200 μmFig2.2 Tracheal fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm（2）沙狐軟骨成纖維細胞P3、P5、P7培養(yǎng)4 ~ 5天形態(tài)圖圖2.3 沙狐軟骨成纖維細胞 P3、P5、P7 標尺=200 μmFig2.3 Cartilage fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm圖2.2至圖2.3分別為沙狐氣管成纖維細胞和軟骨成纖維細胞在P3、P5、P7培養(yǎng)2 ~ 3天時的形態(tài)圖。從原代細胞建系到傳代培養(yǎng)的過程中，發(fā)現(xiàn)有未貼壁的懸浮細胞，后經(jīng)過幾次換液操作純化后，得到單一的細胞種類，此時表明細胞系已經(jīng)純化。兩種成纖維細胞在較低代次時細胞形狀立體感較強，隨后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)時間越長代次越高，細胞形態(tài)則趨于扁平狀。P3P5 P7200μm200μm200μm200μm200μm200μmP3 P5 P7

Fig2.2 Tracheal fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm（2）沙狐軟骨成纖維細胞P3、P5、P7培養(yǎng)4 ~ 5天形態(tài)圖圖2.3 沙狐軟骨成纖維細胞 P3、P5、P7 標尺=200 μmFig2.3 Cartilage fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm圖2.2至圖2.3分別為沙狐氣管成纖維細胞和軟骨成纖維細胞在P3、P5、P7培養(yǎng)2 ~ 3天時的形態(tài)圖。從原代細胞建系到傳代培養(yǎng)的過程中，發(fā)現(xiàn)有未貼壁的懸浮細胞，后經(jīng)過幾次換液操作純化后，得到單一的細胞種類，此時表明細胞系已經(jīng)純化。兩種成纖維細胞在較低代次時細胞形狀立體感較強，隨后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)時間越長代次越高，細胞形態(tài)則趨于扁平狀。P3P5 P7200μm200μm200μm200μm200μm200μmP3 P5 P7

【參考文獻】：
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本文編號：3422789