目的檢測IL-17A對MC3T3-E1細(xì)胞中明膠酶表達(dá)的影響,并探討其作用機(jī)制。方法采用小鼠重組細(xì)胞因子IL-17A作用于MC3T3-E1細(xì)胞,通過Real-time PCR和ELISA分別檢測MMP-2及MMP-9在mRNA水平及蛋白水平上的表達(dá)情況;通過免疫熒光和Western Blot檢測NF-κB的磷酸化水平的變化,并通過使用NF-κB阻斷劑檢測其在MMP-9表達(dá)中的影響。結(jié)果 IL-17A在mRNA水平及蛋白水平上均上調(diào)MMP-9的表達(dá)（P <0. 01）,然而對MMP-2的表達(dá)無明顯影響; IL-17A促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的磷酸化水平（P <0. 01）;阻斷NFκB的活性可減弱IL-17A對MMP-9的上調(diào)作用（P <0. 05）; IL-17A對MC3T3-E1細(xì)胞中TIMP-1及TIMP-2的表達(dá)沒有影響。結(jié)論 IL-17A可以通過激活NF-κB促進(jìn)MC3T3-E1細(xì)胞分泌MMP-9。 

【文章來源】：濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2020,43(03)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 MC3T3-E1細(xì)胞毒性檢測
        1.2.3 Real-time PCR檢測MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的mRNA表達(dá)
        1.2.4 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測MMP-2和MMP-9的蛋白表達(dá)
        1.2.5 細(xì)胞免疫熒光檢測NF-κB入核情況
        1.2.6 Western Blot檢測NF-κB磷酸化
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 IL-17A對MC3T3-E1細(xì)胞毒性的影響
    2.2 IL-17A上調(diào)MC3T3-E1細(xì)胞中MMP-9的表達(dá)
    2.3 IL-17A激活MC3T3-E1細(xì)胞NF-κB的活性
    2.4 阻斷NF-κB的活性減弱IL-17A誘導(dǎo)的MMP-9的表達(dá)
    2.5 IL-17A對MC3T3-E1細(xì)胞中TIMP-1和TIMP-2的mRNA表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3172201