D-氨基�；妇哂刑禺愋源呋釴-�；鵇-氨基酸�；哪芰�。來自Microbacterium natoriense TNJL143-2（M.natoriense TNJL143-2）的D-氨基酰化酶（AcyM）與已知的幾種D-氨基�；妇哂�24-27%的同源性。結(jié)構(gòu)對比分析結(jié)果顯示,幾種已知的D-氨基�；复呋钚灾行牡陌被釟埢贏cyM中也存在。為確定AcyM的活性中心,探討AcyM結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,在本研究中我們以M.natoriense TNJL143-2中編碼AcyM的基因在大腸桿菌JM109中表達的酶（AcyM-pUC19）為研究對象。通過定點突變對AcyM-pUC19的氨基酸序列中的部分保守組氨酸殘基以及第86位丙氨酸殘基進行替換,并分別對各種突變酶的活性進行研究。表達鑒定結(jié)果顯示各突變酶均為可溶性蛋白,活性鑒定結(jié)果顯示突變酶H61A的活性為AcyM-pUC19活性的6%。突變酶H61D,H63A,H63D則完全失去活性。突變酶H201A,H201D的活性與AcyM-pUC19的活性大致相同。突變酶H232A,H232D的活性分別為AcyM-pUC19活性的51%和49... 

【文章來源】：長春理工大學吉林省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

氨基酸手性結(jié)構(gòu)示意圖

1.2 D-氨基�；敢� N-�；�-DL-氨基酸為底物生產(chǎn) D-氨基酸的過程示意圖2 Schematic diagram of the process of producing D-amino acid by D-aminoacylase N-acyl-DL-amino acid as substrate這種方法亦存在明顯的缺陷，即不同來源的 D-氨基�；钢g具有差異，一種 D-氨基�；缚赡軣o法有效催化某一種或多種 N-酰基。該缺陷的補償方案主要分為兩種。一種是針對某種 D-氨基酸的生氨基�；覆⒁源私⒉粩嘭S富的 D-氨基�；纲Y源庫。另一種則技術(shù)改變某種 D-氨基�；傅牡孜锾禺愋�，使其可以被廣泛用于產(chǎn)。前者的優(yōu)勢在于針對性強，覆蓋的生產(chǎn)領(lǐng)域更廣，但缺點在于本較高。后者的優(yōu)勢在于研發(fā)成本較低，缺點在于對特定的某種率可能較低。

長春理工大學碩士學位論文143-2 的 D-氨基�；负蛠碜� A.xylosoxydans A-6 及 A.faecalis DA1 的 D氨基酸序列中發(fā)現(xiàn)了幾個保守的組氨酸殘基[35,39,40]。其中，我們發(fā)現(xiàn)高sp-X1-His-X2-His 中的組氨酰殘基的上游氨基酸序列具有顯著的相似性關(guān)于來自 A.xylosoxydans A-6 的 D-氨基酰化酶的研究中，研究結(jié)果顯示氨酸殘基與酶的活性密切相關(guān)，包括反應中的催化作用和酶蛋白本身的201 位組氨酸殘基和 232 位組氨酸殘基也分別出現(xiàn)在這幾種 D-氨基酰點上。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]α-L-鼠李糖苷酶以催化活性包涵體形式異源表達及其酶學性質(zhì)[J]. 李彬春,張?zhí)?吉亞茹,李艷琴,丁國斌.  食品科學. 2018(14)



本文編號：3031668