采用正交設計法對影響珍稀瀕危植物獨葉草SCoT-PCR反應體系的主要因素進行優(yōu)化,建立最佳的獨葉草SCoT-PCR反應體系,并利用36份種質(zhì)進行了驗證。結果表明:在獨葉草SCoT-PCR的最優(yōu)反應體系（25 μL）中:Mg²⁺為1.5 μL、dNTPs為1.50 μL、Taq酶為0.3 μL、Primer為1.2 μL、DNA為3.0 μL。建立的SCoT-PCR反應體系可用于該植物的遺傳多樣性和居群結構研究。 

【文章來源】：種子. 2020,39(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

部分樣品基因組DNA的電泳結果

獨葉草SCoT-PCR體系優(yōu)化的擴增結果

反應體系的穩(wěn)定性影響到后續(xù)實驗。因此,對優(yōu)化的體系進行驗證有其必要。實驗結果(圖4)表明:在優(yōu)化而得的體系中,36份獨葉草樣品均能擴增出數(shù)量不同、清晰適中、分散性好的條帶,而且條帶的多態(tài)性豐富。擴增條帶數(shù)大多為2～4條,片段大小大多介于750～2 000 bp之間。這表明,試驗所建立的獨葉草SCoT-PCR最佳反應體系的效果好、穩(wěn)定性高,可用于后續(xù)的種質(zhì)資源遺傳多樣性評價,親緣關系和遺傳結構等方面的研究。圖4 最佳反應體系的驗證

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]太白山獨葉草的小尺度分布成因及其克隆結構、遺傳多樣性研究[D]. 張晨光.西北大學 2018

碩士論文
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[3]瀕危植物獨葉草（毛茛科）的傳粉生物學及繁育系統(tǒng)研究[D]. 賀海霞.陜西師范大學 2006
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本文編號：3406454