目的:骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）是一類具有自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,在維持正常造血與骨生成中發(fā)揮重要的作用,其分化潛能的改變通常會引起疾病的發(fā)生。本實驗主要探討基質(zhì)重塑相關(guān)基因7（Mxra7）調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞分化的機制。方法:（1）使用MicroCT對野生型（WT）和Mxra7敲除（Mxra7-/-）小鼠（8周和9個月大,雄性）的股骨進行掃描分析和三維重建。（2）取WT和Mxra7-/-小鼠的股骨進行石蠟包埋、切片和HE染色,比較生長板和干骺端松質(zhì)骨骨小梁的變化。（3）對WT和Mxra7-/-r小鼠股骨石蠟切片進行TRAP染色比較破骨細胞的變化。（4）將WT和Mxra7-/-小鼠股骨包埋進行冰凍切片,免疫熒光對成骨細胞特異性標志（Osteocalcin）進行染色,觀察成骨細胞的變化。（5）BMSCs是成骨細胞的祖細胞,在骨形成的調(diào)控方面發(fā)揮重要作用,我們體外分離并培養(yǎng)WT和Mxra7-/-小鼠的BMSCs來進一步研究MXRA7在骨形成中的作用機制。（6）體外誘導(dǎo)WT小鼠來源的BMSCs向成骨細胞或脂肪細胞分化,同時檢測Mxra 7信使RNA（mRNA）和蛋白... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：?ＷＴ和Ｍｘｒａ７－Ａ小鼠（雄性，８周）股骨ｍｉｃｒＣＴ分析結(jié)果??（Ａ?）?ＷＴ和Ｍｘｒｃ／７－－小鼠（８周，雄性）股骨干骺端Ｍｉｃｒｏ?ＣＴ掃描及三維重建圖；??＊＜

３結(jié)果?基質(zhì)重塑相關(guān)基因７調(diào)控骨髄間充質(zhì)干細胞向成骨細胞分化的機制研宄??Ａ?ＷＴ，?９?ｍｏｎｔｈｓ?ｇ??＿２〇１?ｔ，?…Ｉ?２０－，?３－｜?Ｈ—，?°＇１０ｌ??＿?ｉ．?｜ｃ?■??ｏ．ｏ－Ｕ?ＵＪＢＢＬ?０Ｕ—〇Ｕ?ｏｏｏ－Ｕ???／Ｗｘｒａ７－／－，?９?ｍｏｎｔｈｓ?２５?＾??２．０－?〇５｜?＇?１?口?ＷＴ．９?ｍｏｎｔｈｓ??Ｉ－??Ｉ１＇０＇?■?■??：：Ｌ１Ｍ?：：１ＵＭ??圖２：?ＷＴ和Ｍｔｙ／７－ｚ－小鼠（雄性，９月）股骨ｍｉｃｒＣＴ分析結(jié)果??（Ａ?）?ＷＴ和ＭｘｒａＶ－小鼠（９月，雄性）股骨干骺端Ｍｉｃｒｏ?ＣＴ掃描及三維重建圖；??（Ｂ?）?ＷＴ和Ｍｘｒａ７－－小鼠股骨長度及干骺端松質(zhì)骨的形態(tài)學(xué)參數(shù)分析。＊?Ｐ＜〇．〇５；??＊＊＊?Ｐ０．００１代表Ｍｘｒａ７－Ａ小鼠ｖｓ?ＷＴ小鼠；每組各六只，實驗重復(fù)三次。??Ａ?Ｂ??ｉ—ＨＬｊ?１００＊１?ｎｓ?０〇?■“?．?ｉ?＊?，??Ｉｒｉ?Ａ?ａＷＴ＇８ｗｅｅｋｓ?＇?＂ｌ＾ｒ?口?ＷＴ．９?＿ｈｓ??＂廣．■?？?Ｍ．?Ｍ?幽■敝ａ７Ｖ＇８ｗｅｅｋｓ?＂廣．麵－處?函■?Ｍｘｒａ７—９ｍｏｎｔｈｓ??｜?｜?４０．?｜?■?｜Ｍ．?ｌ??■ｆｆｉ，?■?ＵＫ．?■??ａ。！］?〇Ｕ——〇〇ＪＪ——ｏｉｌ——Ｌｒ＾Ｂ－??圖３：?ＷＴ和Ｍｃｒａ７－Ａ小鼠（雄性，８周或９月）股骨皮質(zhì)骨的分析結(jié)果??（Ａ）?ＷＴ和Ｍｘｒａ７－７－小鼠（８周，雄性）皮質(zhì)骨的形態(tài)學(xué)參數(shù)分析；（Ｂ?）?ＷＴ和??Ｍｍ７７－Ａ小鼠（９月，雄性）皮質(zhì)骨的形態(tài)學(xué)參數(shù)分析。＊?Ｐ＜０．０５代表Ｍｍ７７－Ａ小鼠??

＊＊＊?Ｐ０．００１代表Ｍｘｒａ７－Ａ小鼠ｖｓ?ＷＴ小鼠；每組各六只，實驗重復(fù)三次。??Ａ?Ｂ??ｉ—ＨＬｊ?１００＊１?ｎｓ?０〇?■“?．?ｉ?＊?，??Ｉｒｉ?Ａ?ａＷＴ＇８ｗｅｅｋｓ?＇?＂ｌ＾ｒ?口?ＷＴ．９?＿ｈｓ??＂廣．■?？?Ｍ．?Ｍ?幽■敝ａ７Ｖ＇８ｗｅｅｋｓ?＂廣．麵－處?函■?Ｍｘｒａ７—９ｍｏｎｔｈｓ??｜?｜?４０．?｜?■?｜Ｍ．?ｌ??■ｆｆｉ，?■?ＵＫ．?■??ａ。�。�?〇Ｕ——〇〇ＪＪ——ｏｉｌ——Ｌｒ＾Ｂ－??圖３：?ＷＴ和Ｍｃｒａ７－Ａ小鼠（雄性，８周或９月）股骨皮質(zhì)骨的分析結(jié)果??（Ａ）?ＷＴ和Ｍｘｒａ７－７－小鼠（８周，雄性）皮質(zhì)骨的形態(tài)學(xué)參數(shù)分析；（Ｂ?）?ＷＴ和??Ｍｍ７７－Ａ小鼠（９月，雄性）皮質(zhì)骨的形態(tài)學(xué)參數(shù)分析。＊?Ｐ＜０．０５代表Ｍｍ７７－Ａ小鼠??ｖｓＷＴ小鼠；每組各六只，實驗重復(fù)三次。??小鼠股骨石蠟切片ＨＥ染色顯示Ｍｘｍ７－小鼠股骨干骺端骨小梁數(shù)量減少（圖??４Ａ）。生長板軟骨內(nèi)骨化是長骨縱向生長的主要機制［４３］，我們分析股骨生長板的??厚度發(fā)現(xiàn)，Ｍｘｒａ７ｖ？小鼠與ＷＴ小鼠相比生長板厚度減少２３°／。（圖４?Ｂ、Ｃ），這一??結(jié)果也印證了?ＭｘｒａＴ＂７？小鼠股骨長度相比ＷＴ小鼠縮短。??１６??


本文編號：3140823