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辣根過氧化物酶標記與樣品后染色聯(lián)用在微觀腦聯(lián)結(jié)組學(xué)中的應(yīng)用

發(fā)布時間:2021-08-08 13:13
  三維電子顯微成像(volume electron microscopy)是微觀尺度腦聯(lián)結(jié)組學(xué)(micro-brain connectomics)研究的主要研究手段.自動卷帶式連續(xù)超薄切片-收片系統(tǒng)(automated tape-collecting ultramicrotome,ATUM)及掃描電鏡序列成像系統(tǒng)的聯(lián)合應(yīng)用,是三維電鏡成像中一種重要的技術(shù)手段.該方法利用卷帶式收集超薄切片,形成完整的樣品切片庫,進而在后續(xù)成像中形成樣品三維電鏡成像數(shù)據(jù)庫.根據(jù)ATUM系統(tǒng)鏡外切片-收片、保留樣本切片庫等特點,對相應(yīng)的生物樣品制備方法進行改進,包括樹脂配方及樹脂滲透方式改良,神經(jīng)元細胞膜辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)稀疏化標記與樣本切片庫后染色聯(lián)用——從而很大程度上減少樣品切片的褶皺率,并使得在整體高襯度的樣品圖像庫中高效地識別神經(jīng)元身份成為可能,最終獲得符合腦聯(lián)結(jié)組學(xué)所需的高質(zhì)量成像數(shù)據(jù). 

【文章來源】:生物化學(xué)與生物物理進展. 2020,47(10)北大核心SCICSCD

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 動物與試劑
    1.2 樣品制備流程
2 結(jié)果
    2.1 樣品切片褶皺問題的解決
    2.2 辣根過氧化物酶標記及后染色方法聯(lián)用在ATUM系統(tǒng)下的應(yīng)用
    2.3 基于本樣品制備方法完成的神經(jīng)元超微三維重構(gòu)
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本文編號:3330022

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