細菌纖維素合成菌的篩
發(fā)布時間：2021-09-23 04:28
細菌纖維素（Bacterial Cellulose,簡稱BC）是某些細菌合成的胞外多糖,由葡萄糖單體分子以β-1,4-糖苷鍵聚合而成的高分子生物聚合物。與植物纖維相比,BC不含木質素、果膠及半纖維素等雜質;除了具有優(yōu)良的生物相容性和生物可降解性外;還具有納米網(wǎng)狀結構,高純度、高抗張強度以及高持水性等獨特性質。基于這些獨特的性質,BC已廣泛應用于生物醫(yī)學、造紙、化妝品、環(huán)境污染治理以及食品制造等領域。目前,國內對BC的研究仍處于初級階段,主要技術障礙是菌種種類和數(shù)量較少,發(fā)酵產量低和成本花費高,纖維素材料官能團單一而導致改性困難等問題。本研究成功的從腐敗葡萄中獲得一種具有合成BC能力的菌群HJ2-2。通過16S rRNA基因組高通量測序,結果表明HJ2-2主要包括Komagataeibacter、Lactobacillus及Acetobacter等菌屬,所占比例分別為60.93%,25.65%和12.16%。從該菌群中進一步分離鑒定出三株單克隆菌,分別是Komagataeibacter xylinus XJL-06-4、Lactobacill us plantarum XJL-2和Ace...
【文章來源】：長春理工大學吉林省
【文章頁數(shù)】：80 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
細菌纖維素的分子結構
第2章細菌纖維素合成菌的篩選與鑒定242.4結果與討論2.4.1產細菌纖維素菌群HJ2-2的種屬鑒定從葡萄中我們通過多輪富集篩選到能產生凝膠膜的菌群，將其命名為HJ2-2。為了分析菌群HJ2-2的種屬組成，我們通過高通量測序技術對菌群HJ2-2進行了16SrRNA的鑒定。鑒定結果如圖2.2所示，菌群HJ2-2中主要包含Komagataeibacter（駒形桿菌屬），Lactobacillus（乳桿菌屬）和Acetobacter（醋酸桿菌屬），所占比例分別為60.93%，25.65%及12.16%；其中占主要地位的Komagataeibacter菌屬是目前已知的最廣泛的BC合成菌株，也與我們篩選出的單克隆菌株XJL-06-4的菌屬鑒定結果相符。圖2.2菌群HJ2-2中的種屬分布2.4.2產細菌纖維素菌群HJ2-2的分離和鑒定為了分析HJ2-2合成BC的原因，我們將HJ2-2通過若干輪分離純化獲得三株形態(tài)不同的菌株，分別命名為XJL-06-4、XJL-2和D3，并對三株菌進行了菌屬鑒定1)三株菌株的16SrDNA擴增通過細菌基因組提取試劑盒分別對該三株菌進行基因組DNA提取，經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳驗證，發(fā)現(xiàn)它們均在15,000bp大小左右出現(xiàn)明亮、單一的電泳條帶且無DNA降解現(xiàn)象產生。所以，提取的目的基因組大小與細菌基因組DNA大小基本一致，因此可以將提取的目的基因用來進行PCR擴增及下一步的研究。利用PCR儀分別以其基因組為模板擴增其16SrDNA序列,凝膠電泳檢測結果如
第2章細菌纖維素合成菌的篩選與鑒定25圖2.3，得到一條單一且明亮的長度約為1,500bp左右的條帶，與預期的16SrDNA大小基本相符。因此，實驗結果確定為16SrDNA擴增序列產物，提純后送至公司測序。a)b)c)圖2.3DNA凝膠電泳圖a)菌株XJL-06-4的基因組電泳圖b)菌株XJL-06-4的PCR電泳圖c)菌株XJL-2和D3的基因組和PCR電泳圖2)菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的測序結果采用通用引物進行16SrRNA測序，方式為雙端測通，序列由吉林庫美生物科技公司完成測序并拼接，菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的序列結果如下所示：>XJL-06-4TGCAGTCGCACGAACCTTTCGGGGTTAGTGGCGGACGGGTGAGTAACGCGTAGGGATCTGTCCATGGGTGGGGGATAACTTTGGGAAACTGAAGCTAATACCGCATGACACCTGAGGGTCAAAGGCGCAAGTCGCCTGTGGAGGAACCTGCGTTCGATTAGCTAGTTGGTGGGGTAAAGGCCTACCAAGGCGATGATCGATAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAAGCACTTTCAGCGGGGACGATGATGACGGTACCCGCAGAAGAAGCCCCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCAAGCGTTGCTCGGAATGACTGGGCGTAAAGGGCGCGTAGGCGGTTTTAACAGTCAGATGTGAAATTCCTGGGCTTAACCTGGGGGCTGCATTTGATACGTTGAGACTAGAGTGTGAGAGAGGGTTGTGGAATTCCCAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTGGGAAGAACACCGGTGGCGAAGGCGGCAACCTGGCTCATTACTGACG
【參考文獻】：
期刊論文
[1]細菌纖維素纖維對紙張性能的影響[J]. 修慧娟,王志杰,李金寶. 中國造紙. 2005(03)
[2]生物有機納米材料——細菌纖維素[J]. 馬承鑄. 精細與專用化學品. 2001(18)
[3]細菌纖維素的生物合成及其應用[J]. 賈士儒,歐竑宇. 化工科技市場. 2001(02)
博士論文
[1]細菌纖維素纖維復合材料的制備及其應用研究[D]. 李國輝.江南大學 2017
碩士論文
[1]細菌纖維素產生菌分離篩選及其磷酸化改性研究[D]. 程正麗.西北農林科技大學 2015
本文編號：3405039
【文章來源】：長春理工大學吉林省
【文章頁數(shù)】：80 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
細菌纖維素的分子結構
第2章細菌纖維素合成菌的篩選與鑒定242.4結果與討論2.4.1產細菌纖維素菌群HJ2-2的種屬鑒定從葡萄中我們通過多輪富集篩選到能產生凝膠膜的菌群，將其命名為HJ2-2。為了分析菌群HJ2-2的種屬組成，我們通過高通量測序技術對菌群HJ2-2進行了16SrRNA的鑒定。鑒定結果如圖2.2所示，菌群HJ2-2中主要包含Komagataeibacter（駒形桿菌屬），Lactobacillus（乳桿菌屬）和Acetobacter（醋酸桿菌屬），所占比例分別為60.93%，25.65%及12.16%；其中占主要地位的Komagataeibacter菌屬是目前已知的最廣泛的BC合成菌株，也與我們篩選出的單克隆菌株XJL-06-4的菌屬鑒定結果相符。圖2.2菌群HJ2-2中的種屬分布2.4.2產細菌纖維素菌群HJ2-2的分離和鑒定為了分析HJ2-2合成BC的原因，我們將HJ2-2通過若干輪分離純化獲得三株形態(tài)不同的菌株，分別命名為XJL-06-4、XJL-2和D3，并對三株菌進行了菌屬鑒定1)三株菌株的16SrDNA擴增通過細菌基因組提取試劑盒分別對該三株菌進行基因組DNA提取，經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳驗證，發(fā)現(xiàn)它們均在15,000bp大小左右出現(xiàn)明亮、單一的電泳條帶且無DNA降解現(xiàn)象產生。所以，提取的目的基因組大小與細菌基因組DNA大小基本一致，因此可以將提取的目的基因用來進行PCR擴增及下一步的研究。利用PCR儀分別以其基因組為模板擴增其16SrDNA序列,凝膠電泳檢測結果如
第2章細菌纖維素合成菌的篩選與鑒定25圖2.3，得到一條單一且明亮的長度約為1,500bp左右的條帶，與預期的16SrDNA大小基本相符。因此，實驗結果確定為16SrDNA擴增序列產物，提純后送至公司測序。a)b)c)圖2.3DNA凝膠電泳圖a)菌株XJL-06-4的基因組電泳圖b)菌株XJL-06-4的PCR電泳圖c)菌株XJL-2和D3的基因組和PCR電泳圖2)菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的測序結果采用通用引物進行16SrRNA測序，方式為雙端測通，序列由吉林庫美生物科技公司完成測序并拼接，菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的序列結果如下所示：>XJL-06-4TGCAGTCGCACGAACCTTTCGGGGTTAGTGGCGGACGGGTGAGTAACGCGTAGGGATCTGTCCATGGGTGGGGGATAACTTTGGGAAACTGAAGCTAATACCGCATGACACCTGAGGGTCAAAGGCGCAAGTCGCCTGTGGAGGAACCTGCGTTCGATTAGCTAGTTGGTGGGGTAAAGGCCTACCAAGGCGATGATCGATAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAAGCACTTTCAGCGGGGACGATGATGACGGTACCCGCAGAAGAAGCCCCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCAAGCGTTGCTCGGAATGACTGGGCGTAAAGGGCGCGTAGGCGGTTTTAACAGTCAGATGTGAAATTCCTGGGCTTAACCTGGGGGCTGCATTTGATACGTTGAGACTAGAGTGTGAGAGAGGGTTGTGGAATTCCCAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTGGGAAGAACACCGGTGGCGAAGGCGGCAACCTGGCTCATTACTGACG
【參考文獻】：
期刊論文
[1]細菌纖維素纖維對紙張性能的影響[J]. 修慧娟,王志杰,李金寶. 中國造紙. 2005(03)
[2]生物有機納米材料——細菌纖維素[J]. 馬承鑄. 精細與專用化學品. 2001(18)
[3]細菌纖維素的生物合成及其應用[J]. 賈士儒,歐竑宇. 化工科技市場. 2001(02)
博士論文
[1]細菌纖維素纖維復合材料的制備及其應用研究[D]. 李國輝.江南大學 2017
碩士論文
[1]細菌纖維素產生菌分離篩選及其磷酸化改性研究[D]. 程正麗.西北農林科技大學 2015
本文編號：3405039
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