基于小分子介導(dǎo)DNA信號(hào)放大的熒光分析方法研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-07 15:14
信號(hào)放大是實(shí)現(xiàn)靈敏分析的有效途徑,DNA因?yàn)榫哂歇?dú)特的堿基互補(bǔ)配對(duì)特性以及可化學(xué)合成的簡(jiǎn)便性已成為信號(hào)放大的良好材料。DNA信號(hào)放大已被廣泛應(yīng)用于生物分子的靈敏分析檢測(cè)。本論文從小分子介導(dǎo)DNA信號(hào)放大角度出發(fā),通過(guò)酰胺鍵的形成、點(diǎn)擊化學(xué)以及腙化學(xué)實(shí)現(xiàn)了小分子介導(dǎo)的DNA雜交鏈反應(yīng)(HCR)與DNA行走(DNA Walker),構(gòu)建了兩種新型的熒光分析方法,分別用于葡萄糖苷酶及其抑制劑的分析和脂多糖(LPS)及糠醛的檢測(cè)。主要研究?jī)?nèi)容如下:1.酶底物介導(dǎo)的DNA雜交鏈反應(yīng)原位檢測(cè)α-葡萄糖苷酶活性及抑制劑篩選新方法論文本部分提出了一種基于小分子介導(dǎo)DNA雜交鏈反應(yīng)(HCR)的α-葡萄糖苷酶(α-Glu)及其抑制劑的原位分析新方法。作為一種重要的消化酶,α-Glu可以催化底物對(duì)氨基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(pAPG)水解為對(duì)氨基苯(pAP)和α-D-吡喃葡萄糖苷。我們將pAPG共價(jià)連接至磁納米球(AMNSS)上,其含有順式二醇基團(tuán)可以與硼酸標(biāo)記的起始鏈形成磷酸二酯鍵,導(dǎo)致起始鏈被固定于AMNSS,進(jìn)而驅(qū)動(dòng)AMNSS周圍H...
【文章來(lái)源】:上海大學(xué)上海市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:79 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
DBCO與疊氮環(huán)加成反應(yīng)示意圖
圖 1.2 腙化學(xué)示意圖。Figure 1.2 Scheme of the hydrazine chemistry.腙化學(xué)作為一種化學(xué)選擇性連接,由于其模塊性以及特殊性,因而具有廣泛性和通用性,腙化學(xué)在許多研究領(lǐng)域中,例如金屬和共價(jià)有機(jī)框架、動(dòng)態(tài)組合化學(xué)、孔運(yùn)輸材料、分子開關(guān)以及傳感器中有著廣泛的使用[10]。腙化學(xué)之所以有這些特性均源于其有親核的亞胺以及更活潑的氨基型氮,同時(shí)具有親電性和親核性的亞胺碳以及 CN 雙鍵固有的構(gòu)型異構(gòu),從而賦予了其穩(wěn)定且通用的物理和化學(xué)性質(zhì),在其應(yīng)用范圍廣方面發(fā)揮了重要作用[11]。其反應(yīng)如圖 1.2 所示。
1.1.3 硼酸識(shí)別硼酸可以與 1,2-/1,3-鄰羥基結(jié)構(gòu)(特別是糖類化合物)可逆地共價(jià)結(jié)合,形成五元或六元環(huán)內(nèi)酯結(jié)構(gòu),可以作為生物傳感器的識(shí)別單元,在生物醫(yī)藥、食品工業(yè)、環(huán)保等領(lǐng)域有著廣泛利用。由于糖類化合物在自然界中存在廣泛且生物學(xué)意義重要,因此利用硼酸識(shí)別的生物傳感器來(lái)檢測(cè)分析糖類化合物得到越來(lái)越多研究人員的重視[16, 17]。除此以外 4-氨基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(pAPG)可以做為葡萄糖苷酶切割的底物,被用于葡萄糖苷酶分析以及抑制劑的篩選[18]。而硼酸作為一種優(yōu)良的分子受體,對(duì)于糖類,硼酸也可以以高親和力可逆地結(jié)合二醇形成酯[19, 20],在這種條件下,Zhang 等[21]提出了 α-葡萄糖苷酶的比色法;钚詼y(cè)定及其抑制劑篩選。這種方法基于苯二硼酸和糖原部分與 AuNP 相連的酶底物的特異性識(shí)別,如圖 1.4 所示
本文編號(hào):3422289
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DBCO與疊氮環(huán)加成反應(yīng)示意圖
圖 1.2 腙化學(xué)示意圖。Figure 1.2 Scheme of the hydrazine chemistry.腙化學(xué)作為一種化學(xué)選擇性連接,由于其模塊性以及特殊性,因而具有廣泛性和通用性,腙化學(xué)在許多研究領(lǐng)域中,例如金屬和共價(jià)有機(jī)框架、動(dòng)態(tài)組合化學(xué)、孔運(yùn)輸材料、分子開關(guān)以及傳感器中有著廣泛的使用[10]。腙化學(xué)之所以有這些特性均源于其有親核的亞胺以及更活潑的氨基型氮,同時(shí)具有親電性和親核性的亞胺碳以及 CN 雙鍵固有的構(gòu)型異構(gòu),從而賦予了其穩(wěn)定且通用的物理和化學(xué)性質(zhì),在其應(yīng)用范圍廣方面發(fā)揮了重要作用[11]。其反應(yīng)如圖 1.2 所示。
1.1.3 硼酸識(shí)別硼酸可以與 1,2-/1,3-鄰羥基結(jié)構(gòu)(特別是糖類化合物)可逆地共價(jià)結(jié)合,形成五元或六元環(huán)內(nèi)酯結(jié)構(gòu),可以作為生物傳感器的識(shí)別單元,在生物醫(yī)藥、食品工業(yè)、環(huán)保等領(lǐng)域有著廣泛利用。由于糖類化合物在自然界中存在廣泛且生物學(xué)意義重要,因此利用硼酸識(shí)別的生物傳感器來(lái)檢測(cè)分析糖類化合物得到越來(lái)越多研究人員的重視[16, 17]。除此以外 4-氨基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(pAPG)可以做為葡萄糖苷酶切割的底物,被用于葡萄糖苷酶分析以及抑制劑的篩選[18]。而硼酸作為一種優(yōu)良的分子受體,對(duì)于糖類,硼酸也可以以高親和力可逆地結(jié)合二醇形成酯[19, 20],在這種條件下,Zhang 等[21]提出了 α-葡萄糖苷酶的比色法;钚詼y(cè)定及其抑制劑篩選。這種方法基于苯二硼酸和糖原部分與 AuNP 相連的酶底物的特異性識(shí)別,如圖 1.4 所示
本文編號(hào):3422289
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