母乳菌群是影響新生兒健康的重要影響因素之一,而健康的母乳是一個(gè)重要的益生菌篩選庫(kù)。作為益生菌制劑的細(xì)菌,植物乳桿菌具有用途廣泛、適應(yīng)性強(qiáng)的特點(diǎn)。然而,不同菌株益生功能存在明顯差異性,現(xiàn)有的生理生化方法對(duì)其潛在益生機(jī)制研究仍顯不足,采用高通量的方法尋找具有種群特異性的益生菌將尤為有意義。因此,本研究旨在從母乳中篩選出植物乳桿菌作為益生菌候選株,并進(jìn)行全基因組測(cè)序,即在基因組的結(jié)構(gòu)上對(duì)菌株的表型進(jìn)行探究,最終希望將菌株商業(yè)化后添加進(jìn)嬰幼兒配方食品中,以最佳的方式模擬母乳,提供給因一些特殊原因不能實(shí)現(xiàn)母乳喂養(yǎng)的嬰幼兒,保證其健康。本實(shí)驗(yàn)選取10例健康母乳樣本進(jìn)行益生菌株的分離、培養(yǎng)與鑒定,共獲得59株潛在益生菌(共9個(gè)種),通過(guò)Illumina Hiseq X ten測(cè)序儀對(duì)其中2株植物乳桿菌株進(jìn)行全基因組測(cè)序并取得以下研究結(jié)果。1.對(duì)母乳來(lái)源的2株植物乳桿菌分別命名為,植物乳桿菌MP37、MP55;2.MP37、MP55具有利用多種碳源作為底物的特點(diǎn);MP37最適初始pH為6.8、最適培養(yǎng)溫度為37℃;MP55最適初始pH為6.5、最適培養(yǎng)溫度為37℃;3.MP37、MP55經(jīng)過(guò)人工胃、腸液消化后,其活菌數(shù)量均大于1×10~6CFU/mL;其對(duì)于Caco-2細(xì)胞系的黏附率分別為76%、0.56%;4.MP37、MP55均為非溶血性菌株;其益生能力包括產(chǎn)β-半乳糖苷酶、抑菌性、以及對(duì)抗高脂飲食引起的肝臟脂肪病變的能力。5.全基因組測(cè)序結(jié)果表明,MP55、MP37基因組大小分別為3299180 bp、3204421 bp;GC含量分別為44.46%、44.36%;分別存在3101、3012個(gè)基因編碼序列;結(jié)合菌株生化特征在基因組上找到4個(gè)與腸液耐受相關(guān)的基因以及與細(xì)菌素合成相關(guān)基因簇;并且兩菌株均不存在可移動(dòng)的遺傳性耐藥元件。綜上所述,母乳源植物乳桿菌MP37、MP55是兩株潛在的益生菌候選株,本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步闡明其益生菌特性的功能機(jī)理提供了遺傳學(xué)基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：河北科技師范學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：Q78;TS201.3
【部分圖文】：

圖 1-1 益生菌發(fā)展史中的里程碑時(shí)刻[26]Fig. 1-1 Timeline of selected milestones in the history of probiotics1.2.2 益生菌分類目前的益生菌菌株主要來(lái)源于人體腸道或傳統(tǒng)的發(fā)酵食品中，如泡菜、酸奶和開(kāi)菲爾[26]。其分類情況如下：第一類，產(chǎn)乳酸的細(xì)菌菌屬，例如乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬和鏈球菌屬；第二類，不產(chǎn)乳酸型細(xì)菌菌屬，例如梭狀芽胞桿菌屬、產(chǎn)丙酸一類菌；第三類，非病原性酵母菌，例如酵母菌；第四類，無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛的一類桿菌或球桿菌[33]。1.2.3 益生菌的功能與作用機(jī)制益生菌是腸道微生物平衡的有效調(diào)節(jié)劑[34, 35]，可為人體提供很多健康益生功能[36]。這些功能包括增強(qiáng)人體腸道的屏障功能、促進(jìn)腸道蠕動(dòng)、通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)抑制的方式排除病原菌對(duì)腸道的黏附、合成維生素、中和致癌物等[37]；其益生機(jī)

孕緯燒騁浩琳希ㄍ?1-2b）、調(diào)節(jié)小腸上皮的屏障功能（圖1-2c）、產(chǎn)生抗菌因子（圖 1-2d）和激活宿主的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)（圖 1-2e,f）[38]。此外益生菌還可通過(guò)激活 T 淋巴細(xì)胞，增加 NK 細(xì)胞活性和抗炎細(xì)胞因子（如白細(xì)胞介素-10），減少促炎細(xì)胞因子（如白細(xì)胞介素-12 和白細(xì)胞介素-14）來(lái)降低人體呼吸道疾病的發(fā)病率[39]。

第一章 緒論碳、乙醇或乙酸鹽，屬于兼性異型發(fā)酵乳酸桿菌[42]；在基因組上，組相對(duì)比較小，全長(zhǎng)在 2.9-3.9 Mb 之間,GC 含量約在 45％左右[43]。 植物乳桿菌的益生作用研究進(jìn)展 2018 年,Yen-WennLiu 等[44]人通過(guò)對(duì)近 50 年的“植物乳桿菌”和“益線搜索發(fā)現(xiàn):20 世紀(jì) 70-90 年代，人們對(duì)“植物乳桿菌”的搜索記錄遠(yuǎn)生菌”；但在同一時(shí)期，人們對(duì)植物乳桿菌作為益生菌的認(rèn)識(shí)要少得代發(fā)展，益生菌搜索記錄在 20 世紀(jì) 90 年代末迅速上升，并一直持；21 世紀(jì)初，人們將植物乳桿菌作為一種益生菌進(jìn)行搜索的頻率也可見(jiàn)研究者越來(lái)越關(guān)注并投身到益生菌以及益生菌與植物乳桿菌的 1-3）。
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本文編號(hào)：2848131