【摘要】：蝦青素超強(qiáng)的抗氧化性賦予了其突出的生理功能,尤其在提高免疫力、清除自由基、活性氧等方面作用顯著,其在食品、化妝品、藥品等方面具有廣泛的應(yīng)用價值和前景。雨生紅球藻是目前被認(rèn)為生產(chǎn)蝦青素較為理想的生物來源。所以,關(guān)于提高雨生紅球藻的生物量以及細(xì)胞內(nèi)蝦青素積累量的研究具有重要的意義。本研究在闡明的蝦青素合成通路的基礎(chǔ)上,研究了合成途徑中的三個重要底物:番茄紅素、β-胡蘿卜素、玉米黃素對雨生紅球藻的生長及其積累蝦青素的影響,并對其作用機(jī)制進(jìn)行了初步分析。研究結(jié)果表明,不同濃度植物色素對雨生紅球藻的生長具有不同程度的影響,番茄紅素濃度為0.5 mg/L時,效果最佳,680 nm的吸光值為0.701,細(xì)胞密度達(dá)到6.25×10~5個/mL,相比對照組提高了8.51%。l.0 mg/L的處理組次之,吸光值為0.672,細(xì)胞密度為6.01×10~5個/mL。β-胡蘿卜素添加濃度為1.0 mg/L時,效果最佳,680 nm的吸光值為0.705,細(xì)胞密度達(dá)到6.57×10~5個/mL,相比對照組提高了9.03%。玉米黃素處理過的雨生紅球藻通常提前至第7天進(jìn)入穩(wěn)定期,相比對照組提前3天。在比較第10天的細(xì)胞密度發(fā)現(xiàn),1.0 mg/L的玉米黃素對雨生紅球藻的生長最為有利,吸光值為0.669,細(xì)胞密度達(dá)到5.98×10~5個/mL,相比對照組提高了3.81%。添加不同植物色素對蝦青素積累的影響研究結(jié)果表明,當(dāng)番茄紅素的添加量為0.5mg/L時,對雨生紅球藻積累蝦青素的作用最為明顯,較對照組增加了88%。1.0mg/L的β-胡蘿卜素處理組效果最為明顯,處理第15天時,該處理組蝦青素含量為18.817 mg/L,比對照組提高了71.37%。玉米黃素對于雨生紅球藻累積蝦青素的實驗結(jié)果表明,其對蝦青素產(chǎn)量影響不顯著。對外源添加色素影響蝦青素積累的作用機(jī)制進(jìn)行研究,選取了在蝦青素合成通路中與植物色素有關(guān)的三個關(guān)鍵酶,并對實驗組和對照組的關(guān)鍵酶基因表達(dá)量水平進(jìn)行檢測。誘導(dǎo)條件下,雨生紅球藻蝦青素的大量合成經(jīng)常伴隨著蝦青素合成相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平的高表達(dá)。用qRT-PCR的方法測定0.5 mg/L番茄紅素和1.0 mg/Lβ-胡蘿卜素誘導(dǎo)的雨生紅球藻蝦青素相關(guān)合成基因相對表達(dá)水平。在高光照、高溫誘導(dǎo)條件下,實驗組的蝦青素合成相關(guān)基因bkt、lcy、CrtR-B均出現(xiàn)了較高表達(dá)。該實驗對不同植物色素濃度條件下β-胡蘿卜素酮化酶、β-胡蘿卜素羥化酶、番茄紅素β-環(huán)化酶編碼基因表達(dá)量的測定結(jié)果表明,bkt、lcy、CrtR-B基因表達(dá)量的高低與蝦青素的合成有著直接的聯(lián)系。這說明一定濃度的植物色素可以通過改變代謝過程關(guān)鍵酶基因的表達(dá)進(jìn)而調(diào)控蝦青素的積累。該研究初步揭示了可以通過外源添加植物色素的方式,可以改善雨生紅球藻生長狀況,提高其應(yīng)激條件下的蝦青素累積量,為開展大規(guī)模養(yǎng)殖及蝦青素生產(chǎn),提供了新思路。
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：Q945
【圖文】：

利用 ANOVA（SPSS驗調(diào)查不同實驗的組間差異。A 樣品各取 2 μl 進(jìn)行瓊脂糖 RNA、DL2000 Marker。結(jié)好，基本沒有降解，且 OD

圖 4.2 反轉(zhuǎn)錄結(jié)果相關(guān)酶基因表達(dá)量分導(dǎo)時間內(nèi), 色素處理組和 的表達(dá)水平。由圖可知，著高于對照組,在 11 d 時，的表達(dá)量分別在 5 d、13 d后呈現(xiàn)下降趨勢;而添加在第 11d 達(dá)到最高，分別的添加與對照組有顯著差***

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本文編號：2790205