乳酸菌以生物膜的狀態(tài)存在時(shí)可以有效地抵御外界不良環(huán)境,從而更好的發(fā)揮益生特性。胞外多糖作為生物膜的主要成分,可以提高產(chǎn)品的質(zhì)地、風(fēng)味以及粘稠性,所以在食品加工中備受關(guān)注。本試驗(yàn)通過(guò)篩選得到10株高產(chǎn)生物膜的乳酸菌,將篩選出的10株乳酸菌進(jìn)行潛在益生特性的研究,篩選得到益生特性較好的乳酸菌RJ2-1-4和TG1-1-10進(jìn)行胞外多糖的研究,通過(guò)對(duì)胞外多糖分泌條件的優(yōu)化得到最佳培養(yǎng)條件。主要結(jié)果如下:以發(fā)酵乳制品中分離得到的41株乳酸菌為研究對(duì)象,采用結(jié)晶紫染色法對(duì)其生物膜的形成量進(jìn)行測(cè)定,從中篩選出10株高產(chǎn)生物膜的乳酸菌。經(jīng)16S rRNA基因片段序列分析得出,乳酸菌RM1-1-4、TG1-1-10、RJ2-1-4、TG1-1-11為乳酸片球菌,RJ1-1-4為植物乳桿菌,TG7-1-1為乳酸乳球菌,TG7-1-6為乳酸乳球菌乳脂亞種,RM3-14、RM2-1-5為耐久腸球菌,TG5-1-5為腸膜明串珠菌。乳酸片球菌TG1-1-11、TG1-10、RJ2-1-4、耐久腸球菌RM2-1-5表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐酸性,植物乳桿菌RJ1-1-4、乳酸乳球菌TG7-1-1、乳酸乳球菌乳脂亞種TG7-1-6、腸膜明串珠菌TG5-1-5、乳酸片球菌RM1-1-4、耐久腸球菌RM3-1-4表現(xiàn)出較好的耐堿性;膽鹽耐受試驗(yàn)結(jié)果顯示,乳酸片球菌TG1-1-11、TG1-1-10、RJ2-1-4、耐久腸球菌RM2-1-5、RM3-1-4、植物乳桿菌RJ1-1-4具有良好的膽鹽耐受特性;人工胃、腸液試驗(yàn)結(jié)果顯示,乳酸片球菌RJ2-1-4和TG1-1-10表現(xiàn)出較好的耐受特性。以前期試驗(yàn)得到的具有良好益生特性的乳酸片球菌RJ2-1-4和TG1-10為試驗(yàn)菌株,通過(guò)對(duì)接種量、培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基pH值、NaCl濃度的改變,分析得到胞外多糖的變化規(guī)律為:RJ2-1-4和TG1-10在接種量分別為3%和1%時(shí),胞外多糖產(chǎn)量達(dá)到最大值;隨著培養(yǎng)時(shí)間(6-36 h)的延長(zhǎng)和培養(yǎng)基pH值(1.5-8.5)的增大胞外多糖產(chǎn)量呈先增加后降低的趨勢(shì):隨著NaCl濃度的增大胞外多糖產(chǎn)量呈現(xiàn)先降低后增加再降低的趨勢(shì)。最后,對(duì)乳酸菌培養(yǎng)基成分進(jìn)行優(yōu)化,通過(guò)正交試驗(yàn)得出乳酸菌RJ2-1-4產(chǎn)胞外多糖的最佳培養(yǎng)基組合為:葡萄糖為20 g/L,大豆蛋白胨為20 g/L,磷酸氫二鉀為8g/L。乳酸菌TG1-1-10產(chǎn)胞外多糖的最佳培養(yǎng)基組合為:葡萄糖為40g/L,大豆蛋白胨為20g/L,磷酸氫二鉀為2g/L。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：Q93;TS201.3
【部分圖文】：

圖１?２１株乳酸菌在１３ｈ生物膜生成量??Ｆｉｇ．ｌ?Ｂｉｏｆｉｌｍ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?２１?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｆ?ＬＡＢ?１３?ｈｏｕｒｓ??注：不同字母表示不同菌株產(chǎn)生物膜差異顯著（ｐ＜０．?０５）

圖２?１３株乳酸菌在１６ｈ生物膜生成量??Ｆｉｇ．２?Ｂｉｏｆｉｌｍ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?１３?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｆ?Ｌ八Ｂ?１６?

圖３乳酸菌１６Ｓ?ｒＤＮＡ基因ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖??Ｆｉｇ．３?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣＲ－ａｍｐｌｉｆｉｅｄ?１６Ｓ?ｒ?ＤＮＡ?ｇｅｎｅ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ?ｆｒｏｍ?ＬＡＢ??
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2846616