[目的]建立納塔葡糖酸醋桿菌遺傳操作系統(tǒng),為采用基因工程方法改造該類菌株,提高纖維素產(chǎn)量,提升纖維素品質(zhì)提供參考依據(jù)。[方法]通過優(yōu)化培養(yǎng)基確定菌株電轉(zhuǎn)化感受態(tài)制備條件,采用質(zhì)�；蛘呔�性化片段在不同電壓下進(jìn)行轉(zhuǎn)化,優(yōu)化最佳轉(zhuǎn)化條件。[結(jié)果]采用添加了1%纖維素酶的C2培養(yǎng)基進(jìn)行1次搖瓶轉(zhuǎn)接,可有效制備納塔葡糖酸醋桿菌電轉(zhuǎn)化感受態(tài);采用攜帶同源臂及Kan抗性基因的環(huán)狀質(zhì)�；蛘呔�性化片段均實(shí)現(xiàn)了對(duì)納塔葡糖酸醋桿菌葡萄糖脫氫酶基因（GDH）的同源雙交換基因敲除;GDH基因的敲除降低了工程菌株發(fā)酵產(chǎn)纖維素膜過程的葡萄糖酸產(chǎn)生,提高了細(xì)菌纖維素的最終產(chǎn)量及品質(zhì)。[結(jié)論]成功建立了納塔葡糖酸醋桿菌遺傳轉(zhuǎn)化方法和基因敲除方法。 

【文章來源】：安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(11)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)化子可能存在的基因型

HEC-004菌株在7#和C2培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線

pBAC03-GDHKⅡ質(zhì)粒圖譜

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同供氧方式對(duì)木醋桿菌培養(yǎng)中生物量的影響[J]. 向東,王錫彬,鐘春燕.  現(xiàn)代食品科技. 2011(08)
[2]木醋桿菌菌株的特性研究[J]. 牛成,吳周新,王錫彬,趙振東,馮玉紅.  海南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(01)
[3]有機(jī)酸在合成培養(yǎng)基中對(duì)木醋桿菌合成纖維素的影響[J]. 王志國(guó),韋燕來,韋茂山,王錫彬,向東.  食品科學(xué). 2008(05)

碩士論文
[1]水溶性多糖對(duì)生物合成細(xì)菌纖維素的影響[D]. 吳敏.海南大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3081649