細(xì)菌纖維素（Bacterial Cellulose,簡稱BC）是某些細(xì)菌合成的胞外多糖,由葡萄糖單體分子以β-1,4-糖苷鍵聚合而成的高分子生物聚合物。與植物纖維相比,BC不含木質(zhì)素、果膠及半纖維素等雜質(zhì);除了具有優(yōu)良的生物相容性和生物可降解性外;還具有納米網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),高純度、高抗張強(qiáng)度以及高持水性等獨(dú)特性質(zhì)�；谶@些獨(dú)特的性質(zhì),BC已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、造紙、化妝品、環(huán)境污染治理以及食品制造等領(lǐng)域。目前,國內(nèi)對(duì)BC的研究仍處于初級(jí)階段,主要技術(shù)障礙是菌種種類和數(shù)量較少,發(fā)酵產(chǎn)量低和成本花費(fèi)高,纖維素材料官能團(tuán)單一而導(dǎo)致改性困難等問題。本研究成功的從腐敗葡萄中獲得一種具有合成BC能力的菌群HJ2-2。通過16S rRNA基因組高通量測序,結(jié)果表明HJ2-2主要包括Komagataeibacter、Lactobacillus及Acetobacter等菌屬,所占比例分別為60.93%,25.65%和12.16%。從該菌群中進(jìn)一步分離鑒定出三株單克隆菌,分別是Komagataeibacter xylinus XJL-06-4、Lactobacill us plantarum XJL-2和Ace... 

【文章來源】：長春理工大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)菌纖維素的分子結(jié)構(gòu)

第2章細(xì)菌纖維素合成菌的篩選與鑒定242.4結(jié)果與討論2.4.1產(chǎn)細(xì)菌纖維素菌群HJ2-2的種屬鑒定從葡萄中我們通過多輪富集篩選到能產(chǎn)生凝膠膜的菌群，將其命名為HJ2-2。為了分析菌群HJ2-2的種屬組成，我們通過高通量測序技術(shù)對(duì)菌群HJ2-2進(jìn)行了16SrRNA的鑒定。鑒定結(jié)果如圖2.2所示，菌群HJ2-2中主要包含Komagataeibacter（駒形桿菌屬），Lactobacillus（乳桿菌屬）和Acetobacter（醋酸桿菌屬），所占比例分別為60.93%，25.65%及12.16%；其中占主要地位的Komagataeibacter菌屬是目前已知的最廣泛的BC合成菌株，也與我們篩選出的單克隆菌株XJL-06-4的菌屬鑒定結(jié)果相符。圖2.2菌群HJ2-2中的種屬分布2.4.2產(chǎn)細(xì)菌纖維素菌群HJ2-2的分離和鑒定為了分析HJ2-2合成BC的原因，我們將HJ2-2通過若干輪分離純化獲得三株形態(tài)不同的菌株，分別命名為XJL-06-4、XJL-2和D3，并對(duì)三株菌進(jìn)行了菌屬鑒定1)三株菌株的16SrDNA擴(kuò)增通過細(xì)菌基因組提取試劑盒分別對(duì)該三株菌進(jìn)行基因組DNA提取，經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)它們均在15,000bp大小左右出現(xiàn)明亮、單一的電泳條帶且無DNA降解現(xiàn)象產(chǎn)生。所以，提取的目的基因組大小與細(xì)菌基因組DNA大小基本一致，因此可以將提取的目的基因用來進(jìn)行PCR擴(kuò)增及下一步的研究。利用PCR儀分別以其基因組為模板擴(kuò)增其16SrDNA序列,凝膠電泳檢測結(jié)果如

第2章細(xì)菌纖維素合成菌的篩選與鑒定25圖2.3，得到一條單一且明亮的長度約為1,500bp左右的條帶，與預(yù)期的16SrDNA大小基本相符。因此，實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定為16SrDNA擴(kuò)增序列產(chǎn)物，提純后送至公司測序。a)b)c)圖2.3DNA凝膠電泳圖a)菌株XJL-06-4的基因組電泳圖b)菌株XJL-06-4的PCR電泳圖c)菌株XJL-2和D3的基因組和PCR電泳圖2)菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的測序結(jié)果采用通用引物進(jìn)行16SrRNA測序，方式為雙端測通，序列由吉林庫美生物科技公司完成測序并拼接，菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的序列結(jié)果如下所示：>XJL-06-4TGCAGTCGCACGAACCTTTCGGGGTTAGTGGCGGACGGGTGAGTAACGCGTAGGGATCTGTCCATGGGTGGGGGATAACTTTGGGAAACTGAAGCTAATACCGCATGACACCTGAGGGTCAAAGGCGCAAGTCGCCTGTGGAGGAACCTGCGTTCGATTAGCTAGTTGGTGGGGTAAAGGCCTACCAAGGCGATGATCGATAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAAGCACTTTCAGCGGGGACGATGATGACGGTACCCGCAGAAGAAGCCCCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCAAGCGTTGCTCGGAATGACTGGGCGTAAAGGGCGCGTAGGCGGTTTTAACAGTCAGATGTGAAATTCCTGGGCTTAACCTGGGGGCTGCATTTGATACGTTGAGACTAGAGTGTGAGAGAGGGTTGTGGAATTCCCAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTGGGAAGAACACCGGTGGCGAAGGCGGCAACCTGGCTCATTACTGACG

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)菌纖維素纖維對(duì)紙張性能的影響[J]. 修慧娟,王志杰,李金寶.  中國造紙. 2005(03)
[2]生物有機(jī)納米材料——細(xì)菌纖維素[J]. 馬承鑄.  精細(xì)與專用化學(xué)品. 2001(18)
[3]細(xì)菌纖維素的生物合成及其應(yīng)用[J]. 賈士儒,歐竑宇.  化工科技市場. 2001(02)

博士論文
[1]細(xì)菌纖維素纖維復(fù)合材料的制備及其應(yīng)用研究[D]. 李國輝.江南大學(xué) 2017

碩士論文
[1]細(xì)菌纖維素產(chǎn)生菌分離篩選及其磷酸化改性研究[D]. 程正麗.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3405039