水酶法由于在環(huán)保以及脂質(zhì)和蛋白質(zhì)綜合利用方面的優(yōu)勢(shì),越來越受到關(guān)注。但是水酶法需要外加商業(yè)蛋白酶,增加了加工成本。本實(shí)驗(yàn)室的前期研究發(fā)現(xiàn),芝麻漿離心所得到的上浮乳狀液(油體富集物)中含有活性較強(qiáng)的內(nèi)源性蛋白酶,具有代替商業(yè)蛋白酶制劑來酶解芝麻油體富集物制油的潛力。但是,目前對(duì)于這些內(nèi)源性蛋白酶的水解條件還沒有系統(tǒng)研究。基于此,本研究的思路如下:首先考察離心分離前的預(yù)處理對(duì)于脂質(zhì)和蛋白質(zhì)分離效果的影響,再系統(tǒng)考察了油體富集物中內(nèi)源性蛋白酶的種類及其水解條件,最后考察內(nèi)源性蛋白酶對(duì)于油體富集物破乳制油的作用效果。首先,探究了芝麻漿液的制備及其離心分離的工藝條件。結(jié)果表明,三次打漿可以使得芝麻中90%以上的脂質(zhì)、87%的蛋白質(zhì)和89%的固形物進(jìn)入漿液。當(dāng)漿液調(diào)節(jié)pH至8.0,離心可使?jié){液中80%的脂質(zhì)和7%的蛋白質(zhì)分布于油體富集物中。其次,對(duì)油體富集物中的內(nèi)源性蛋白酶系進(jìn)行了鑒定,并考察了水解pH范圍和溫度范圍。LC-MS/MS以及二維電泳和MALDI-TOF/TOF-MS聯(lián)用的檢測(cè)結(jié)果表明,油體富集物中含有多種內(nèi)源性蛋白酶,包括內(nèi)肽酶和外肽酶:內(nèi)肽酶包括7種天冬氨酸蛋白酶,2種絲氨酸蛋白酶...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖1-1油體結(jié)構(gòu)示意圖

江南大學(xué)碩士學(xué)位論文2酰絲氨酸占22.1%。圖1-1油體結(jié)構(gòu)示意圖。油體鈣蛋白和油體固醇蛋白在本圖中沒有顯示。Fig.1-1Thestructuremodelofoilbody.Caleosinandsteroleosinarenotshowninthisfigure.如圖1-1....

圖1-2油質(zhì)蛋白結(jié)構(gòu)示意圖

江南大學(xué)碩士學(xué)位論文2酰絲氨酸占22.1%。圖1-1油體結(jié)構(gòu)示意圖。油體鈣蛋白和油體固醇蛋白在本圖中沒有顯示。Fig.1-1Thestructuremodelofoilbody.Caleosinandsteroleosinarenotshowninthisfigure.如圖1-1....

圖2-1不同pH提取的油體富集物的制備流程圖

2材料與方法9水，以18000r/min打漿2min后過濾，取渣加入2M去離子水，以18000r/min打漿1min后過濾，取渣再加入2M去離子水，以18000r/min打漿1min后過濾，合并三次濾液。上述提到的M的單位均為g。2.3.2鹽和pH對(duì)脂質(zhì)和蛋白質(zhì)分離的影響2.3.....

圖2-2油體富集物制備流程圖

2材料與方法11份調(diào)節(jié)pH至9.0；分別添加AEBSF和PepstatinA，AEBSF的濃度為0、0.5和1.0mmol/L，PepstatinA的濃度為0、2和4μmol/L。而后將OB-1稀釋液置于60oC，OB-2和OB-3稀釋液置于50oC，分別在0、1、3h取樣，進(jìn)行....

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