基因組DNA的提取是最基本的分子生物學實驗技術,介紹了一種適用于綠僵菌克隆篩選的DNA批量快速提取方法.研究結果表明:使用改良的察氏瓊脂培養(yǎng)基（CDA）代替常用的土豆葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)綠僵菌,以鋼珠振打破碎菌絲,配以簡化的酚氯仿抽提操作,可以高效地提取高質量的真菌基因組DNA.本方法中,CDA菌落生長需2～3 d,雙樣品提取耗時約15 min,每個菌落可獲得DNA數百納克,片段長度在10 kb左右,電泳條帶清晰可見. 

【文章來源】：信陽師范學院學報(自然科學版). 2020,33(01)北大核心

【文章頁數】：7 頁

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 試劑
    1.3 實驗儀器
    1.4 真菌菌絲破壁方法
        1.4.1 手動研磨法
        1.4.2 機械珠磨法
    1.5 DNA純化方法
        1.5.1 未純化對照
        1.5.2 簡易純化法
        1.5.3 完整純化法
    1.6 DNA提取質量檢驗
        1.6.1 分光光度檢測
        1.6.2 凝膠電泳檢測
    1.7 PCR擴增驗證
2 結果與分析
    2.1 機械珠磨法破壁效果的考察
    2.2 機械珠磨法適用真菌及培養(yǎng)基的考察
    2.3 簡化基因組DNA純化步驟的效果驗證
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]植物根底害蟲治理控制模型研究[J]. 王鐵英,左萍,蔡瑾.  信陽師范學院學報(自然科學版). 2018(04)
[2]一種快速高效提取病原真菌DNA作為PCR模板的方法[J]. 陳吉良,黃小龍,吳安迪,周雙清,黃東益,劉進平.  菌物學報. 2011(01)
[3]一種經濟快速提取絲狀真菌基因組DNA的方法[J]. 陳鋒菊,李百元,楊冰,張葉純.  生命科學研究. 2010(02)
[4]一種快速簡便的植物病原真菌基因組DNA提取方法[J]. 劉少華,陸金萍,朱瑞良,戴富明.  植物病理學報. 2005(04)



本文編號：3185692