黃曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)是由黃曲霉、寄生曲霉和特曲霉等曲霉屬真菌產生的次生代謝產物,是對人類健康和社會經(jīng)濟發(fā)展危害程度排在第一位的真菌毒素。生物降解黃曲霉毒素方法具有高效性、安全性、環(huán)境友好性等一系列優(yōu)勢,成為近年來研究人員關注的熱點。為探尋可用于實際生產的黃曲霉毒素生物脫毒劑,本研究選擇一株短黃桿菌3J2MO,對其降解黃曲霉毒素的能力進行研究:1.研究探明短黃桿菌3J2MO具降解多種黃曲霉毒素的能力。將菌株3J2MO與系列濃度的不同種類黃曲霉毒素及其前體雜色曲霉毒素混合培養(yǎng)5 d,測定并計算毒素降解率。結果顯示,在菌株3J2MO處理下,黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1和雜色曲霉毒素均發(fā)生了降解,每毫升菌液對五種黃曲霉毒素的降解量均可達500 ng以上,研究及文獻比對結果表明,短黃桿菌3J2MO是目前能高效降解黃曲霉毒素種類最多的菌株,為農產品黃曲霉毒素污染減控提供了新的材料。2.研究明確了短黃桿菌3J2MO及其降解黃曲霉毒素B1產物發(fā)酵液的安全性。通過小鼠急性腹腔注射致病性試驗,測定了菌株3J2MO及其降解黃曲霉毒素B1產物發(fā)酵液的致病性,結果顯示二者無致病性;通過大鼠急性經(jīng)口毒性試驗測定二者的急性經(jīng)口毒性,結果表明二者急性經(jīng)口毒性屬微毒級別;通過大鼠急性經(jīng)皮毒性試驗測定菌株3J2MO及其降解黃曲霉毒素B1產物發(fā)酵液的急性經(jīng)皮毒性,結果顯示二者急性經(jīng)皮毒性水平屬低毒級別。研究結果表明,短黃桿菌3J2MO降解農產品黃曲霉毒素具有高效、安全的特點,具有重要開發(fā)價值。3.研究建立了花生粕中黃曲霉毒素短黃桿菌3J2MO固態(tài)發(fā)酵法安全降解技術。通過單因素研究,探明菌液培養(yǎng)時間、樣品培養(yǎng)時間、菌液接種量三個因素是菌株3J2MO降解花生粕中黃曲霉毒素的主要影響因素。通過響應面試驗分析法,最終確定花生粕中黃曲霉毒素短黃桿菌3J2MO固態(tài)發(fā)酵法安全降解技術,即菌液培養(yǎng)時間29.04 h,樣品培養(yǎng)時間78.72 h,菌液接種量4.12 mL(菌濃度為2.39*10~9 cfu/mL)。應用建立的黃曲霉毒素短黃桿菌3J2MO安全降解技術,花生粕中黃曲霉毒素降解率可達71.95%。本研究為農產品中黃曲霉毒素污染減控提供了高效、安全的新方法。4.測定了短黃桿菌3J2MO全基因組序列并探尋候選降解酶。對菌株3I2MO進行全基因組測序并組裝,測序結果表明該菌株基因組由一條環(huán)化的染色體組成,沒有質粒,基因組大小約3.99Mbp,對功能基因進行注釋并分析,初步定位了一種可能的黃曲霉毒素降解酶,為降解機理的揭示提供了科學依據(jù)。本文研究結果表明,短黃桿菌3J2MO為開發(fā)農產品黃曲霉毒素脫毒劑提供了新途徑。
【學位單位】：中國農業(yè)科學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：TS201.3
【部分圖文】：

解率隨時間和毒素含量變化的趨勢 為例，研究短黃桿菌 3J2MO 降解黃曲霉毒素效率隨時間和毒素含量FB1 標準溶液與供試菌株短黃桿菌 3J2MO 發(fā)酵液于 10 mL LB 液體終質量濃度設置為 50、100、200、500、1000 ng/mL，菌液終濃度為（28oC，200 r/min）中培養(yǎng)，分別于第 0、6、12、24、48、72、96、，其余條件同 2.3.2.1。分析rosoft Excel 2010 和 SAS 9.2 軟件進行數(shù)據(jù)分析，結果以均值和標準差差分析法和 Duncan 多重比較法對均值進行分析比較，當 P<0.05，認、b、c、d 來表示不同的顯著性水平。本章研究中以實驗室保存的一得大腸桿菌對黃曲霉毒素的降解率范圍是-0.4%~0.96%。菌 3J2MO 降解毒素的種類范圍研究菌 3J2MO 對 AFB1 降解能力的探究

碩士學位論文 第二章 短黃桿菌3J2MO對不同種類黃曲霉毒素及雜色曲霉素黃桿菌 3J2MO 對黃曲霉毒素 B1 的作用效果，將菌株發(fā)酵液與黃曲培養(yǎng)基中混合后置于恒溫搖床中（28oC，200 r/min）共培養(yǎng)（初始毒素濃度為 100 ng/mL），5 d 后測得黃曲霉毒素 B1 含量變?yōu)?6.18 ng1 含量具有顯著性差異，降解率高達 93.82%，足以證明該菌株具有菌 3J2MO 對 AFB2 降解能力的探究

圖 2.2AFB2 降解前后毒素含量變化Figure 2.2 Changes of AFB2 concentration before and after degradation黃桿菌 3J2MO 對黃曲霉毒素 B2 的作用效果，將菌株發(fā)酵液與黃曲 LB 培養(yǎng)基中混合后置于恒溫搖床中（28oC，200 r/min）共培養(yǎng)（初始素濃度為 100 ng/mL），5 d 后黃曲霉毒素 B2 含量發(fā)生了顯著變化，變以應用于黃曲霉毒素 B2 的降解，且降解效率達到 90%以上。菌 3J2MO 對 AFG1 降解能力的探究
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