發(fā)布時(shí)間：2021-08-20 11:29

　　高分子量青霉素結(jié)合蛋白（Penicillin binding proteins,PBPs）是主要的肽聚糖合成酶,也是β-內(nèi)酰胺類抗生素的作用靶點(diǎn)。Escherichia coli中,PBP1a和PBP1b分別與外膜脂蛋白LpoA和LpoB形成肽聚糖合成酶復(fù)合體,共同參與肽聚糖的合成。兩個(gè)復(fù)合體之間功能冗余,同時(shí)缺失導(dǎo)致細(xì)胞死亡。Shewanella oneidensis是一種革蘭氏陰性菌,前期研究發(fā)現(xiàn)該菌也含有兩個(gè)肽聚糖合成酶復(fù)合體（PBP1a/LpoA和PBP1b/LpoB）,但二者之間具有不同的生理功能。其中,PBP1a/LpoA復(fù)合體缺失后細(xì)菌生長(zhǎng)變緩,并且對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗性增強(qiáng);而PBP1b/LpoB復(fù)合體缺失后無(wú)此影響�；诖�,本研究系統(tǒng)性比較了兩個(gè)復(fù)合體缺失后的表型差異,并對(duì)其內(nèi)在機(jī)制進(jìn)行深入研究,其結(jié)果如下:PBP1a/LpoA缺失的菌株表現(xiàn)出諸多生理缺陷,如細(xì)胞形態(tài)由桿狀變成球形、在不含NaCl的低滲培養(yǎng)基（NaCl-less）中無(wú)法生長(zhǎng)、對(duì)十二烷基磺酸鈉（SDS）敏感性增強(qiáng)等;而PBP1b/LpoB缺失的菌株無(wú)此表型缺陷。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),PBP1a/LpoA缺失的菌株... 

【文章來源】：浙江工業(yè)大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

肽聚糖的組成（Eganetal.,2017）

圖 1-2 肽聚糖的合成（Typas et al., 2011）Fig. 1-2 Synthesis of peptidoglycan注：括號(hào)中的數(shù)字是預(yù)測(cè)的 E. coli 中該類型酶的數(shù)量。Alr 表示 Ala 消旋酶；DadX 表示 Ala消旋酶；DdlA 表示D-Ala-D-Ala 連接酶；GlcNAc 表示 N-乙酰葡糖胺；meso-Dap 表示內(nèi)消旋-二氨基庚二酸；MraY 表示 UDP-MurNAc-pentapeptid 磷酸轉(zhuǎn)移酶；MurA 表示 UDP-GlcNAc烯醇丙酮酰轉(zhuǎn)移酶；MurB 表示 UDP-MurNAc 脫氫酶；MurC 表示 UDP-MurNAc-L-Ala 連接酶；MurD表示UDP-MurNAc-L-Ala-D-Glu 連接酶；MurE 表示 UDP-MurNAc-L-Ala-D-Glu-meso-Dap 連接酶；MurF 表示 UDP-MurNAc-tripeptide-D-alanyl-D-Ala 連接酶；MurG 表示 UDP-GlcNAc-undecapren-oyl-pyro-phosphoryl-MurNAc-pentapeptide 轉(zhuǎn)移酶; MurI 表示 Glu 消旋酶；PEP 表示磷酸烯醇式丙酮酸。盡管轉(zhuǎn)肽反應(yīng)通常被認(rèn)為是肽聚糖生物合成的最后一步，但事實(shí)上，肽聚糖的結(jié)構(gòu)經(jīng)歷了不斷的重塑。許多細(xì)菌每一代重塑一半的肽聚糖，如果釋放的肽聚糖碎片（muropeptides）沒有被回收和再循環(huán)，這個(gè)過程就會(huì)造成資源的大量損失（Park et al., 1995）。雖然肽聚糖碎片的回收不是生長(zhǎng)所必需的，但在細(xì)菌通訊

浙江工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文糖生長(zhǎng)與細(xì)胞整體生長(zhǎng)偶聯(lián)。在革蘭氏陰性菌中，PBPs錨定在細(xì)胞內(nèi)膜的外面，兩種主要的HWM PBPs—PBP1a和PBP1b分別需要各自的外膜脂蛋白LpoALpoB激活從而增強(qiáng)活性（圖1-3）。雖然LpoA和LpoB的同源性較低，但兩者通過N-末端錨定于細(xì)胞外膜上，這意味著LpoA和LpoB需要穿過肽聚糖層與Ps接觸；此外，脂蛋白Lpo的位置會(huì)影響它們的激活作用，若將LpoA和LpoB定于細(xì)胞內(nèi)膜上，LpoA不激活PBP1a，而LpoB仍然可以激活PBP1b，說明相于PBP1b，PBP1a更加依賴于脂蛋白LpoA。PBP1a/LpoA可能主要負(fù)責(zé)細(xì)胞延，而PBP1b/LpoB可能在細(xì)胞分裂中起更重要的作用（Bamzhaf et al., 2012;radis-Bleau et al., 2010; Young et al., 2010; Jean et al., 2014）。若PBP1a/LpoA和P1b/LpoB兩種肽聚糖合成酶復(fù)合體同時(shí)缺失，會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生致死作用。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]革蘭氏陰性菌中β-內(nèi)酰胺酶誘導(dǎo)表達(dá)調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 徐超奕,張婷,蔡靜曉,余志良,裘娟萍,音建華.  生物工程學(xué)報(bào). 2018(08)
[2]細(xì)菌青霉素結(jié)合蛋白[J]. 李冀,楊慧,呼延霆,葉琳潔,車速,李琦,黃慶生,尹大川.  生命的化學(xué). 2013(04)
[3]細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的研究進(jìn)展[J]. 王靜華,趙洪濤,汪以真.  中國(guó)獸藥雜志. 2004(01)



本文編號(hào)：3353420