發(fā)布時(shí)間：2021-10-05 12:03

　　目的探討脂肪源性干細(xì)胞（ADSCs）向成纖維細(xì)胞分化的可能,為解決皮膚組織工程種子細(xì)胞提供有效途徑。方法取健康成年SD大鼠10只,體重280～320 g,雌雄不限,麻醉、脫毛、消毒,于腹股溝處獲取脂肪后進(jìn)行ADSCs的體外分離、培養(yǎng)和傳代,觀察原代細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn);取第3代細(xì)胞,成骨誘導(dǎo)后第16天行堿性磷酸酶（ALP）檢測(cè),成骨誘導(dǎo)后第23天行茜素紅染色,成脂誘導(dǎo)后第12天行油紅O染色;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志;加入條件培養(yǎng)基向成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)分化,于誘導(dǎo)后第2天、第4天、第6天、第8天攝片記錄細(xì)胞形態(tài)變化過(guò)程,MTT檢測(cè)各時(shí)相點(diǎn)的細(xì)胞活性;誘導(dǎo)后第6天和第8天行掃描電子顯微鏡檢測(cè);誘導(dǎo)后第8天行免疫細(xì)胞化學(xué)染色,檢測(cè)成纖維細(xì)胞主要標(biāo)志物波形蛋白（vimentin）的表達(dá)。結(jié)果原代ADSCs呈長(zhǎng)梭形貼壁生長(zhǎng),成骨誘導(dǎo)后可見(jiàn)ALP強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),茜素紅染色可見(jiàn)紅色礦化結(jié)節(jié);成脂誘導(dǎo)后可見(jiàn)胞內(nèi)紅染脂滴聚集;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示,間充質(zhì)干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志物CD90陽(yáng)性表達(dá),造血干細(xì)胞標(biāo)記物CD45呈陰性表達(dá); ADSCs向成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)后第2天可見(jiàn)形態(tài)開(kāi)始改變,部分細(xì)胞漂浮;誘導(dǎo)后第4天細(xì)胞呈水滴形或短... 

【文章來(lái)源】：解剖學(xué)報(bào). 2020,51(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

原代脂肪源性干細(xì)胞標(biāo)尺示25μm

縱向比較顯示，誘導(dǎo)組和對(duì)照組吸光度均隨時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增大(P<0.05);橫向比較顯示，第2天誘導(dǎo)組吸光度明顯低于對(duì)照組(P<0.05);第4天、第6天、第8天誘導(dǎo)組與對(duì)照組吸光度差異均無(wú)顯著性(P>0.05，圖4)。5．掃描電子顯微鏡觀察誘導(dǎo)細(xì)胞形態(tài)

免疫細(xì)胞化學(xué)染色可見(jiàn)誘導(dǎo)分化8 d后絕大多數(shù)細(xì)胞vimentin呈陽(yáng)性表達(dá)，胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)棕黃色顆粒(圖6A);對(duì)照組ADSCs不表達(dá)vimentin(圖6B)。圖5 誘導(dǎo)后成纖維標(biāo)尺示0.5μm

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠脂肪源性干細(xì)胞與三維打印明膠支架的相容性[J]. 田曉紅,張彬,房艷,柏樹(shù)令,敖強(qiáng),佟浩.  解剖學(xué)報(bào). 2017(02)



本文編號(hào)：3419704