巨胞飲內(nèi)吞途徑介導(dǎo)蒲公英湯劑體進(jìn)入細(xì)胞
發(fā)布時間:2021-02-07 01:04
目的探究細(xì)胞攝取蒲公英湯劑體的機(jī)制。方法在人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞模型上,用內(nèi)吞通路的特異性化學(xué)抑制劑,以及敲減內(nèi)吞通路中關(guān)鍵蛋白的手段,通過流式細(xì)胞計量術(shù)和激光共聚焦顯微鏡檢測,評估熒光標(biāo)記的蒲公英湯劑體進(jìn)入細(xì)胞的機(jī)制。結(jié)果親溶酶體物質(zhì)能顯著抑制蒲公英湯劑體進(jìn)入細(xì)胞(P<0.05);巨胞飲抑制劑細(xì)胞松弛素D和阿米洛利能顯著降低蒲公英湯劑體的胞內(nèi)攝入(P<0.001),且呈現(xiàn)劑量依賴性;敲減Rac1和PAK1也有效地抑制其進(jìn)入細(xì)胞(P<0.05)。結(jié)論蒲公英湯劑體通過內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞且主要由巨胞飲介導(dǎo)。
【文章來源】:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2019,39(07)
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 細(xì)胞系:
1.1.2 試劑:
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng):
1.2.2 蒲公英湯劑體的分離:
1.2.3 蒲公英湯劑體的定量:
1.2.4 PKH67熒光染料標(biāo)記蒲公英湯劑體:
1.2.5 蒲公英湯劑體劑量和孵育時間研究:
1.2.6 抑制劑研究:
1.2.7 siRNA轉(zhuǎn)染:
1.2.8 內(nèi)吞實驗:
1.2.9 免疫印跡法 (Western blot) 檢測相關(guān)基因的蛋白表達(dá):
1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 蒲公英湯劑體能進(jìn)入A549細(xì)胞
2.2 蒲公英湯劑體通過內(nèi)吞進(jìn)入A549細(xì)胞
2.3 蒲公英湯劑體進(jìn)入A549細(xì)胞不通過網(wǎng)格蛋白依賴性及非依賴性內(nèi)吞途徑
2.4 巨胞飲抑制劑顯著抑制蒲公英湯劑體進(jìn)入A549細(xì)胞
2.5 PAK1、Rac1 siRNA可抑制蒲公英湯劑體進(jìn)入A549細(xì)胞
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Herbal decoctosome is a novel form of medicine[J]. Xiaoyun Li,Zhu Liang,Jianchao Du,Zhiqing Wang,Song Mei,Zhiqing Li,Yan Zhao,DANDan Zhao,Yiming Ma,Jun Ye,Jiantao Xu,Yu Zhao,Jiahui Chang,Yuhao Qin,Lanlan Yu,Chenxuan Wang,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
[2]Plant-derived phosphocholine facilitates cellular uptake of anti-pulmonary fibrotic HJT-sRNA-m7[J]. Jianchao Du,Zhu Liang,Jiantao Xu,Yan Zhao,Xiaoyun Li,Yanli Zhang,DANDan Zhao,Ruxuan Chen,Yang Liu,Trupti Joshi,Jiahui Chang,Zhiqing Wang,Yanxu Zhang,Jindong Zhu,Qiang Liu,Dong Xu,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
[3]Large-scale analysis of small RNAs derived from traditional Chinese herbs in human tissues[J]. Fengming Huang,Jianchao Du,Zhu Liang,Zhichao Xu,Jiantao Xu,Yan Zhao,Yexuan Lin,Song Mei,Quan He,Jindong Zhu,Qiang Liu,Yanxu Zhang,Yuhao Qin,Wei Sun,Jingyuan Song,Shilin Chen,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
本文編號:3021384
【文章來源】:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2019,39(07)
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 細(xì)胞系:
1.1.2 試劑:
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng):
1.2.2 蒲公英湯劑體的分離:
1.2.3 蒲公英湯劑體的定量:
1.2.4 PKH67熒光染料標(biāo)記蒲公英湯劑體:
1.2.5 蒲公英湯劑體劑量和孵育時間研究:
1.2.6 抑制劑研究:
1.2.7 siRNA轉(zhuǎn)染:
1.2.8 內(nèi)吞實驗:
1.2.9 免疫印跡法 (Western blot) 檢測相關(guān)基因的蛋白表達(dá):
1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 蒲公英湯劑體能進(jìn)入A549細(xì)胞
2.2 蒲公英湯劑體通過內(nèi)吞進(jìn)入A549細(xì)胞
2.3 蒲公英湯劑體進(jìn)入A549細(xì)胞不通過網(wǎng)格蛋白依賴性及非依賴性內(nèi)吞途徑
2.4 巨胞飲抑制劑顯著抑制蒲公英湯劑體進(jìn)入A549細(xì)胞
2.5 PAK1、Rac1 siRNA可抑制蒲公英湯劑體進(jìn)入A549細(xì)胞
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Herbal decoctosome is a novel form of medicine[J]. Xiaoyun Li,Zhu Liang,Jianchao Du,Zhiqing Wang,Song Mei,Zhiqing Li,Yan Zhao,DANDan Zhao,Yiming Ma,Jun Ye,Jiantao Xu,Yu Zhao,Jiahui Chang,Yuhao Qin,Lanlan Yu,Chenxuan Wang,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
[2]Plant-derived phosphocholine facilitates cellular uptake of anti-pulmonary fibrotic HJT-sRNA-m7[J]. Jianchao Du,Zhu Liang,Jiantao Xu,Yan Zhao,Xiaoyun Li,Yanli Zhang,DANDan Zhao,Ruxuan Chen,Yang Liu,Trupti Joshi,Jiahui Chang,Zhiqing Wang,Yanxu Zhang,Jindong Zhu,Qiang Liu,Dong Xu,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
[3]Large-scale analysis of small RNAs derived from traditional Chinese herbs in human tissues[J]. Fengming Huang,Jianchao Du,Zhu Liang,Zhichao Xu,Jiantao Xu,Yan Zhao,Yexuan Lin,Song Mei,Quan He,Jindong Zhu,Qiang Liu,Yanxu Zhang,Yuhao Qin,Wei Sun,Jingyuan Song,Shilin Chen,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
本文編號:3021384
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