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菊花CmTPS1like基因的克隆及表達特性

發(fā)布時間:2021-08-08 03:07
  [目的]本文旨在克隆菊花β-石竹烯合成酶同源基因(CmTPS1like)并探討其參與蚜蟲取食和茉莉酸甲酯(MeJA)處理應答表達的機制。[方法]以菊花‘神馬’為試驗材料,采用高保真PCR及染色體位移法分別克隆CmTPS1like基因全長及上游啟動子序列,并采用RT-qPCR分析CmTPS1like基因的組織特異性表達以及響應蚜蟲取食和MeJA處理的表達模式。[結果]CmTPS1like基因開放閱讀框(ORF)共有1 644個堿基,編碼548個氨基酸,且與菊科植物野菊同源性最高(95.26%)。CmTPS1like基因上游啟動子區(qū)包括2個MeJA響應元件、5個MYC結合元件、2個MYB結合元件、5個光響應元件等。CmTPS1like基因在莖中表達量最高,葉和根中表達量次之,花中表達量最低。蚜蟲取食12和24 h后,菊花葉片中CmTPS1like基因的表達水平上調。隨著MeJA處理時間的增加(3~24 h),CmTPS1like基因被持續(xù)誘導表達。[結論]CmTPS1like基因在菊花‘神馬’莖中表達量最高,其表達受蚜蟲取食和MeJA處理的影響。 

【文章來源】:南京農業(yè)大學學報. 2020,43(01)北大核心CSCD

【文章頁數】:7 頁

【部分圖文】:

菊花CmTPS1like基因的克隆及表達特性


CmTPS1like在菊花‘神馬’不同組織中的表達量

菊花CmTPS1like基因的克隆及表達特性


MeJA處理下CmTPS1like的表達量

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圖2 不同物種TPS1氨基酸序列同源性比對表3 CmTPS1like啟動子序列元件分析Table 3 The predicted cis-elements in the promoter region of CmTPS1like 元件名稱Element name 序列Sequence 距起始密碼子位置Position from ATG 功能Function CGTCA-motif CGTCA 147 bp(+) 茉莉酸甲酯響應元件MeJA responsive element TGACG-motif TGACG 147 bp(-) 茉莉酸甲酯響應元件 MeJA responsive element MYC CATTTG 23 bp(+) 結合元件 Bonding element MYC CATTTG 1 021 bp(+) 結合元件 Bonding element MYC CATTTG 487 bp(-) 結合元件 Bonding element MYC CATTTG 824 bp(-) 結合元件 Bonding element MYC CATTTG 1 038 bp(-) 結合元件 Bonding element MYB TAACCA 371 bp(+) 結合元件 Bonding element MYB CAACTG 630 bp(-) 結合元件 Bonding element ERE ATTTCATA 229 bp(-) 誘導響應元件 Inducible responsive element AE-box AGAAACTT 814 bp(+) 光響應元件Light responsive element Box 4 ATTAAT 985 bp(-) 光響應元件Light responsive element CAG-motif GAAAGGCAGAC 577 bp(+) 光響應元件Light responsive element

【參考文獻】:
博士論文
[1]菊花及近緣種屬植物揮發(fā)性次生代謝物的鑒定及合成機制初步研究[D]. 孫海楠.南京農業(yè)大學 2015



本文編號:3329092

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