低氧暴露對骨骼肌蛋白質合成/分解的影響受到廣泛關注,但該過程中相關調控通路的研究仍十分有限。本研究擬通過蛋白質相對積累量來研究合成和分解通路的變化。將骨骼肌細胞置于低氧環(huán)境中培養(yǎng),分別在0 h、6 h、12 h和24 h收集細胞,并進行檢測。免疫熒光觀察肌球蛋白（myosin）,翻譯表面感應檢測蛋白質合成,Western印跡法測試蛋白質合成相關基因（ERK1/2、p-ERK1/2、mTOR、p-mTOR、4E-BP1、p-4E-BP1）、蛋白質分解相關基因（泛素、FoxO1、p-FoxO1、MuRF1和Atrogin-1）表達量。結果發(fā)現,隨著低氧干預時間延長,肌纖維直徑和骨骼肌細胞中蛋白質相對積累量隨時間逐漸減�。≒<0.01）。與0 h相比,6 h p-4E-BP1/4E-BP1和Atrogin-1的表達顯著上調（P<0.05）,p-mTOR表達顯著高于0 h （P<0.01）;6 h和24 h p-mTOR/mTOR的比值顯著大于0 h（P<0.05）,而p-FoxO1/FoxO1的比值隨時間逐漸減�。≒<0.01）。上述結果表明,低氧干預能夠使骨骼... 

【文章來源】：中國生物化學與分子生物學報. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章頁數】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞培養(yǎng)與分化
    1.2 低氧干預
    1.3 免疫熒光染色肌球蛋白計算肌管直徑
    1.4 Western免疫印跡法
        1.4.1 蛋白質提取、濃度測定及制樣
        1.4.2 Western印跡測定蛋白質相對表達量
    1.5 翻譯表面感應檢測蛋白質合成
    1.6 檢測蛋白質泛素標記檢測蛋白質的分解
    1.7 統計學方法
2 結果
    2.1 L6成肌細胞分化為肌管細胞
    2.2 低氧干預使骨骼肌細胞直徑減小
    2.3 低氧干預使骨骼肌細胞蛋白質合成下降
    2.4 骨骼肌細胞合成相關蛋白質表達
    2.5 低氧干預使骨骼肌細胞蛋白質分解下降
    2.6 低氧干預使骨骼肌細胞蛋白質積累量下降
    2.7 與蛋白質分解相關的蛋白質表達下降
3 討論
    3.1 低氧干預對骨骼肌形態(tài)的影響
    3.2 低氧干預對骨骼肌細胞蛋白質合成的影響
    3.3 低氧干預對骨骼肌細胞蛋白質分解的影響


【參考文獻】：
期刊論文
[1]低氧暴露所致大鼠骨骼肌萎縮的蛋白轉化調節(jié)機制[J]. 付鵬宇,胡揚,李燕春,于加倍,朱镕鑫,賈杰,龔麗景.  中國實驗動物學報. 2019(04)
[2]低氧暴露誘導肌萎縮發(fā)生的機制探討[J]. 付鵬宇,胡揚,龔麗景.  生理科學進展. 2019(03)
[3]抗阻訓練通過Akt-FoxO1通路抑制低氧誘導的骨骼肌萎縮[J]. 于加倍,胡揚,李燕春,梅濤,韓天雨,白學成,付鵬宇,朱镕鑫,車欣媛.  中國生物化學與分子生物學報. 2018(10)
[4]AKT/FOXO在一次低氧致骨骼肌蛋白質代謝變化中的作用[J]. 李俊平,葉鳴,張全成,王瑞元.  山東體育學院學報. 2017(02)
[5]運動骨骼肌ERK1/2與mTOR通路關系的研究[J]. 王孝強,李荀,曾凡星.  沈陽體育學院學報. 2016(05)
[6]肌肉萎縮與氧化應激[J]. 李梅,侯敢,黃迪南,司秀文.  中國生物化學與分子生物學報. 2009(05)
[7]運動對骨骼肌肌動蛋白的影響研究評述[J]. 李興平,唐國勇.  吉首大學學報(自然科學版). 2007(06)
[8]mTOR的研究進展[J]. 潘智,張令強,蔣繼志,賀福初.  細胞生物學雜志. 2006(03)



本文編號：3361404