近年來,花色苷的生物活性引起了越來越多的關(guān)注。然而,目前常用分離純化花色苷的方法多存在耗時(shí)長(zhǎng)、效率低、成本高、短時(shí)間內(nèi)難以獲得大量高純度花色苷單體等弊端,具有較大的局限性。與此同時(shí),隨著對(duì)糖基化終產(chǎn)物(AGEs)的研究發(fā)現(xiàn),AGEs的積累與糖尿病、阿茲海默綜合征及衰老有很大的關(guān)系,目前醫(yī)學(xué)研究使用的AGEs抑制劑如氨基胍、阿司匹林等對(duì)人體均可產(chǎn)生一定的毒副作用,因此,天然提取物對(duì)AGEs的抑制作用受到越來越多的關(guān)注。基于上述問題,本文建立不同結(jié)構(gòu)花色苷快速分離純化的方法,并通過建立不同糖基化階段模擬體系,探究不同結(jié)構(gòu)花色苷抑制熒光AGEs的構(gòu)效關(guān)系及抑制機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:(1)中壓快速分離系統(tǒng)制備不同花色苷單體建立了桑葚、紅樹莓、草莓、玫瑰茄以及黑枸杞5種原料中壓快速分離制備不同結(jié)構(gòu)花色苷方法。制備柱為flash C18(80 g,25～35μm,100A),A流動(dòng)相:2%甲酸水,B流動(dòng)相:甲醇,進(jìn)樣量300 mg,桑葚和紅樹莓花色苷粗提物洗脫程序:0～2min,20%B;2～22 min;20%～30%B;22～32min,30%～40%B;草莓及玫瑰茄花色苷粗提物洗脫程序:0...

【文章頁數(shù)】：123 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 緒論
    1 花色苷簡(jiǎn)介
        1.1 花色苷的結(jié)構(gòu)
        1.2 花色苷的來源及分布
    2 花色苷的分離純化國內(nèi)外研究進(jìn)展
        2.1 高速逆流色譜
        2.2 半制備高效液相色譜
        2.3 凝膠柱層析法
    3 植物多酚抑制糖基化終產(chǎn)物(AGEs)的研究概況
        3.1 食品中糖基化終產(chǎn)物產(chǎn)生的途徑
        3.2 植物多酚抑制AGEs的國內(nèi)外研究概況
            3.2.1 酚酸
            3.2.2 芪類
            2.2.3 類黃酮
        3.3 植物多酚抑制糖基化反應(yīng)途徑
            3.3.1 減少糖基化過程產(chǎn)生的自由基
            3.3.2 螯合金屬離子
            3.3.3 清除羰基化合物
            3.3.4 保護(hù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)
    4 本論文研究目的意義及主要內(nèi)容
        4.1 研究目的及意義
        4.2 主要研究?jī)?nèi)容
第二章 不同結(jié)構(gòu)花色苷單體中壓快速分離制備方法的建立
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器設(shè)備
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.3 儀器設(shè)備
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 5種花色苷粗提物的提取
            1.2.2 5種花色苷粗提物HPLC檢測(cè)分析
            1.2.3 5種花色苷粗提物MPRSS條件的優(yōu)化
            1.2.4 所得級(jí)分純度測(cè)定
            1.2.5 UPLC-MS對(duì)所得花色苷級(jí)分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定
            1.2.6 半制備型高效液相色譜制備6種不同花色苷單體及純度檢測(cè)
    2 結(jié)果與分析
        2.1 5種花色苷粗提物花色苷含量的檢測(cè)
            2.1.1 桑葚花色苷粗提物花色苷含量的檢測(cè)
            2.1.2 紅樹莓花色苷粗提物花色苷含量的檢測(cè)
            2.1.3 草莓花色苷粗提物花色苷含量的檢測(cè)
            2.1.4 玫瑰茄花色苷粗提物花色苷含量的檢測(cè)
            2.1.5 黑枸杞花色苷粗提物花色苷含量的檢測(cè)
        2.2 MPRSS分離純化5種花色苷粗提物最優(yōu)條件確定
            2.2.1 5種花色苷粗提物最佳洗脫條件的驗(yàn)證
        2.3 所得級(jí)分的HPLC分析及質(zhì)譜結(jié)果鑒定
            2.3.1 所得級(jí)分的HPLC分析
            2.3.2 所得級(jí)分質(zhì)譜結(jié)果鑒定
    3 討論
    4 小結(jié)
第三章 花色苷抑制葡萄糖-β-Lg模擬體系熒光AGEs構(gòu)效關(guān)系及機(jī)理研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器設(shè)備
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 葡萄糖-β-Lg模擬體系的建立
            1.2.2 熒光AGEs的測(cè)定
            1.2.3 葡萄糖含量的測(cè)定
            1.2.4 游離Lys含量的測(cè)定
            1.2.5 游離Arg含量的測(cè)定
            1.2.6 二酪氨酸、N-甲�；虬彼岬臏y(cè)定
            1.2.7 GO、MGO含量的測(cè)定
            1.2.8 十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分析
            1.2.9 CML的測(cè)定
            1.2.10 分子對(duì)接
        1.3 統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 不同結(jié)構(gòu)花色苷抑制葡萄糖-β-Lg體系熒光AGEs的 IC₅₀值
        2.2 5種花色苷對(duì)早期羰胺反應(yīng)的抑制作用
            2.2.1 5種花色苷對(duì)葡萄糖-β-Lg模擬體系葡萄糖含量的影響
            2.2.2 5種花色苷對(duì)葡萄糖-β-Lg模擬體系游離Lys、Arg含量的影響..
        2.3 5 種花色苷對(duì)二酪氨酸、N-甲�；虬彼岬囊种谱饔�
        2.4 5 種花色苷對(duì)葡萄糖-β-Lg體系中GO、MGO含量的影響
        2.5 SDS-PAGE分析
        2.6 5 種不同結(jié)構(gòu)花色苷對(duì)葡萄糖-β-Lg體系CML的抑制作用
        2.7 分子對(duì)接
    3 討論
    4 小結(jié)
第四章 花色苷抑制GO-β-Lg及 MGO-β-Lg模擬體系熒光AGEs構(gòu)效關(guān)系及機(jī)理研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器設(shè)備
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 GO-β-Lg及 MGO-β-Lg模擬體系的建立
            1.2.2 熒光AGEs的測(cè)定
            1.2.3 游離Lys含量的測(cè)定
            1.2.4 游離Arg含量的測(cè)定
            1.2.5 GO含量的測(cè)定
            1.2.6 MGO含量的測(cè)定
            1.2.7 二酪氨酸、N-甲酰基犬尿氨酸的測(cè)定
            1.2.8 5 種花色苷對(duì)GO、MGO的清除機(jī)理探究
            1.2.9 蛋白質(zhì)羰基含量的測(cè)定
            1.2.10 蛋白質(zhì)巰基含量的測(cè)定
            1.2.11 SDS-PAGE分析
            1.2.12 CML的測(cè)定
        1.3 統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 7 種不同花色苷抑制GO-β-Lg及 MGO-β-Lg模擬體系熒光AGEs的IC₅₀值
            2.1.1 7 種不同花色苷抑制GO-β-Lg模擬體系熒光AGEs的 IC₅₀值
            2.1.2 7 種不同花色苷抑制MGO-β-Lg模擬體系熒光AGEs的 IC₅₀值
        2.2 5 種花色苷對(duì)GO-β-Lg及 MGO-β-Lg體系游離Lys、Arg含量的影響
            2.2.1 5 種花色苷對(duì)GO-β-Lg體系游離Lys、Arg含量的影響
            2.2.2 5 種花色苷對(duì)MGO-β-Lg體系游離Lys、Arg含量的影響
        2.3 5 種花色苷對(duì)GO-β-Lg模擬體系GO含量的影響
        2.4 5 種花色苷對(duì)MGO-β-Lg模擬體系MGO含量的影響
        2.5 5 種花色苷對(duì)GO-β-Lg及 MGO-β-Lg模擬體系二酪氨酸、N-甲酰基犬尿氨酸的抑制作用
            2.5.1 5 種花色苷對(duì)GO-β-Lg體系二酪氨酸、N-甲酰基犬尿氨酸的抑制作用
            2.5.2 5 種花色苷對(duì)MGO-β-Lg體系二酪氨酸、N-甲�；虬彼岬囊种谱饔�
        2.6 5 種花色苷對(duì)GO、MGO的清除機(jī)理探究
            2.6.1 5 種花色苷對(duì)GO、MGO的清除作用
            2.6.2 5 種花色苷與GO加合物的分析
            2.6.3 5 種花色苷與MGO加合物的分析
        2.7 5 種花色苷對(duì)GO-β-Lg及 MGO-β-Lg模擬體系蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的影響
            2.7.1 5 種花色苷GO-β-Lg及 MGO-β-Lg模擬體系蛋白質(zhì)羰基含量的影響
            2.7.2 5 種花色苷對(duì)GO-β-Lg及 MGO-β-Lg體系蛋白質(zhì)巰基含量的影響
            2.7.3 SDS-PAGE分析
        2.8 5 種花色苷對(duì)GO-β-Lg模擬體系中CML的抑制作用
    3 討論
    4 結(jié)論
第五章 結(jié)論與展望
    1 結(jié)論
        1.1 不同花色苷單體中壓快速制備方法的建立
        1.2 不同結(jié)構(gòu)花色苷抑制葡萄糖-β-Lg模擬體系熒光AGEs構(gòu)效關(guān)系及機(jī)理研究
        1.3 不同結(jié)構(gòu)花色苷抑制GO-β-Lg及 MGO-β-Lg模擬體系熒光AGEs構(gòu)效關(guān)系及機(jī)理研究
    2 展望
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3902449