從事這項研究工作的目的和重要性:基于目前生活條件變化和工作壓力的增大,糖尿病患者的人數不斷的增加,尤其是Ⅱ型糖尿病的許多方面仍是一個挑戰(zhàn),同時也促使他們在開發(fā)治療糖尿病的療法方面越來越具有創(chuàng)新性。小球藻除營養(yǎng)保健功效外,利用小球藻作為生物能源的生產原料也備受可再生能源領域的關注。隨著人類研究的逐步深入,其潛在的營養(yǎng)和藥用價值將被充分挖掘,開發(fā)利用小球藻資源必將前景廣闊。研究表明小球藻中活性物質對人體大有益處,因此針對其對-葡萄糖苷酶的抑制活性作相關性研究。實驗內容主要涉及小球藻中的活性物質的粗提取方法操作,經高壓熱水抽提,離心、萃取、旋蒸、過濾等,獲得的含有活性物質的粗提樣品的分析。再經過硅膠板薄層層析法的純化,不斷摸索展開劑的兩相和比例,使之呈現出條帶并確定含有活性的條帶。小球藻活性物質的分離提取中,對有機溶劑的比例、萃取時間進行了優(yōu)化。在進行薄層層析分離時,對展開劑的選擇和比例做優(yōu)化處理。對小球藻粗提物進行了體外模型酶抑制反應的活性初測試。對小球藻活性物質進行高效液相分析,從該物質中分離出四種化合物。并對四種化合物做酶抑制活性檢測,對其中一種有a-葡萄糖苷酶抑制劑作用的化合物進行收... 

【文章來源】：上海師范大學上海市

【文章頁數】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 小球藻及治療糖尿病藥物的研究與應用現狀
        1.1.1 小球藻的概述
        1.1.2 小球藻的生物學特性
        1.1.3 小球藻的應用現狀
        1.1.4 小球藻的藥用價值
        1.1.5 糖尿病的四種類型及Ⅱ型糖尿病的主要用藥
        1.1.6 治療糖尿病的研究方法突破
    1.2 小球藻中活性物質及有效成分提取方法的研究進展
        1.2.1 小球藻中活性物質的研究現狀
        1.2.2 有機溶劑的萃取
        1.2.3 薄層層析法
        1.2.4 葡聚糖凝膠柱
        1.2.5 HPLC高效液相色譜
    1.3 α-葡萄糖苷酶和抑制劑的概述及酶動力學方法研究
        1.3.1 α-葡萄糖苷酶的概述
        1.3.2 α-葡萄糖苷酶的來源
        1.3.3 α-葡萄糖苷酶的生物學功能
        1.3.4 α-葡萄糖苷酶抑制劑的研究現狀
        1.3.5 α-葡萄糖苷酶抑制劑的作用原理機制
        1.3.6 酶促反應動力學的概述
        1.3.7 α-葡萄糖苷酶抑制劑的相關酶動力學研究方法
    1.4 本課題的立題背景及研究意義
第二章 小球藻中活性物質的初步分離提取及實驗方案
    2.1 實驗課題方案設計
    2.2 實驗儀器與試劑
        2.2.1 實驗原料、儀器
        2.2.2 實驗試劑、材料
    2.3 實驗方法
        2.3.1 活性物質的粗提取
        2.3.2 硅膠板薄層層析
    2.4 結果分析
        2.4.1 小球藻粉中活性物質粗提的制備結果
        2.4.2 有機溶劑的萃取結果
        2.4.3 硅膠板薄層層析的結果
    2.5 本章小結
第三章 活性物質分離的條件優(yōu)化及酶活測試
    3.1 實驗試劑與儀器
        3.1.1 實驗材料、試劑
        3.1.2 實驗儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 樣品中a-葡萄糖苷酶抑制劑的活性測試
        3.2.2 提取中沉淀大分子無水乙醇比例和時間的優(yōu)化
        3.2.3 層析展開劑比例的優(yōu)化
        3.2.4 硅膠粉的浸泡溶劑
        3.2.5 不同濃度的阿卡波糖酶活測試
    3.3 結果與分析
        3.3.1 樣品中a-葡萄糖苷酶抑制劑的活性測試結果
        3.3.2 無水乙醇比例和時間的結果分析
        3.3.3 不同展開劑比例的結果
        3.3.4 硅膠粉的浸泡溶劑確定
        3.3.5 阿卡波糖酶活測試結果
    3.4 本章小結
第四章 HPLC液相譜圖分析及目標化合物的收集
    4.1 實驗試劑與儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 流動相最佳比例確定
        4.2.2 分離出四種活性物質的酶活測試
        4.2.3 粗提物薄層層析的液相圖
        4.2.4 收集的目標產物純度檢測
    4.3 實驗結果與分析
        4.3.1 提取的小球藻中活性物質色譜圖
        4.3.2 四種活性物質的酶活測試
        4.3.3 粗提物薄層層析的液相圖結果分析
        4.3.4 目標產物的純度優(yōu)化結果
    4.4 本章小結
第五章 活性化合物的核磁譜圖
    5.1 實驗儀器與試劑
    5.2 目標產物的核磁譜圖
    5.3 目標產物的質譜圖
    5.4 結果分析
    5.5 本章小結
第六章 活性物質與酶的反應動力學研究
    6.1 實驗試劑與儀器
    6.2 實驗方法
        6.2.1 可逆與不可逆抑制類型的測定
        6.2.2 酶促反應的條件優(yōu)化
        6.2.3 可逆抑制作用的競爭類型
        6.2.4 利用作圖法求Km
    6.3 實驗結果
        6.3.1 可逆抑制類型的確定
        6.3.2 最佳酶促反應OD值變化趨勢
        6.3.3 抑制劑競爭類型的測試結果
        6.3.4 動力學參數Km值
    6.4 本章小結
第七章 結論與展望
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝



本文編號：2998646