ERF （ethylene response factor）轉(zhuǎn)錄因子是植物最大的特異性轉(zhuǎn)錄因子基因家族之一,在植物抗逆及生長(zhǎng)發(fā)育方面起著重要作用。本研究從‘84K楊’（Populus abla×P.glandulosa）中克隆出ERF轉(zhuǎn)錄因子基因RAP2L15的全長(zhǎng)cDNA序列,對(duì)其編碼的氨基酸序列進(jìn)行了同源性比對(duì)分析,并利用生物信息學(xué)對(duì)RAP2L15蛋白進(jìn)行理化性質(zhì)分析及結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)。結(jié)果表明, RAP2L15編碼的蛋白質(zhì)序列含有155個(gè)氨基酸,屬于不穩(wěn)定的親水蛋白,與楊樹耐鹽脅迫基因ERF38具有相似結(jié)構(gòu)。同源性序列比對(duì)分析表明RAP2L15與擬南芥ERF轉(zhuǎn)錄因子基因AtERF016具有較高同源性,推測(cè)該基因可能與植物耐鹽脅迫功能有關(guān)。構(gòu)建RAP2L15-RNAi抑制表達(dá)載體并利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)葉盤轉(zhuǎn)化法進(jìn)行楊樹遺傳轉(zhuǎn)化,獲得轉(zhuǎn)基因楊樹株系5個(gè)。本研究為進(jìn)一步探索RAP2L15轉(zhuǎn)錄因子基因在楊樹生長(zhǎng)發(fā)育及抗鹽脅迫方面發(fā)揮的功能提供理論及材料基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：植物生理學(xué)報(bào). 2020,56(12)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：11 頁(yè)

【部分圖文】：

PCR鑒定結(jié)果

卡那霉素抗性株系繼代3代后,選擇40 d苗期的轉(zhuǎn)基因‘84K楊’和野生對(duì)照組‘84K楊’的第3～6片葉進(jìn)行DNA提取并進(jìn)行PCR擴(kuò)增。通過(guò)凝膠瓊脂糖電泳分析,對(duì)照組野生型‘84K楊’無(wú)目的條帶擴(kuò)增,RAP-2L15轉(zhuǎn)基因組在500 bp處條帶清晰,表明成功獲得ERF/RAP2L15-RNAi轉(zhuǎn)基因楊樹株系5個(gè)(圖12)。圖1 0 重組表達(dá)載體p ART27+p KANNIBAL-RAP2L15酶切電泳圖

0 重組表達(dá)載體p ART27+p KANNIBAL-RAP2L15酶切電泳圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Plant abiotic stress response and nutrient use efficiency[J]. Zhizhong Gong,Liming Xiong,Huazhong Shi,Shuhua Yang,Luis R.Herrera-Estrella,Guohua Xu,Dai-Yin Chao,Jingrui Li,Peng-Yun Wang,Feng Qin,Jigang Li,Yanglin Ding,Yiting Shi,Yu Wang,Yongqing Yang,Yan Guo,Jian-Kang Zhu.  Science China（Life Sciences）. 2020(05)
[2]擬南芥AtPAP1基因植物表達(dá)載體構(gòu)建及在煙草中遺傳轉(zhuǎn)化分析[J]. 劉軼,鄭唐春,代麗娟,劉彩霞,王慶娜,曲冠證.  植物生理學(xué)報(bào). 2017(07)
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