目的:探討B(tài)ICC1在骨髓基質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞分化過程中的作用。方法:構(gòu)建Bicc1過表達(dá)質(zhì)粒Bicc1-pcDNA3.1,以pcDNA3.1為對(duì)照,分別轉(zhuǎn)染小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞ST2。對(duì)兩組細(xì)胞進(jìn)行成脂和成骨誘導(dǎo),在成骨誘導(dǎo)14 d時(shí)堿性磷酸酶染色檢測(cè)成骨分化情況,在成脂誘導(dǎo)5 d時(shí)利用油紅O染色檢測(cè)脂滴形成情況;采用q RT-PCR及Western blot技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞Bicc1過表達(dá)對(duì)成骨及成脂相關(guān)因子的影響。結(jié)果:酶切及測(cè)序結(jié)果顯示Bicc1過表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建成功,將其轉(zhuǎn)染到ST2細(xì)胞后,Bicc1 mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組升高15.23倍（P<0.05）。成骨誘導(dǎo)條件下,Bicc1過表達(dá)組ST2細(xì)胞堿性磷酸酶染色增強(qiáng),成骨相關(guān)因子Osterix、堿性磷酸酶、Osteopontin、Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runx2）和骨鈣素的m RNA和/或蛋白表達(dá)水平顯著上升（均P<0.05）。成脂誘導(dǎo)條件下,Bicc1過表達(dá)組ST2細(xì)胞中脂滴形成減少,油紅OD₅₂₀較對(duì)照組明顯降低（P<0.01）,成脂相關(guān)因子過氧化物酶體增殖物活化受體γ（PPAR... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,26(03)

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BICC1抑制ST2細(xì)胞成脂分化

2.2 Bicc1-pcDNA3.1在ST2細(xì)胞過表達(dá)轉(zhuǎn)染Bicc1-pcDNA3.1后，ST2細(xì)胞中Bicc1 mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組升高15.23倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（n=3,P<0.05），見圖2。

轉(zhuǎn)染Bicc1過表達(dá)質(zhì)粒后，ST2細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化增強(qiáng)，表現(xiàn)為實(shí)驗(yàn)組成骨細(xì)胞堿性磷酸酶染色較對(duì)照組增強(qiáng)（圖3A）。對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行半定量分析，結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組（0.504±0.006）的平均光密度值較對(duì)照組（0.368±0.003）明顯升高（圖3B）；成骨特異性基因oste rix(Osx）、ALP、骨橋蛋白（OPN）和骨鈣素（Oc）的mRNA表達(dá)上調(diào)，分別為對(duì)照組的2.93、4.19、2.55和3.02倍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（n=3,P<0.05）（圖3C）。ALP、OPN和Runx2的蛋白表達(dá)上調(diào)（圖3D）。2.4 BICC1抑制ST2細(xì)胞成脂分化


本文編號(hào)：3375346