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基于高通量測(cè)序數(shù)據(jù)的跨界sRNA數(shù)據(jù)分析方法研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-18 18:50
【摘要】:Small RNA(sRNAs)是一類(lèi)長(zhǎng)度在幾十至幾百個(gè)核苷酸之間的非編碼小分子RNA,在生物體內(nèi)通過(guò)和靶mRNA堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合進(jìn)而調(diào)控基因表達(dá),從而參與控制細(xì)胞的多種生物過(guò)程。最初,sRNA由于長(zhǎng)度過(guò)小,很難被檢測(cè)到。隨著高通量測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn),越來(lái)越多的sRNA不斷被發(fā)現(xiàn),其作為調(diào)控基因表達(dá)的重要調(diào)節(jié)因子也逐漸成為生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)問(wèn)題,F(xiàn)有研究證實(shí)sRNA在跨界調(diào)控中起著重要作用。由于sRNA的序列及結(jié)構(gòu)與其進(jìn)入宿主細(xì)胞的能力息息相關(guān),因此從序列及結(jié)構(gòu)方面對(duì)跨界sRNA進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,進(jìn)而尋找并識(shí)別類(lèi)似的跨界sRNA,不僅可以發(fā)掘sRNA序列及結(jié)構(gòu)和功能的相關(guān)性,也對(duì)有效識(shí)別未知的跨界sRNA有重要意義。截止到目前,有關(guān)sRNA的研究主要集中在對(duì)sRNA的序列分析和靶基因功能識(shí)別方面,而對(duì)于跨界sRNA序列的研究還處于初期研究階段,且均是針對(duì)特定物種進(jìn)行研究。本文從生物計(jì)算入手,在研究常見(jiàn)RNA數(shù)據(jù)分析方法基礎(chǔ)上,基于真菌和植物、植物和人體sRNA高通量數(shù)據(jù)提出了一種跨界sRNA數(shù)據(jù)分析方法。首先應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析跨界sRNA序列及結(jié)構(gòu)信息,其次在對(duì)差異表達(dá)的跨界sRNA分析的基礎(chǔ)上,識(shí)別出可能影響sRNA進(jìn)入宿主細(xì)胞參與跨界調(diào)控的分子特征,構(gòu)建基于機(jī)器學(xué)習(xí)的跨界sRNA識(shí)別模型,用來(lái)識(shí)別可能被宿主吸收的外源性sRNA,進(jìn)而挖掘跨界sRNA可能存在的生物學(xué)意義及生物功能。本文首先收集真菌和植物、植物和人體sRNA數(shù)據(jù)并對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量、剪切識(shí)別等一系列預(yù)處理;然后,應(yīng)用機(jī)器學(xué)習(xí)方法對(duì)sRNA序列及結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行選擇構(gòu)建特征子集,進(jìn)而構(gòu)建跨界sRNA識(shí)別模型,用來(lái)對(duì)能夠進(jìn)入宿主細(xì)胞的sRNA進(jìn)行識(shí)別;最后,對(duì)模型進(jìn)行評(píng)估,并對(duì)識(shí)別的跨界sRNA進(jìn)行靶基因篩選、功能富集分析及基因相互作用關(guān)系挖掘,從而分析出其在生物系統(tǒng)中的功能。本文選用真菌和植物數(shù)據(jù)以及人類(lèi)和植物sRNA數(shù)據(jù)作為實(shí)例分別用本文提出的數(shù)據(jù)分析方法進(jìn)行研究,其中,對(duì)真菌和植物模型的正確率在84.5%,植物和人體正確率在78.2%。本文提出針對(duì)跨界sRNA高通量測(cè)序數(shù)據(jù)的分析方法為研究跨界sRNA進(jìn)入宿主細(xì)胞的能力與其結(jié)構(gòu)和特征間的關(guān)系提供了新的研究思路,為今后研究sRNA的跨界調(diào)控機(jī)制提供了新的研究方向,同時(shí)在農(nóng)作物,藥物和疾病等方面都有部分指導(dǎo)意義。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:TP181;Q811.4
【圖文】:

序列,產(chǎn)生過(guò)程


第 2 章 sRNA 調(diào)控機(jī)理RNA 分子概述及作用機(jī)制A 的產(chǎn)生一般包括轉(zhuǎn)錄、加工和降解等過(guò)程,種類(lèi)繁多且具有不同的A 在形成和發(fā)揮調(diào)控作用過(guò)程中所依賴(lài)的蛋白質(zhì)及內(nèi)切酶都是共享的物和植物中,基于 sRNA 的轉(zhuǎn)錄過(guò)程及生物發(fā)生途徑,一般分為兩和 siRNA[29]。其中,miRNA 來(lái)自非蛋白質(zhì)編碼基因,具有保守性。其先在細(xì)胞核中形成長(zhǎng)達(dá)幾千核苷酸的初級(jí)轉(zhuǎn)錄物 pri-miRNA;隨后,pa-DGCR8 加工成前體轉(zhuǎn)錄物 pre-miRNA,這時(shí)的 miRNA 成發(fā)卡狀結(jié)構(gòu)ase III 型核糖核酸內(nèi)切酶中的 Dicer 酶,pre-miRNA 被切割成成熟雙),雙鏈 miRNA 被切割成單鏈 miRNA。這個(gè)單鏈 miRNA 就是最終真因序列,具體過(guò)程如圖 2.1 所示。

基于高通量測(cè)序數(shù)據(jù)的跨界sRNA數(shù)據(jù)分析方法研究


FastQC結(jié)果項(xiàng)-Adapter

真菌侵染,侵染,序列信息,宿主細(xì)胞


圖 5.1 標(biāo)準(zhǔn)化后的部分跨界 sRNA 序列信息為了更高效率地探究能夠進(jìn)入宿主細(xì)胞的 sRNA,本文通過(guò)分析真菌 sRNA 序后表達(dá)量的變化,最終選取了真菌侵染后的 220 條及侵染后新產(chǎn)生的 146 條 作為陽(yáng)性數(shù)據(jù)集,即正樣本。在所有數(shù)據(jù)集中,去除陽(yáng)性數(shù)據(jù)集,剩余 97981為陰性數(shù)據(jù)集,即負(fù)樣本。由于正負(fù)數(shù)據(jù)集相差過(guò)大會(huì)造成類(lèi)不平衡問(wèn)題,從

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